Preparación de Medios de Cultivo y Tecnicas de

Preparacin de medios de cultivo y tecnicas de inoculacin
Los medios de cultivo son una mezcla de nutrientes que en concentraciones adecuadas y en condiciones fsicas ptimas, permiten el crecimiento de los microorganismos. Estos medios son realizados en el Laboratorio de Microbiologa por lo que el control de su fabricacin, preparacin, conservacin y uso,asegura la exactitud, confiabilidad y reproductibilidad de los resultados obtenidos. En los laboratorios de microbiologa se utilizan di ferentes tipos de medios de cultivo que pueden ser preparados en forma lquida, slida o semislido.
Usualmente para preparar un medio slido se parte de un medio lquido al que se le aade un agente solidificante como el agar, la gelatina o laslicagel. La prctica se desarrollo para adquirir conocimientos de cmo se prepara un medio de cultivo y aplicacin de tcnicas de siembra para la distribucin de colonias de microorganismos.
Generalidades de la inoculacin
En microbiologa se entiende por "siembra" la operacin que consiste en depositar ungermen aspticamente en un medio de cultivo. Toda siembra debe adaptarse a los siguientes principios generales: 1. Practicarla en medios de cultivo favorable y previamente esterilizado. 2. Emplear instrumentos aspticos 3. No contaminar ni destruir el inculo,
4. Depositarla aspticamente en los medios elegidos. 5. Esterilizar los instrumentos empleados antes y despus de cada operacin El instrumento corrientemente empleado en las siembras son los siguientes: El asa: Es un alambre de cromo nquel, tiene un dimetro de 0,3 a 1 mm. dedimetro y est sujeto a un mango de vidrio o de metal. El hilo puede terminar recto(aguja), en anillo (asa) o aplastado (esptula). Los medios de cultivo, como ya se ha dicho, pueden ser slidos o lquidos, y estar contenidos en tubos, placas o frascos. La tcnica general de las siembras variar segn el est ado fsico del material asembrar y del medio de cultivo.
Metodos de cultivo de uso rutinario

Al inocular debe trabajarse siempre dentro del radio de un mechero Bunsen (30 cm.),o, en el ambiente dentro de una campana de flujo laminar, ya que, la corriente ascendente de aire que va por la llama, o la corriente de aire del flujo laminar arrastra el polvo y otras partculas con el aire hacia arriba, o hacia afuera; impidiendo la contaminacin del medio de cultivo. El asa debe ser flameada adecuadamente y enfriada antes de tocar el inculo, o el medio de cultivo.
Siembra en placas
Con el asa ya esterilizada, se toma una gota de lquido o de una emulsin del producto patolgico y se deposita en un costado del agar de una placa Petri, se estra a partir de ese punto pasando suavemente el asa en zig-zag por la superficie del agar sin rasparlo, rotar la placa en 1/3 y repetir el procedimiento 2 a 3 veces. A menudo se reciben trulas para cultivo y con ellas se practic a la primera de las estras,procediendo despus a diseminar con el asa o pipeta en la forma des crita.
Siembra en tubos de agar tendido

El cuello del tubo debe ser flameado antes y despus de ser sembrado. Con el asa previamente esterilizada a la llama, se toma una pequea cantidad de la muestra y se lleva al fondo del tubo, luego se estra suavemente la superficie del medio en forma ondulante. Antes de introducir el tubo a la estufa de cultivo, debe dejarse suelto el tapn de goma para evitar que los gases expulsen el tapn.
Siembra por picadura

El inculo es introducido con el asa recta o pipeta pasteur hasta el fondo del medio con un solo movimiento y teniendo cuidado en hacer el mismo trayecto de entrada quede salida. Debe flamearse la boca del tubo antes y despus de la siembra. Antes de introducir el tubo a la estufa de cultivo debe soltarse el tapn de goma para evitar que los gases expulsen el tapn.
Siembra en superficie y picadura

El inculo es introducido con el asa recta o pipeta pasteur hasta el fondo del medio con un solo movimiento y teniendo cuidado en hacer el mismo trayecto de entrada quede salida, se retira hacia la superficie inclinada del agar haciendo suavemente una estra ondulada. Debe flamearse la boca del tubo antes y despus de la siembra. Antes de introducir el tubo a la estufa de cultivo debe soltarse el tapn de goma para evitar que los gases expulsen el tapn
Siembra en profundidad
Al inocular un medio lquido como es el tioglocolato, el tubo se inclina y el material se extrae del asa por frotamiento contra la pared del tubo, cuando ste se endereza el material se encuentra bajo la superficie del medio. Al inocular el medio lquido con trula o con inculo lquido se deposita este en el fondo del tubo. Debe flamearse la boca del tubo antes y despus de efectuada la siembra. Antes de introducir el tubo ala estufa de cultivo debe soltarse el tapn de goma para evitar que los gases expulsene tapn

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