Sistema para Recuento de Enterobacterias 3MT™ Petrifilm

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Sistema para Recuento

de Enterobacterias
3MT Petrifilm

2013, LANAR

Propsitos
Realizar el anlisis de Recuento en Enterobacterias
en alimentos y bebidas.
Establecer reactivos, materiales y equipos para
realizar este anlisis
Verificar el correcto desempeo de la metodologa.

Alcance
Este procedimiento aplica para el anlisis de
Enterobacterias en alimentos y bebidas realizados
en la seccin de Microbiologa de LANAR.

Definiciones
Enterobacterias: son bacilos gramnegativos, son
las bacterias de mayor tamao que colonizan al
hombre. De morfologa variada, aerobios
facultativos, crecen en medios simples y no forman
esporas. La mayora son mviles, pocas son
encapsuladas, oxidasa negativos.

Sistema para recuento de


Enterobacterias 3M EB
La placa Petrifilm de 3M para recuento de
Enterobacterias (EB) es un sistema con medio de
cultivo listo, contiene ademas Bilis Rojo Violeta
Glucosa (VRBG) modificados, un agente gelificante
en frio y un indicador tetrazoilo que facilita la
enumeracin de Enterobacterias.

Precauciones
3M no ha documentado el uso de las Placas
Petrifilm EB en otro tipo de informacin adems de
la industria de alimentos y bebidas.
Las placas Petrifilm EB no diferencia la cepas de
Enterobacterias entre s.

Equipo
Balanza de precisin
0.1 g

Vitrina
refrigeradora

Stomacher

Sistema de
filtracin de
aire

Freezer -70C
Incubadora 35 1 C
Campana de flujo
laminar
Pipeteador elctrico

pHmetro
Autoclave
Horno

Preparacin de la muestra AOAC


2003.01

11 g mx

99 ml diluyente
BT (KH2PO4)
al 0.0425g/L
o APB al 0.1

Homogenizar
a 230 rpm
por dos
minutos

Asegurar que el
pH este entre
6.5-7.5
(queso cheddar, leche, harina,
alimentos preparados

Diluciones y Preparacin de las


placas
Preparar 3 diluciones
consecutivas 1:10

En una superficie
plana, levantar la
pelcula superior

Dispensar 1 mL en
el centro de la
placa.

Libere la pelcula
superior
dejando
que caiga sobre la
dilucin.
No
la
deslice
hacia abajo.

No apilar mas de 20 placas


Incubar por 242 horas a 37
1 C

Interpretacin
Usar cuentacolonias con lupa iluminada. No contar
las burbujas presentes.
En las placas EB las Enterobacterias son color rojo
con zonas amarillas y/o colonias rojas con burbujas
de gas con o sin zonas amarillas.
No contar colonias no asociadas con gas y las que
no esten asociadas con zonas amarillas.

Enterobacteriaceae count = 13 Enterobacteriaceae count = 35

Interpretacin
El rea circular de desarrollo es de aproximadamente 20
cm. Las placas que contengan mas de 100 colonias se
calcularn contando las colonias de dos o mas cuadros
representativos y se har una media y se multiplicar
por 20.

Interpretacin
Cuando hay gran cantidad de colonias, las placas
Petrifilm EB aumentarn de color o colocaran toda la
placa de amarillo mostrandose lo siguiente:
Muchas colonias pequeas poco claras
Muchas burbujas
Todo el medio se tornar amarillo

MNPC

Reporte
Los resultados se expresarn en
UFC/g
Se reportar con la primer dilucin que se pueda contabilizar
multiplicado por su respectivo FD

May the force be with you

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