Le document décrit des techniques d'analyse biologique comme la détermination de la taille d'un fragment d'ADN et de la masse molaire d'une protéine par électrophorèse sur gel.
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Techniques d’Analyse Biologique
Chapitre I
Dr AMIROUCHE A. Licence 3 – BPC - Biochimie (2021/2022)
Détermination de la taille d'un fragment d'ADN Gel d'électrophorèse sur agarose (ci-dessous) sur lequel on voit : •les marqueurs (ou échelle, "ladder") de longueur (en paires de base) de fragments d'ADN •un fragment d'ADN inconnu La droite : log (taille) = f(distance de migration) permet de déterminer la taille en paires de base d'un fragment d'ADN inconnu (figure de droite). Détermination de la masse molaire d'une protéine On obtient différentes bandes pour chaque piste de la figure ci-contre (la flèche indique le sens de migration). La masse molaire des protéines est déterminée à l'aide de marqueurs qui sont des protéines standards de masses molaires connues (piste de droite). Exemple de marqueurs : •myosine (205 kDa) •β galactosidase (116 kDa) •phosphorylase β (97,4 kDa) •albumine (66 kDa) •ovalbumine (45 kDa) •anhydrase carbonic(29 kDa) La mobilité relative est distance de migration d'une bande -------------------------------------------------------------- le rapport : distance de migration du front de migration
•myosine (205 kDa)
•β galactosidase (116 kDa) •phosphorylase β (97,4 kDa) •albumine (66 kDa) •ovalbumine (45 kDa) •anhydrase carbonic(29 kDa) La droite : log (masse molaire) = f(mobilité relative) permet de déterminer la masse molaire d'une protéine inconnue.