Bases cellulaires et

géné/ques de la construc/on
d’une plante
 Plan du cours

Introduc)on : Place des Spermaphytes dans la série des Embryophytes; cycle de développement d’une plante à fleur.
Développement végétal versus développement animal

I ‐ Modèles et méthodes d'études en biologie du développement des plantes

Arabidopsis, Tabac, An/rrhinum, maïs, riz, mutagenèse, transgenèse

II ‐ La plante : un système intégré en interac)on avec son environnement

Contraintes de la vie fixée : adapta/ons développementales; Diversité des types biologiques ; Tropismes
Les photorécepteurs

III ‐ Les hormones végétales

Nature, métabolisme et effets mul/factoriels

IV ‐ Du zygote à la graine
Embryogenèse : mise en place de l’embryon et des réserves
Dormance et germina/on ; régula/on par les hormones et la lumière; phytochrome; germina/on hypogée, épigée

V ‐ Bases cellulaires et géné)ques de la construc)on d’une plante

Division cellulaire, élonga/on et différencia/on cellulaire
1‐ Méristèmes apicaux: de la cellule apicale des Bryophytes aux méristèmes pluricellulaires des Spermaphytes;
Organisa/on fonc/onnelle des méristèmes
Phyllotaxie et développement foliaire
2‐ Méristèmes secondaires et croissance radiale
3‐ Ramifica/on des systèmes aériens et racinaires

VI ‐ Reproduc)on sexuée et morphogenèse florale

Mise en place du méristème reproducteur : facteurs inducteurs, aspects structuraux et géné/ques
Morphogenèse florale chez les Angiospermes
De la fleur au fruit : Pollinisa/on, auto‐incompa/bilité et féconda/on
Evolu/on de la reproduc/on sexuée chez les Embryophytes

Conclusions
 Plan du cours

Bases cellulaires et géné/ques de la construc/on d’une plante

Division cellulaire, élonga/on et différencia/on cellulaire

1‐ Méristèmes apicaux: de la cellule apicale des Bryophytes aux méristèmes pluricellulaires des
Spermaphytes;
Organisa/on fonc/onnelle des méristèmes
Phyllotaxie et développement foliaire

2‐ Méristèmes secondaires et croissance radiale

3‐ Ramifica/on des systèmes aériens et racinaires

Division cellulaire (mérèse)
Elonga)on cellulaire (auxèse)
Différencia)on cellulaire
La division cellulaire

télophase
G0
anaphase quiescence
dédifférenciation
métaphase

M G1

prophase

différenciation
G2 S

Spécificités végétales :
‐ pas de centrioles
‐ présence de la paroi
La division cellulaire

Les microtubules du cytosqueleWe sont responsables de l’orienta/on des plans de division

La division cellulaire

Forma/on de la nouvelle paroi .

La division cellulaire

I ‐ Les protéines kinase dépendantes des cyclines: CDK

Famille de sérine‐thréonine kinase de 34 kDa.
Inac/ve si non associée à une cycline.
Le complexe cdk‐cycline est ac/f si le résidu Thréonine160 est phosphorylé,
inac/f si le résidu Tyrosine15 ou Thréonine14 est phosphorylé.
5 groupes de CDK:
activité
protéine CDKA
ARNm

activité
protéine CDKB
ARNm

ARNm CDKC
ARNm CDKD
ARNm CDKE

G1 S G2 M
La division cellulaire

II ‐ Les cyclines

Famille de protéines de 40 à 50 kDa, mo/f de liaison aux CDKs.

2 groupes de cyclines selon leur structure et leur profil d'expression :
‐ type G1 : expression en G1‐S, mo/f LxCxE (liaison à la protéine Rb): D, H
‐ type mito/que : expression en G2‐M, con/ennent une boite de
destruc/on pour l'ubiqui/ne: A, B

cycline D
Cyclines G1
cycline H

cycline A
Cyclines mitotiques
cycline B

G1 S G2 M
La division cellulaire

brassinostéroïdes
Inactif
CycB cytokinines gibbérellines?
CYCD3
T14 P CDC2 ICK/KRP CYCD
CDK A
P CDK A
Y15 CDKD;1
T160
saccharose CYCD2/D4 ? P
Wee1 ICK/KRP P
Cdc25 CDK A P P
Myt1
G1 « start »
RB
ABA
CycB CAK CycB Sortie RB
mitose E2F DPI E2F DPI
CDC2 CDC2
KAP T14
T161 Y15 T161 CDK A/B activation des

Inactif Actif M S gènes pour la

réplication de
l ’ADN
CYCA/B
T14/Y15 CDK A/B

P Acide jasmonique
Arabidopsis : WEE1 G2
(T14/Y15 CAK) auxine
CDC25 cytokinines
12 CDKs CYC A/B
49 cyclines P CDK A/B
cytokinines T14/Y15
T160 brassinostéroïdes
L’élonga/on et la différencia/on cellulaire

L’élonga/on précède toujours la différencia/on cellulaire

L’élonga/on et la différencia/on cellulaire

Cons/tu/on de la paroi primaire :

L’élonga/on et la différencia/on cellulaire

Synthèse et dépôt des microfibrilles de cellulose dans la paroi primaire :

Les microtubules sont responsables de l’orienta/on des microfibrilles de cellulose

L’élonga/on et la différencia/on cellulaire

L’élonga/on cellulaire est due la pression de turgescence des vacuoles

H2 0

L’élonga/on cellulaire est orientée et n’est possible qu’à pH acide

L’élonga/on et la différencia/on cellulaire

L’auxine induit l’élonga/on cellulaire en acidifiant la paroi

L’acidifica/on de la paroi ac/ve les expansines

2 hypothèses :

L’auxine s/mule l’ac/vité des pompes à protons membranaires

L’auxine induit l’expression de gènes codant des pompes à protons membranaires
L’élonga/on et la différencia/on cellulaire

Un exemple d’élonga/on et différencia/on racinaire : la forma/on des poils absorbants

L’élonga/on et la différencia/on cellulaire

Un exemple d’élonga/on et différencia/on racinaire : la forma/on des poils absorbants

Les poils absorbants ne sont pas

disposés de façon aléatoire le long de la
racine mais sont disposés en files
cellulaires

Les cellules du rhizoderme qui changent d’iden/té

et se différencient en poils absorbants sont des
trichoblastes.

Les cellules du rhizoderme qui ne changent pas

d’iden/té sont des atrichoblastes.
L’élonga/on et la différencia/on cellulaire

Mise en évidence de mutants sans poils racinaires (mutant cpc)

sauvage gl2,
wer,
ttg1

Le gène GL2 ne s’exprime pas dans les mutants +g ou wer.

Les gènes TTG et WER s’expriment dans le mutant gl2.
Donc GL2 en aval de Wg et wer
L’élonga/on et la différencia/on cellulaire

L’expression du gène GL2 inhibe la différencia/on des trichoblastes

GL2::GUS

WER
L’élonga/on et la différencia/on cellulaire
L’élonga/on et la différencia/on cellulaire
L’élonga/on et la différencia/on cellulaire
 Bases cellulaires et géné/ques de la construc/on d’une plante
Division cellulaire, élonga/on et différencia/on cellulaire

1‐ Méristèmes apicaux: de la cellule apicale des Bryophytes aux méristèmes

pluricellulaires des Spermaphytes;
Organisa/on fonc/onnelle des méristèmes
Phyllotaxie et développement foliaire

2‐ Méristèmes secondaires et croissance radiale

3‐ Ramifica/on des systèmes aériens et racinaires

Les méristèmes apicaux

Origine phylogéné/que du méristème

Filaments primi/fs : croissance non localisée

Apicalisa/on de la croissance et ramifica/ons

Les méristèmes apicaux

Fucus
Les méristèmes apicaux

Origine phylogénè/que du méristème

Pas de méristèmes
pluricellulaires mais une
unique cellule apicale

La cellule apicale ne fait que

des divisions an/clines

Bryophytes Ptéridophytes
Les méristèmes apicaux

Gymnospermes Angiospermes

Les méristèmes pluricellulaires

apparaissent avec les
Gymnospermes
Caractéristiques d une cellule méristématique
Les méristèmes apicaux

Les méristèmes apicaux sont mis en place au cours de

l'embryogenèse et sont à l’origine de la mise en place con/nue de
tous les organes et /ssus de la plante.

MAC MAR
Le méristème apical racinaire (MAR)

Organisation racinaire
Le méristème apical racinaire (MAR)

Coupe d'une racine primaire de dicotylédone

Stèle

Rhizoderme
Le méristème apical racinaire (MAR)

Monocotylédone Dicotylédone
Le rôle de la coiffe

Protec/on du méristème racinaire

Les racines ont une croissance orientée (en direc/on de la gravité) : gravitropisme posi/f

4 heures après

Racine de pois (Pisum sativum)

Le rôle de la coiffe

Une racine sans coiffe ne présente plus de gravitropisme

Coiffe : columelle + zones latérales

La percep/on de la gravité se fait par un mouvement des statolithes

Le rôle de la coiffe

L’inhibition du transport de l’auxine annule la réponse à la gravité

Le rôle de la coiffe

Rôle de l’auxine dans le gravitropisme

DR5::GFP
Le rôle de la coiffe

Rôle de l’auxine dans le gravitropisme

DR5;GUS
Le rôle de la coiffe

Rôle de l’auxine dans le gravitropisme

Le changement de distribution latérale de l’auxine se fait par redistribution des

transporteurs d’efflux existants
Le rôle de la coiffe

Gravitropisme positif et négatif

Cas d’une tige Cas d’une racine

Tiges
Elongation/
témoin
+

Auxine
0 -10 -8 -6 -4 -1
10 10 10 10 g.mL
Auxine
- (AIA)

Racines

Croissance plus rapide Croissance plus rapide

du côté bas du côté haut
La sensibilité à l’auxine entraîne un gravitropisme positif ou négatif
Le méristème apical racinaire (MAR)

Organisation racinaire
Le méristème apical racinaire (MAR)

Coupe d'une racine primaire de dicotylédone

Stèle

Rhizoderme
Endoderme (imprégné de subérine Péricycle
imperméable)

Parenchyme

Xylème primaire

Phloème
primaire stèle
Le méristème apical racinaire (MAR)

Zone
d’élongation

Zone
méristématique

Méristème
racinaire

Coiffe
Le méristème apical racinaire (MAR)

L’organisa/on du méristème racinaire

Marquage à la thymidine
tri/ée ; visualise les cellules
en phase S

Centre quiescent

Beaucoup de cellules marquée entourant une zone où les cellules ne

sont pas marquées.
Méristème racinaire ; centre quiescent entouré d’ini/ales
Le méristème apical racinaire (MAR)

L’organisa/on du méristème racinaire

Centre quiescent : centre organisateur

Cellules souches : ini/ales
Le méristème apical racinaire (MAR)

Le fonc/onnement de l’ini/ale endoderme/cortex

Les assises endoderme et cortex sont mises en place par une

division an/cline de l’ini/ale suivie d’une division péricline.
Le méristème apical racinaire (MAR)

Le fonc/onnement de l’ini/ale endoderme/cortex

Les mutants scr et shr

présentent le même
défaut d’organisa/on :
une assise en moins

Mutant scr :
caractéris/ques
endoderme‐cortex

Mutant shr :
caractéris/ques cortex
‐ SHR et SCR sont nécessaires à la division péricline meWant en
place les deux files cellulaires
‐ SHR est indispensable à l’acquisi/on de l’iden/té endoderme
Le méristème apical racinaire (MAR)

Expression de SHR et SCR chez le sauvage :

Localisa/on des transcrits Localisa/on de la protéine

SCR::GFP SHR::GFP SHR::SHR:GFP

La protéine SHR est mobile:

elle est présente dans
l’endoderme et le CQ
Expression de SHR et SCR chez les mutants :
Mutant shr : pas d’expression de SCR
Mutant scr : expression de SHR
Le méristème apical racinaire (MAR)
Polar localiza)on of PIN proteins in the Arabidopsis root )p

Feraru, E., et al. Plant Physiol. 2008;147:1553-1559

Copyright ©2008 American Society of Plant Biologists

Le méristème apical racinaire (MAR)
Le méristème apical racinaire (MAR)

Auxines

PIN

PLT1, PLT2

SHR, SCR

Centre quiescent

Méristème apical racinaire

En résumé

Développement de la racine

‐ Par division cellulaire (rôle du méristème apical racinaire)

‐ Par acquisi/on d’iden/té de chaque file cellulaire (ini/ales)

‐ Par élonga/on et différencia/on cellulaire

‐ Régula/on hormonale et géné/que

Le méristème apical caulinaire
Structure du méristème apical caulinaire

‐ Organisa/on en assises (layers)

‐ Organisa/on en zones

CZ : central zone (zone axiale)

PZ: peripherical zones (zones latérales)
RZ : rib zone (méristème médullaire)
Structure du méristème apical caulinaire

Le fonc/onnement du méristème apical caulinaire

L1 : divisions an/clines
L2 : divisions an/clines sauf au moment de l’ini/a/on d’une feuille
L3 : divisions an/clines sauf au moment de l’ini/a/on d’une feuille
Structure du méristème apical caulinaire

Muta/ons albinos dans la L2 ou la L3

Lierre

Muta/on dans la L1 : absence de poils épidermiques

Prunus persica

Pêche Nectarine
Structure du méristème apical caulinaire

‐ Organisa/on en assises (layers)

‐ Organisa/on en zones

Zone axiale : peu de division cellulaire

Structure du méristème apical caulinaire

‐ Organisa/on en assises (layers)

‐ Organisa/on en zones
Zone axiale : peu de division cellulaire
Zones latérales : nombreuses divisions cellulaires
Structure du méristème apical caulinaire

Le méristème apical
caulinaire est une structure PZ
CZ

dynamique PZ

RZ

La taille de la zone axiale ne

varie pas Aire maximale a b
LI LI
CZ

RZ

Aire minimale c d

PZ CZ
PZ

RZ

Aire de régénération e f
Régula/on géné/que du MAC

‐ Contrôle de l’état indéterminé des cellules du méristème

Mutant shootmeristemless (stm)

WT stm

Mutant Knat

STM et KNAT s’expriment dans les cellules des zones axiales et

latérales du méristème.

Leur expression s’arrête au moment de l’ini/a/on d’une feuille.

Régula/on géné/que du MAC

‐ Contrôle de la taille de la zone axiale du méristème

Mutant wuschel (wus)

WT Le mutant wuschel possède un

méristème caulinaire qui n’est
pas renouvelé après forma/on
wus d’une feuille

WT wus

Chez un sauvage, l’expression de WUSCHEL est située

en profondeur de la zone axiale (sous la L3).
WUSCHEL code pour un facteur de transcrip/on
Régula/on géné/que du MAC

‐ Contrôle de la taille de la zone axiale du méristème

Mutant clavata (clv)

Les mutants clv présentent un

méristème caulinaire beaucoup plus
large que le sauvage (élargissement
de la zone axiale)
sauvage clavata 3

clavata 3
Régula/on géné/que du MAC

Il existe trois gènes clavata (clv1, 2 et 3 ) dont la muta/on donne un même phénotype

Expression de CLV1, CLV2 et CLV3 :

CLV3:GUS
CLV3 s’exprime dans la zone axiale (L1 + L2 + L3)

CLV1 et CLV2 s’expriment dans la zone axiale (L1 + L2 +

L3) et les zones latérales (toutes les cellules)
Régula/on géné/que du MAC

Comparaison de la localisa/on des ARNm CLV3 et de la protéine CLV3

La protéine CLV3 est une protéine

secrétée et mobile

ARNm CLV3 CLV3

Mise en évidence d’une boucle de régula/on WUSCHEL‐CLAVATA

CLV3 réprime l’expression de WUS.

Les mutants wus n’expriment pas

CLV3. WUS est indispensable à
l’expression de CLV3.
Régula/on géné/que du MAC

La boucle de régula/on WUSCHEL‐CLAVATA

CLV3 est une protéine sécrétée (facteur de

transcripPon)
CLV1 (récepteur kinase) et CLV2 (récepteur)
forment un complexe extracellulaire

L’expression de CLV3 dans les cellules de la zone axiale confère l’iden/té cellule
souche et main/ent constante la taille de la zone axiale.
Régula/on géné/que du MAC

Organisa/on comparée des méristèmes primaires

peripheral
leaf zone
primordium

stem cells

organising
centre

Arabidopsis shoot Arabidopsis root

stem cell niche stem cell niche