Desde la bacteria y su manipulacin gentica hasta Dolly

HERENCIA
Es la constancia de los caracteres especficos a travs de

las generaciones.
La gentica estudia la transmisin de los

caracteres (genes) y la regulacin de la herencia.

 Los microorganismos ofrecen ventajas como objetos

para el estudio de los problemas genticos

pueden obtenerse un gran nmero de clulas idnticas

en un tiempo corto y en un espacio reducido,

proporcionan una molcula simple de DNA de fcil

aislamiento y purificacin.

Algunos trminos
Gen: es la unidad de la herencia, un segmento de

cido desoxirribonucleico (DNA) que lleva la informacin en su secuencia de nucletidos para una propiedad fisiolgica o bioqumica especfica.

 Genotipo: es el capital gentico de una clula.

Fenotipo: es el conjunto de caractersticas

genticas que pueden observarse o medirse.

 Genoma: es la suma de genes que posee una

bacteria en su cromosoma y si los tuviera, en elementos extracromosmicos como plsmidos y bacterifagos.

 Replicn o unidad de replicacin: es la secuencia

de nucletidos fija y heredable donde comienza la replicacin (origen de replicacin).

El cromosoma bacteriano, los plsmidos y el

genoma de los fagos son replicones nicos, pues contienen la informacin gentica necesaria para su propia replicacin.

 Promotor y operador: son secuencias de

nucletidos que controlan la expresin de un gen, influyendo sobre las secuencias de bases que sern transcriptas al RNA mensajero.
Opern: son grupos de uno o ms genes

estructurales, cuya funcin, como unidad integrada, est controlada por un gen operador.

 Clona o cepa microbiana: es una poblacin de

clulas con genes idnticos.

El modelo del DNA

Replicacin del DNA

Intercambio gentico de las bacterias

Plsmidos
son molculas circulares de DNA de doble cadena

con un nmero variable de pares de bases (de 1.500 a 400.000). regulan funciones especializadas, sobre todo las de relacin con el medio que rodea al microorganismo. factores de virulencia como: toxinas, bacteriocinas, adhesinas, resistencia a metales pesados, entre otros.

 Muchos plsmidos codifican resistencia a antibiticos,

pero generalmente esta informacin se encuentra en elementos transponibles o transposones.

Los plsmidos se replican en forma autnoma (razn

por la cual se denominan replicones), independientemente del cromosoma y no se integran al mismo.

 Algunos plsmidos grandes, como por ejemplo:

el factor F de fertilidad en E. coli, (20-120 kb) son

episomas, lo que indica que pueden integrarse en el cromosoma de la bacteria.

Bacterifagos
Los bacterifagos son virus bacterianos.
Pueden poseer DNA, simple o doble, o RNA

simple, rodeados por una capa proteica.

El genoma de los bacterifagos es un replicn

nico pues contienen la informacin gentica necesaria para su propia replicacin.

 Los bacterifagos infectan clulas y se replican hasta

un nmero elevado que ocasiona la lisis de la bacteria (infeccin ltica) o se integran en el genoma del hospedador (profagos) sin producir la muerte bacteriana (bacteria lisognica).

Los Transposones
Los transposones (Tn) son elementos genticos

mviles que pueden transferir el DNA de una posicin a otra dentro de un mismo genoma o entre distintas molculas de DNA
(pueden saltar de un plsmido a otro, de un

plsmido al cromosoma bacteriano y viceversa). Al conducirse de esta manera, los transposones crean mutaciones por insercin.

Mecanismos de transferencia gentica

Conjugacin
Mediada por PLSMIDOS La conjugacin bacteriana es un proceso de

transferencia de genes que implica: - apareamiento celular (contacto mediado por el pili sexual) - transferencia unidireccional del DNA - recombinacin entre el fragmento donador y el DNA receptor - la expresin de un nuevo fenotipo en la clula receptora.

Transformacin
Experimento de Griffith - al inocular neumococos capsulados vivos, los ratones

se moran, - al inocular mutantes no capsulados vivos, los ratones no moran. Posteriormente, al inocular clulas vivas de neumococos no capsulados mezclado con neumococos capsulados, pero muertos por calor, muchos ratones moran. De estos ratones muertos, recuperaba neumococos capsulados.

Transduccin
Mediada por FAGOS

Cmo acta el fago?

 Es la recombinacin gentica mediada por fagos.

Cuando un fago infecta una bacteria, capta fragmentos del genoma de la clula hospedadora y los almacena en el interior de las partculas vricas.
Al lisar e infectar otra clula hospedadora, el fago

transductor puede transferir no slo sus propios genes sino tambin genes de la clula hospedadora de la cual procede.

 Los fagos virulentos, siempre inician un ciclo ltico, con

produccin de nuevas partculas virales que se liberan por lisis celular.

 Los fagos atenuados pueden expresar o no el DNA en la

clula hospedadora. Si lo expresan, existe una respuesta ltica. Si no lo expresa, por un represor fago especfico, queda en estado de profago, est o no integrado en el genoma bacteriano. La clula bacteriana es lisognica y adquiere inmunidad contra fagos homlogos por la presencia del represor.

 Es importante destacar que en un cultivo bacteriano

lisognico, una pequea cantidad de clulas (0,1% a 0,0001%) producen virus y se lisan.

Fago temperado o atenuado

Mutacin
Las mutaciones son cambios heredables de la

secuencia de bases del DNA, pueden ser sustituciones, supresiones, inserciones y reordenamiento de bases. Las mutaciones pueden ser espontneas o inducidas.

Tipo de mutaciones
delecin e insercin
Mutaciones espontneas Mutaciones inducidas Mecanismo de reparacin del DNA

Tcnicas de Biologa Molecular

Las herramientas bsicas con que cuenta la ingeniera

gentica son: - los vectores de clonacin, que suministran las secuencias de DNA en la clula receptora, permitiendo amplificar la secuencia deseada. Las enzimas de restriccin, que pueden cortar el DNA en determinadas secuencias, dejando extremos cohesivos o romos. - La DNA-ligasa une los fragmentos de DNA, al vector de clonacin.

Enzimas de restriccin

 Vectores de clonacin: deben poseer una serie de

requisitos como: *la capacidad de replicacin, *permitir que el DNA extrao se inserte en l y *tener algn elemento marcador de seleccin
genes de resistencia a antibiticos y/o genes que

codifiquen la sntesis de enzimas, no presentes en la clula hospedadora.

 Se emplean:
plsmidos para fragmentos de hasta 20 kb; bacterifagos para fragmentos mayores de hasta

25 kb

Video
Para finalizar un video que resume lo visto