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    Método de Kjeldahl en Leche

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    Laura Cristina Morales
    El método de Kjeldahl determina el contenido proteico de los alimentos mediante la digestión con ácido sulfúrico para convertir el nitrógeno orgánico en sulfato de amonio, luego la destilación para liberar amoníaco y su titulación con ácido clorhídrico. El método implica las reacciones de digestión de las proteínas, neutralización y destilación del amoníaco formado, y la titulación del ion borato resultante para cuantificar el nitrógeno y aproximar el contenido proteico.

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    Método de Kjeldahl en Leche

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    El método de Kjeldahl determina el contenido proteico de los alimentos mediante la digestión con ácido sulfúrico para convertir el nitrógeno orgánico en sulfato de amonio, luego la destilación para liberar amoníaco y su titulación con ácido clorhídrico. El método implica las reacciones de digestión de las proteínas, neutralización y destilación del amoníaco formado, y la titulación del ion borato resultante para cuantificar el nitrógeno y aproximar el contenido proteico.

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    practica de Lab

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    El método de Kjeldahl determina el contenido proteico de los alimentos mediante la digestión con ácido sulfúrico para convertir el nitrógeno orgánico en sulfato de amonio, luego la destilación para liberar amoníaco y su titulación con ácido clorhídrico. El método implica las reacciones de digestión de las proteínas, neutralización y destilación del amoníaco formado, y la titulación del ion borato resultante para cuantificar el nitrógeno y aproximar el contenido proteico.

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    DETERMINACIN DE PROTENAS EN LA LECHE, POR EL

    MTODO DE KJELDAHL

    FUNDAMENTO TERICO: El contenido total de protenas en los alimentos est


    conformado por una mezcla compleja de protenas. Estas existen en una combinacin
    con carbohidratos o lpidos, que puede ser fsica o qumica. Actualmente todos los
    mtodos para determinar el contenido proteico total de los alimentos son de naturaleza
    emprica. Un mtodo absoluto es el aislamiento y pesado directo de la protena pero
    dicho mtodo se utiliza slo a veces en investigaciones bioqumicas debido a que es
    dificultoso y poco prctico. En 1883 el investigador dans Johann Kjeldahl desarroll el
    mtodo ms usado en la actualidad para el anlisis de protenas (mtodo Kjeldahl)
    mediante la determinacin del nitrgeno orgnico. En esta tcnica se digieren las
    protenas y otros componentes orgnicos de los alimentos en una mezcla con cido
    sulfrico en presencia de catalizadores. El nitrgeno orgnico total se convierte
    mediante esta digestin en sulfato de amonio. La mezcla digerida se neutraliza con una
    base y se destila posteriormente. El destilado se recoge en una solucin de cido brico.
    Los aniones del borato as formado se titulan con HCl (o H2SO4) estandarizado para
    determinar el nitrgeno contenido en la muestra. El resultado del anlisis es una buena
    aproximacin del contenido de protena cruda del alimento ya que el nitrgeno tambin
    proviene de componentes no proteicos.

    REACCIONES LLEVADAS A CABO EN EL MTODO DE KJELDAHL


    DIGESTIN
    catalizadores
    1) n - C -NH2 + mH2SO4 CO2 + (NH4)2 SO4 + SO2
    protena

    calor

    NEUTRALIZACIN Y DESTILACIN
    (2) (NH2)SO4 + 2 NaOH 2NH3 + Na2SO4+ 2H2O
    (3) NH3 + H3BO3 (cido brico)

    NH4 + H2BO3- (in borato)

    TITULACIN
    El anin borato (proporcional a la cantidad de nitrgeno) es titulado con HCl
    estandarizado.
    REACTIVOS

    k2SO4 Solido.
    CuSO4 5%. (Pesar 5g de CuSO4 en 100mL de agua en un Baln).
    H2SO4 concentrado.
    NaOH 30% (pesar 30g de NaOH en 100mL de Agua en un Baln).
    HBr al 4% (Pesar 4g de HBr en 100mL de agua en un Baln).
    Indicador Shiro-Tashiro (Proporcin 2:1)
    HCl 0.1N estandarizado.

    ESTANDARIZACION DE HCL
    Pesar 0.2g de Na2CO3 colocar en una fiola, aadir III a V gotas de
    Heliantina. Titular hasta cambio de Color de indicador. Ajustar
    Concentracin del cido Con el Factor de Correccin.

    PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
    1) Se pesan 4g de k2SO4, Agregarlo al tubo digestor. Esto permite elevar el
    punto de fusin del sulfrico y favorece la mineralizacin de la leche.
    2) Se le adiciona 2ml de sulfato de cobre al 5%, agregar al tubo digestor.
    Que acta como catalizador en la reaccin.
    3) Agitar la leche para q este homogenizada. Se mide 2mL en tubo de
    ensayo, luego colocar en la balanza, tarar, agregar a tubo digestor y pesar el
    tubo de ensayo nuevamente sin leche. La diferencia es el peso en gramo de
    la leche.
    4) agregar al tubo digestor 10mL de H2SO4 conc. y agitar. La coloracin se
    tornara marrn.

    5) Colocar los tubos en el digestor y elevar la temperatura poco a poco


    hasta 400c. La muestra ir perdiendo su color poco a poco.
    6) Cuando este transparente la disolucin se deja enfra y se le aade
    100mL de agua destilada poco a poco.
    7) En la Fiola del Kjeldahl se aade 30mL de cido Brico al 4%.
    8) A la fiola agregar III a V gotas de Indicador Shiro-Tashiro, se colocara
    rojo violceo.
    9) Se coloca la Fiola y el contenido del tubo digestor en el equipo de
    destilacin del Kjeldahl.
    10) Luego se le adiciona 100mL de NaOH al 30% a la solucin del tubo
    digestor, lo que libera amoniaco y una vez destilado reacciona con el cido
    brico formando iones borato, lo cual es bsico y cambia el color del
    indicador a verde.
    11) Luego se valora el borato amonio con con HCL 0.1N hasta q tome el
    punto violceo. En una bureta de 50mL.
    12) Calcular el porcentaje de protenas.

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