Unduh sebagai PPTX, PDF, TXT atau baca online dari Scribd
Unduh sebagai pptx, pdf, atau txt
Anda di halaman 1/ 43
Marcelina W.A.
R (108114163) Elizabeth Sita P. (106114165) Naomita Joice Y. (106114168) Devina Permatasari (106114170) Kezia C.M.C (106114172)
Improvement of effect of water-in-oil microemulsion as an oral delivery system for Fexofenadine: in vitro and in vivo studies Fexofenadine hydrochloride Nonsedating antihistamin to treat allergic rhinitis Rapid, long acting, H 1 receptor antagonist Rute pemberian : oral BCS (Class III) high solubility and low permeability The oral bioavailability of fexofenadine in humans is not established. However, in other animals, it is known to be as low as 4.2% (in rats)7 and 2.6% (in horses)
Microemulsion dipersi dari fase air & minyak yang terstabilkan oleh surfaktan meningkatkan bioavailabilitas pada saluran gastrointestinal
KEUNTUNGAN Kapasitas solubilisasi obat yang besar Melindungi dari hidrolisis enzimatik Laju difusi dan abropsi yang tinggi jika dibandingkan dengan sediaan tanpa surfaktan Jernih Mudah dalam pembuatannya
Discussion 1. Optimation of w/o microemulsion system pseudoternary phase diagram 2. Characterization of w/o microemulsion system droplet size viscosity solubility conductivity polydispersity 3. Content of FEX 4. Stability test 5. In vitro (permeability) studies Caco-2 cell monolayer 6. Pharmacokinetic parameters investigated in rabbits and compared to Fexofen
syrup
Material and Method Material : Fexofenadine Diphenylhydramine Lutrol F 68 Span 80, oleic acid, and isopropyl alcohol Cell culture reagents Sodium dodecyl sulfate Preparation of Microemulsion 1. Solubility studies mengetahui kelarutan fexofenadine dalam minyak dan surfaktan
fexofenadine (berlebih) + 1 mL pembawa 1 mL, dikocok (100 rpm), suhu 25C, 24 jam.
sampel disentrifugasi (10000 rpm) selama 10 menit untuk menghilangkan fexofenadine berlebih
konsentrasi fexofenadine dalam supernatant, dilarutkan dengan isopropil alkohol lalu dianalisis dengan HPLC.
Method Isopropil Alkohol sebagai cosurfaktan karena memiliki kelarutan yang paling tinggi untuk FEX
Asam oleat sebagai fase minyak karena memiliki kelarutan FEX yang baik
Span 80 dan Lutrol F 68 sebagai surfaktan karena dapat meningkatkan pelarutan FEX Result 2. Construction of pseudoternary phase diagram Surfaktan : campuran Span 80 dan Lutrol F 68 pada b/b rasio 9.5:0.5 dengan HLB 5,53 co-surfaktan : isopropil alkohol Pengaruh surfaktan dan co-surfaktan pada diagram fase pseudoternary secara sistematis diamati pada suhu kamar Method Lutrol F 68 dilelehkan pada suhu 50C60C dan dicampur dengan span 80 untuk membuat campuran surfaktan.
Kemudian, fase minyak dan campuran surfaktan dicampur. The boundaries of the microemulsion domains were determined for different values of the S/coS (w/w) ratios. The S/coS weight ratios were 1:1, 2:1, 3:1, 4:1, and 5:1.
Distilled water ditambahkan setetes demi setetes to each clear oil and surfactant mixture dengan pengadukan kuat untuk mencapai kesetimbangan.
Kemudian dilakukan penambahan fase air, the mixture was examined visually fortransparency. Based on the results of the pseudoternary phase diagrams, one microemulsion was selected for further experiments (Table 1).
Thereafter, the fexofenadine-loaded microemulsion was prepared by adding 6 mg of fexofenadineper 1 mL of microemulsion with vortexing. Hasil optimum S/CoS 1: 1 surfaktan (Span 80 : Luterol F 68 9,5: 0,5 ) Result Characterization of Microemulsio n 1. Determinasi ukuran droplet Ukuran droplet dari mikroemulsi diukur menggunakan zeta sizer (3000 HSA, Malvern Instruments, Worcestershire, UK).
2. Viskositas Viskositas dari mikroemulsi dapat diketahui dengan menggunakan Brookfield digital viscometer-III rheometer V 3.3 HB (Middleboro,MA) dengan kecepatan 200 rpm
Method 3. Pengukuran Konduktivitas Konduktivitas mikroemulsi dapat diukur/ketahui dengan mengukur fase air dengan menggunakan konduktometer WPA CM 35 (Cambridge, UK)
4. Pengukuran pH Diukur menggunakan pH meter (Jenway 3040 Ion Analyze, Combined Glass Electrode,Mettler- Toledo, Greifensee, Switzerland)
Method Konduktivita s elektrik viskosita s Ukuran droplet polidispersitas Zeta potensial A Similiar values Ukuran > B Tanpa atau dengan FEX tidak menpengaruhi nilai index transparansi dan polidispersitas mikroemulsi sistem Penambahan FEX menaikkan zeta potensial dari sitem mikroemulsi (kenaikan tidak signifikan secar statistik [P<0,05]) B Menurunka n ukran droplet (Ukuran < A ) Result HPLC Analysis of Fexofenadine
digunakan untuk analisis kadar dan studi permeabilitas FEX Samples yang telah dilarutkan isopropyl alcohol, kemudian di-inject ke dalam HPLC system. Fase Gerak : acetonitrile : potassium dihydrogen phosphate buffer solutions (60:40, v/v) Fase Diam : C18 Flow rate : 1.0 mL/min. eksitasi & emisi :220 nm dan 290 nm Content of Fexofenadine Stability Test of Fexofenadine Untuk mengevaluasi stabilitas dari formula fexofenadine, microemulsi dimasukkan dalam botol kaca yang disegel, kemudian disimpan pada suhu 25C - 40C selama 6 bulan. The clarity, concentration of fexofenadine, and droplet size were thereafter investigated at predetermined intervals Method Penyimpanan pada suhu 25 o C dan 40 o C selama 6 bulan jenuh dan transparan, tidak ada pemisahan fase Result Permeability Studies in Caco-2 Cell Monolayer 1. Kultur sel
The colonic adenocarcinoma cell line, Caco-2, diperoleh dari American Type Culture Collection, dan dikulturkan dalam Dulbeccos Modified Eagle Medium.
Monolayers disiapkan dengan seeding 4 105 cells/well on a 6- well Transwell insert filter.
Kultur sel dijaga pada suhu 37C under 90% humidity and 5% CO2. Monolayers digunakan1922 hari setelah seeding.
Integritas dari setiap monolayer diperiksa dengan mengukur transepithelial electrical resistance (TEER) menggunakan epithelial Volt-Ohm meter (EVOM, World Precision Instrument, Sarasota, FL) sebelum dan sesudah percobaan. Method 2. Permeabilitas fexofenadine from microemulsion versus syrup Dalam studi permeabilitas in vitro dikembangkan di Caco-2 cell monolayers grown in Transwell inserts dengan collagen- coated polycarbonate membranes memiliki ukuran pori 0,4 m dan luas permukaan 4,7 cm 2 .
Sel tersebut dijaga pada suhu 37C.
The medium was replaced every second day for 3 weeks.
Untuk percobaan menggunakan Caco-2 cell monolayers, w/o microemulsion (fexofenadine 6 mg/mL) dan commercial syrup (6 mg/mL) formulations were diluted up to 95% (v/v) with Hanks Buffered Salt Solution (HBSS). Method Studi permeabilitas were performed in both directions, from apical to basolateral and basolateral to apical.
Setelah pencucian Caco-2 cell monolayer twice with prewarmed HBSS medium (pH 7.4), microemulsi fexofenadine dilarutkan dengan HBSS (95% v/v).
The transport experiments were done by adding the fexofenadine microemulsion diluted with HBSS to either the apical 2.2 mL) or basolateral side (3.2 mL), while the receiving chamber contained the corresponding volume of transport medium.
Setelah digojog dengan kecepatan 50 rpm selama 2 jam dengan suhu 37C diatas water bath, sampel diperoleh dari kedua sisi monolayer Caco-2 cell dan segera disimpan di bawah -20 C. Method Apparent permeability values (Papp) untukkeduasisidapatdihitungberdasarkanpersama anberikut:
Papp =
1 60
Keterangan : Papp = apparent permeability (cm/sec), dQ/dt = the permeation rate, A = diffusion area of monolayers(cm2) Co = initial concentration of drug in the donor compartment
Result Permeabitas fexofenadine di Caco-2 cell monolayer Result Perbedaan nilai permeability dari FEX dalam mikroemulsi dan sirup Result efek fexofenadine pada TEER across Caco-2 cell monolayer Result Nilai permeabilitas P eff : nilai permeabilitas eksperimental P dif : komponen difusi pasif Vm dan Km : parameter Michelis-Menten A : faktor koreksi Result Snedecors F test SSR1 : jumlah dari kuadrat residual dari model sederhana SSR2 : jumlah dari residual kuadrat model yang lebih kompleks df : derajat kebebasan fit (jumlah titik data dikurangi jumlah parameter yang diestimasi). Result .......... Result Pharmacokinetic studies in rabbits 1. Desain studi Kelinci Studi farmakokinetik in vivo Berat 1,82,5 kg Puasa Dipelihara dalam light-controlled room pada suhu 25C 0.5C
Method Sampel darah (2 mL) diambil dari vena marginalis telinga kelinci
Dengan interval waktu 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, and 8 jam
Ditambahkan 75 L heparin pada tabung efendrof
Darah di sentrifugasi dengan kecepatan 10,000 rpm selama 10 menit untuk mendapatkan plasma
Diambil 500 L plasma disimpan pada suhu 20C
Method 2. Plasma analysis Konsentasi fexofenadine dalam plasma dianalisis menggunakan HPLC
Plasma (500 L) ditambahkan dengan 2 g standar internal (DFN) dan 1500 mL methanol
Kemudian di vorteks selama 10 menit dan sentrifugasi dengan kecepatan 4000 rpm selama 5 menit 5C 0.5C
Kemudian Supernatan di evaporasi to dryness under nitrogen pada suhu 40C
The residue was reconstituted dengan 200 L fase gerak dan di- injeksikan ke dalam HPLC system
Kurba kalibrasi was constructed pada range 0.530 g/mL
Analisis non-compartmental digunakanuntukmenghitung the peak plasma concentration, time taken to reach peak concentration, dan area under the curve (AUC)
The relative bioavailability of the oral drug delivery system was calculated as follows: Relative bioavailability = AUC microemulsion AUC syrup 100 Method Analisis Statistik A two-tailed unpaired Students t-test was performed, dengan nilai P < 0.05 dianggap signifikan Method Studi farmakokinetik FEX pada kelinci Result Parameter farmakokinetik fexofenadine Result PEMBAHASAN Bioavibilitas FEX pada manusia 30% untuk meningkatkan bioavibilitas digunakan enhancer dapat merusak jaringan intestinal diformulasikan menjadi mikroemulsi w/o ( asam oleat, lutrol F 68, span 80, dan isopropil alkohol) meningkatkan bioavibilitas dari obat yang permeabilitasnya rendah FEX yang diformulasikan menjadi mikroemulsi w/o dengan pemberian oral secara signifikan meningkatkan absorbsi dan bioavibilitas dibandingkan dengan formulasi sirup merk fexoven pada kelinci CONCLUSION Sediaan mikroemulsi efektif meningkatkan absorpsi FEX melalui rute oral. Sediaan mikroemulsi FEX memiliki potensi yang besar untuk aplikasi klinik.
