TP3-4-bio Cel

TP3.
ETUDEMICROSCOPIQUEDECELLULESVEGETALES
OBSERVATION D’UN ÉPIDERME D’OIGNON (ALLIUM CEPA

L.)1.INTRODUCTION
L’observation d’un fragment d’épiderme « interne » du bulbe d’oignon permet
de prendreconnaissancede l’essentielde la structuredela cellulevégétale.
Lebulbed’oignonmontre,lorsqu’ilestcoupéverticalement,unetigetrèscourte
appeléeplateau qui porte un faisceau de racines adventives et des écailles emboîtées les
unes dans lesautres.Lesplusexternessontdesséchées,lesautressontgorgéesde réserves.
Dans l’axe, lebourgeoncentralestenveloppé d’écailles minces.
Ecaillessèches
Ecailles charnuesBourgeoncentral
Tigetrèscourte(plateau)
Jeunesracines
2. MATÉRIELETRÉACTIFS
Microscope,lames,lamelles,1oignon, 1couteau,pincesfines,2verresdemontre
pourchaque paillasse,solution de rouge neutre à 1g/L (Dissoudre 0,1g de rouge neutre
dans100mldetamponphosphateàpH6,5:lapénétrationdurougeneutredanslescellulesn’estpos
siblequ’àce pH), solution d’eau iodo-iodurée ou lugol (4g d’iode,8gde KI dans 1L d’eau
distillée), cristallisoiraveceau de Javelpourlamesetlamellesusagées
3. PRÉPARATIONDESLAMES
- Onprépare simultanément2colorants dans2verres demontre:
- Rougeneutre
- Solutiond’eauiodo-iodurée
- Al’aidedepincesfines,onprélèvedepetitslambeauxd'épidermesurlaface
concaved'uneécailled'oignon.On lesplaceimmédiatement danslessolutions colorées (2 ou 3
dans chaque verredemontre).
- Sur une première lame, on dépose 1 goutte de la solution de rouge neutre et on y place 1
ou 2 lambeauOnrecouvre d'une lamelle.
- Onfaitdemêmeavec la 2èmelame etlasolution d'iode.
Posedelalamelle
Préparationterminée
4. Observations(objectifsx10,x40)
4.1. Colorationaurougeneutre(colorationvitale)
Lerougeneutrepénètredanslacellulesanslatuer:c'estuncolorantvital.
- Chercheral’objectiflaplusfaible,uneimagenettedelapréparationet
placerunecelluleau centre duchamp dumicroscope.
- Passeraufortgrossissememt(400X)
- Dessiner,
Mettreuntitreetunelégendeetdécrirevosobservations :coloration,formedescellul
es,présencedevacuoles,noyauetnucléoles,paroipecto-cellulosiqueetc.
4.2. Colorationàl’iode(colorationpost-vitale)
L'iodetuelacelluleenprovoquantlacoagulationducytoplasmeetdunoyau(c'estunfixateu
r) etenteintantenjaunecertains éléments.
Procédercommedans4.1
TP4.ETUDEMICROSCOPIQUEDECELLULESANIMALES
1. OBSERVATIONDESCELLULESDEFOIE(HÉPATOCYTES)
1.1. GÉNÉRALITÉS
Unmatérielpratiquepourl’observationmicroscopiquedescellulesanimalesestconstituép
arlefoiefrais.Onpeututiliséindifféremmentdufoiedemouton,veauoupoulet.
Laseulecontraintedontilfauttenircompteestquelefoienedoitpasavoirété
congelé.
1.2. MATÉRIELETRÉACTIFS
- Morceaudefoie,microscopes,lameetlamelles,spatule,papieressuie-
tout,glycérol,bleudeméthylène0,01%(Dissoudre100mgdebleudeméthylèneenpoudredans
100mLd'eaudistillée).
1.3. MODE OPÉRATOIRE
- Couper un petit morceau de foie et gratter avec une spatule la surface de la section
de façon à déposer sur une lame de microscope un échantillon de la taille d'une lentille au
maximum.
- Dissocier au mieux les cellules avec la spatule puis recouvrir d'une goutte de
bleu de méthylène.
- Laisser agir environ une minute.
- Déposer une goutte de glycérol et bien mélanger avec la spatule.
Le glycérol rend possible l’observation de la préparation pendant une longue durée sans
risquer l’évaporation du milieu de montage.
- Poser une lamelle sur l’échantillon et placer l’ensemble sur une feuille de papier essuie-
tout.
- Utiliser une autre feuille pour presser fermement sur la lamelle de façon à
dissocier les cellules en prenant garde de ne pas casser la lamelle.
Le papier sert à essorer le trop plein de liquide qui s’échappe lors du pressage.
- Essuyer soigneusement la surface de la lamelle et observer au microscope.
- Rechercher les régions de la préparation où les cellules sont
dissociées et suffisamment colorées pour faciliter leur observation.
1.4. RÉSULTATS
Dessiner, mettre un titre et une légende et décrivez vos observations:
- Forme et taille des hépatocytes, forme et nombre de noyaux par cellule, présence
de nucléole, présence de granulations etc.
2. OBSERVATIONDESCELLULESDEL’ÉPITHÉLIUMBUCCAL
2.1. MATÉRIEL
Microscope, lames, lamelles, hématoxyline-éosine ou bleu de méthylène, pissette avec eau
ordinaire, compte gouttes, cuve à coloration, cristallisoir avec eau de Javel pour lames et
lamelles usagées, bec Bunsen.
2.2. PRÉLÈVEMENT ET COLORATION

- Se rincer d’abord, la bouche a l’eau
- Frotter avec un doigt propre, la paroi interne de la joue.
- Déposer le produit recueilli sur une lame et la placer sur le support
de la cuve à coloration.
- Recouvrir sans attendre avec quelques gouttes d'hématoxyline-éosine ou de bleu de
méthylène
- Rincer à l'eau après 5 minutes.
- Avec un papier absorbant, essuyer le dessous et le pourtour de la lame.
-Recouvrirlapréparationd'unelamelleetplacerlalamesurlaplatine microscope.
2.3. OBSERVATIONS
Dessiner, mettre un titre et une légende et décrivez vos observations:
Fort grossissement : coloration de différents compartiments cellulaires,
présence de granulations, aspect et taille des cellules, aspect de la membrane
cellulaire, etc.
Remarques
- Si la préparation est bonne, on peut observer un ou deux grains brillants dans
Le noyau. Ils ‘agit des nucléoles (ensemble de fibrilles et granules, producteur
de ribosomes).
-En réalité, ces cellules constituent un tissu( elles sont jointives). On
peut les observer isolées, car au frottement, elles ont été détachées
de ce tissu.
Enfin, dresser un tableaur écapitulatif des caractères distinctifs morphologiques et

structuraux des cellules animales et végétales

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OBSERVATION D’UN ÉPIDERME D’OIGNON (ALLIUM CEPA

2.2. PRÉLÈVEMENT ET COLORATION

Enfin, dresser un tableaur écapitulatif des caractères distinctifs morphologiques et

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