Reconocimiento de Carbohidratos

Objetivos:

1. Identificación de carbohidratos
2. Hidrólisis del enlace de un disacárido

Materiales:

- Muestras de carbohidratos: glucosa, maltosa, lactosa, sacarosa, almidón.

- Tubos de ensayo, gradilla, vaso para calentar, mechero.
- Reactivo de Fehling A y Fehling B.
- Lugol.
- HCl diluido y bicarbonato.

Reacciones que van a realizarse:

1. Reacción de Fehling:

- Tomar la muestra que se quiera analizar (normalmente una cantidad de 3ml).

- Añadir 1ml de Fehling A y 1ml de Fehling B. El líquido del tubo de ensayo adquirirá un
fuerte color azul.

- Calentar el tubo al baño María o directamente en un mechero de Laboratorio.

- La reacción será positiva si la muestra se vuelve de color rojo-ladrillo.

- La reacción será negativa si la muestra queda azul, o cambia a un tono azul-verdoso.

Fundamento: Se basa en el carácter reductor de los monosacáridos y de la mayoría de

los disacáridos (excepto la sacarosa). Si el carbohidrato que se investiga es reductor, se
oxidará dando lugar a la reducción del sulfato de cobre (II), de color azul, a óxido de
cobre (I), de color rojo-anaranjado.

2. Reacción del Lugol: Este método se usa para identificar polisacáridos. El almidón en
contacto con unas gotas de Reactivo de Lugol (disolución de yodo y yoduro potásico)
toma un color azul-violeta característico.

- Poner en un tubo de ensayo unos 3ml del carbohidrato a investigar.

- Añadir unas gotas de lugol.

- Si la disolución del tubo de ensayo se torna de color azul-violeta, la reacción es positiva.

Fundamento: La coloración producida por el Lugol se debe a que el yodo se introduce

entre las espiras de la molécula de almidón. No es por tanto, una verdadera reacción
química, sino que se forma un compuesto de inclusión que modifica las propiedades
físicas de esta molécula, apareciendo la coloración azul violeta.

Investigación con azucares reductores:

- Poner las muestras de carbohidratos en los tubos de ensayo. Pueden prepararse

soluciones al 1% aproximadamente.

- Realizar la Prueba de Fehling como se indica al principio de página.

- Después de calentar observar los resultados.

- Estos resultados nos indican que los azúcares: glucosa, maltosa y lactosa
tienen carácter reductor.
Investigación de azucares no reductores:

Como se veía en la experiencia 1 la sacarosa daba la reacción de Fehling negativa, por

no presentar grupos hemiacetálicos libres. Ahora bien, en presencia del ácido clorhídrico
(HCl) y en caliente, la sacarosa se hidroliza descomponiéndose en los dos
monosacáridos que la forman (glucosa y fructosa).

Técnica: Tomar una muestra de sacarosa y añadir unas 10 gotas de ácido clorhídrico al
10%. Calentar a la llama del mechero durante un par de minutos. Dejar enfriar y realizar
la Prueba de Fehling. Observa el resultado. La reacción positiva nos dice que hemos
conseguido romper el enlace O-glucosídico de la sacarosa. (Se recomienda antes de
aplicar la reacción de Fehling, neutralizar con bicarbonato, Fehling sale mejor en un
medio que no sea ácido).
Investigación de Polisacáridos (almidón):

Técnica:

- Colocar en una gradilla muestras de distintos carbohidratos.

- Añadir 5 gotas de Lugol en cada uno de los tubos de ensayo.

- Observar los resultados.

- Con este método puede identificarse el almidón.

http://blade1.uniquindio.edu.co/uniquindio/ntic/trabajos/10/davidyoscar/paginas/reccarb.htm

CÁTEDRA DE BIOQUÍMICA I

INTEGRANTES:
● Coralía Aguiar T. (2580)

● Fernando Carrillo (2571)

● Sandra Díaz (2606)

● Jhoana Parreño (2586)

● Luis Vallejo (2521)

NIVEL: Cuarto “B”

Fecha de Entrega: Jueves 8 de Mayo del 2014.

Tema: “Informe de Azúcares Reductores”

*TÍTULO: AZÚCARES REDUCTORES (Reacción de Fehling) - HIDRÓLISIS DE

DISACÁRIDOS (sacarosa).
*Soluciones de muestras acuosas utilizadas: glucosa, fructosa, maltosa, lactosa,
sacarosa.

1.- TÍTULO DE LA EXPERIENCIA : REACCIÓN DE FEHLING

*OBJETIVO GENERAL:

Determinar si la glucosa, fructosa, maltosa, lactosa y sacarosa son azúcares

reductores o no mediante la reacción de Fehling.

*OBJETIVOS ESPECÍFICOS:

- Identificar el precipitado que se forma cuando la reacción es positiva.

- Conocer lo que sucede cuando la reacción es negativa.
- Diferenciar un azúcar reductor de uno no reductor.

*MARCO TEÓRICO:

Es una solución que descubrió el alemán Hermann Von Fehling y se caracteriza

fundamentalmente por su utilización como reactivo para la determinación de
azúcares reductores es decir demostrar la presencia de glucosa o sus derivados
como la sacarosa o la fructosa, también se lo conoce como licor de Fehling.

Está formado por dos soluciones acuosas que son: sulfato de cobre cristalizado y
sal seignette o tartrato mixto de potasio y sodio; es importante tener en cuenta que
ambas se guardan separadas hasta el momento en el que vayan a ser utilizadas
para de esa manera evitar la precipitación del hidróxido de cobre.
Su acción se fundamenta en el poder reductor del grupo carbonilo de los aldehídos
el cual se oxida a ácido y se reduce la sal de cobre en medio alcalino a óxido de
cobre, formando un precipitado de color rojo.

El reactivo de Fehling se fundamenta principalmente, en su reacción, la oxidación

de cobre, el poder reductor de los azúcares, sea este en monosacáridos,
polisacáridos, aldehídos, y en ciertas cetonas.
Reactivo de Fehling Precipitado de color rojo (Azúcar reductor)

*PROCEDIMIENTO:

El procedimiento se encuentra en el siguiente link:

CLICK PARA OBSERVAR:

Vídeo de YouTube

*RESULTADO PRÁCTICO:

 Los resultado de la prueba de Fehling fueron:

 Glucosa = positivo Fructosa =
positivo

Lactosa = positivo Maltosa = positivo

 En estas cuatro imágenes podemos ver los resultados de las soluciones de

azúcares reductores que son: (Fructosa, Lactosa, Glucosa y Maltosa), que
nos indica una coloración rojo ladrillo a diferente nivel de coloración ya que
esto se debe a la concentración de azúcar en cada solución, estableciendo
que se produjo la reducción y que la prueba fue positivo.
  En esta imagen que la solución de azúcar reductor es la sacarosa el resultado
nos indica una coloración azul determinando que esta solución es un azúcar
no reductor debido a que la prueba salio negativa y que no se produjo la
reducción.

Sacarosa = Negativa Reacciones en

los Azúcares (Fehling)

 En esta imagen podemos ver los resultados de las cinco muestras de los
azúcares reductores y poder comparar la coloración de cada solución.

REACCIÓN:

*DISCUSIÓN DEL RESULTADO:

El resultado de la práctica es óptimo, conocemos que la experiencia con el reactivo

de Fehling se fundamenta en el poder reductor del grupo carbonilo en las aldosas,
pues tienen la estructura química abierta necesaria para actuar como agentes
reductores, y en algunas cetosas (generalmente positiva en fructosa), lo que se
evidencia con la formación de un precipitado rojo ladrillo (óxido cuproso).

Vemos que la coloración que toman los precipitados dependen de la cantidad de

reactivo que se use y por tanto dan un aspecto de buena o baja concentración,
según las imágenes, por lo que hablamos de una cantidad muy buena de azúcar.
Discutiendo los resultados positivos, que se dio en la glucosa, maltosa,
lactosa este reactivo, reacciona principalmente con los aldehídos porque tienen un
grupo carbonilo más expuesto, que le da el carácter reductor, y existe la presencia
del precipitado rojo ladrillo (óxido cuproso).

Interesante es discutir el resultado de la fructosa, cuya estructura es una cetosa

característica alfa-hidroxi-cetónicos, que al reaccionar con Fehling da un resultado
positivo.

Por otro lado, y refiriéndonos a la imagen de la sacarosa (que no nos dió

coloración), esto se da porque es un azúcar constituida por una molécula de glucosa
y de fructosa, tiene un enlace entre el primer carbono de la glucosa y el segundo
carbono de la fructosa, y no queda grupos reductores disponibles. Al no ser
reductor, la prueba de Fehling es negativa, y por lo que se intuye, no posee el grupo
carbonilo apto y libre, necesario como para reaccionar con el reactivo Fehling, y a
ebullición, no se observó ningún cambio.

*CONCLUSIONES:

 La prueba de Fehling nos permite identificar cual es un azúcar reductor.

 La mayoría de los monosacáridos y algunos disacáridos poseen poder

reductor.

 Un azúcar es reductor por la formación de un precipitado de color rojo ladrillo

(óxido cuproso) y la decoloración de la solución.

 Podemos concluir que las muestras de glucosa, fructosa, maltosa y galactosa

son azúcares reductores, ya que se formó un precipitado de color rojo ladrillo
(óxido cuproso).
 En cambio la sacarosa es un azúcar no reductor, debido a que no se formó
un precipitado de color rojo ladrillo.

*BIBLIOGRAFÍA

-REACCIÓN DE FEHLING
http://blog.uchceu.es/eponimos-cientificos/reactivo-de-fehling/
20140507
2.- TÍTULO DE LA EXPERIENCIA : REACCIÓN DE SELIWANOFF

*OBJETIVO GENERAL:

-Determinar la presencia de cetosas, por medio del reactivo de Seliwanoff, en

nuestras muestras de glucosa, fructosa, maltosa, lactosa, sacarosa.

*OBJETIVOS ESPECÍFICOS:

-Referenciar la coloración positiva que nos da la prueba de Seliwanoff, ante la

presencia de una cetosa.

-Conocer mediante la utilidad de esta prueba, la distinción entre una cetosa y una
aldosa, entre 2 azúcares desconocidos.

*MARCO TEÓRICO:

La prueba de Seliwanoff es una reacción para diferenciar cetosas de aldosas;

aunque ambas dan la reacción. Los azúcares son distinguidos a través de su función
como cetona o aldehído.

En esta prueba de Seliwanoff, se utiliza el ácido clorhídrico en la reacción de

deshidratación (del monosacárido) y el resorcinol (1,3-dihidroxibenceno) en la
reacción de condensación del derivado del furfural (el hidroximetilfurfural). Esta es
una prueba cualitativa; es decir el medio pasa de incoloro a rojo, para las
cetohexosas y aldohexosas.

El hidroximetilfurfural (producto de la deshidratación) se forma más rápidamente a

partir de cetohexosas y más lentamente a partir de aldohexosas. El tratamiento
prolongado de más de quince minutos de duración, provoca la isomerización de la
glucosa (aldohexosa) en fructosa (cetohexosa), por lo que también la glucosa puede
dar la prueba positiva.
https://sites.google.com/site/trabajosbioquimicos/home/informe-identificacion-de-azucares-
laboratorio-de-bioquimica

PRUEBA DE FEHLING
1. Objetivos

1.1 General

 Identificar azúcares mediante la prueba de fehling.

1.2 Específicos

 Conocer las características de la reacción efectuada .

 Comparar las características obtenidas con teorías establecidas.

2. Marco Teórico

Los carbohidratos o hidratos de carbono están formados por carbono (C), hidrógeno
(H) y oxígeno (O) con la formula general (CH2O)n. Los carbohidratos incluyen azúcares,
almidones, celulosa, y muchos otros compuestos que se encuentran en los organismos
vivientes. Los carbohidratos básicos o azúcares simples se denominan monosacáridos.
Azúcares simples pueden combinarse para formar carbohidratos más complejos. Los
carbohidratos con dos azúcares simples se llaman disacáridos. Carbohidratos que
consisten de dos a diez azúcares simples se llaman oligosacáridos, y los que tienen un
número mayor se llaman polisacáridos.

Los azúcares son hidratos de carbonos generalmente blancos y cristalinos, solubles en

agua y con un sabor dulce.
Prueba de Fehling

Esta prueba se utiliza para el reconocimiento de azúcares reductores. El poder reductor

que pueden presentar los azúcares proviene de su grupo carbonilo, que puede ser
oxidado a grupo carboxilo con agentes oxidantes suaves. Si el grupo carbonilo se
encuentra combinado no puede presentar este poder reductor.

Los azúcares reductores, en medio alcalino, son capaces de reducir el ión Cu2+ de
color azul a Cu+ de color rojo. Para ello el grupo carbonilo del azúcar se oxida a grupo
carboxilo. En medio fuertemente básico como en nuestro caso el NaOH el ión Cu2+
formaría Cu (OH)2 insoluble por eso añadimos tartrato sódico potásico que actúa como
estabilizador al formar un complejo con el Cu2+.

Reactivo de Fehling

El reactivo de fehling es una mezcla entre 2 soluciones acuosas

- Sulfato cúprico cristalizado, 35 g; agua destilada, hasta 1.000 ml.
- Sal de Seignette (tartrato mixto de potasio y sodio), 173 g; solución de hidróxido de
sodio al 40%, 3 g; agua, hasta 500 ml.
Ambas se guardan separadas hasta el momento de su uso para evitar la precipitación
del hidróxido de cobre (II).

3. Procedimiento

4. Resultados y Discusión
 AZÚCAR OBSERVACIÓN

Si nos dio el precipitado rojo ladrillo, lo cual nos indica que si

GLUCOSA es un azúcar reductor
+

Si nos dio el precipitado rojo ladrillo, lo cual nos indica que si +

FRUCTOSA
es un azúcar reductor

SACAROSA La reacción es negativa, el color se mantuvo en un tono azul. -

Si nos dio el precipitado rojo ladrillo, lo cual nos indica que si +

LACTOSA
es un azúcar reductor

5. Conclusiones

 Se identificó mediante la reacción de Fehling los diferentes azúcares, dándonos

una reacción positiva para la glucosa, fructosa y lactosa, reflejado en el cambio de color
de reacción ion mediante un precipitado de color rojo ladrillo; mientras que la sacarosa
nos dio una reacción negativa, esto debido a que no se produjo una oxidación por lo
que se mantuvo el color azul en toda la reacción.

 Se analizó e identificó las características de la reacción de Fehling, que se

producen ya que utiliza como reactivo una mezcla de dos reactivos A y B en una
proporción 1:1, reaccionando con los glúcidos reductores pasando a óxido cuproso.

 Comparamos las características obtenidas con la teoría establecida, ya que si

se obtuvo el precipitado rojo ladrillo en la glucosa, fructosa, lactosa porque estos tres
son azúcares reductores y negativo en sacarosa ya que no es un azúcar reductor.

6. Bibliografía

 Identificación de azúcares
http://acasti.webs.ull.es/docencia/practicas/5.pdf
 reacciones de los carbohidratos
http://modelode.com/modelos/ld-reacciones-de-los-carbohidratos.php
 carbohidratos
http://www.slideshare.net/Osher1/carbohidratos-enlaquimicadelosalimentos-8264504
 reacciones de carbohidratos
http://www.bioquimica.dogsleep.net/Laboratorio/Plummer/Chp06.pdf
 reconocimiento de azúcares
http://www.fsalazar.bizland.com/pdf/POLISACARIDOS.pdf
 identificación de compuestos bioquímicos
file:///C:/Users/Usuario/Downloads/Identificación Compuestos Bioquímicos.pdf
 identificación de azúcares
http://almez.pntic.mec.es/~mbam0000/paginas/LABORATORIOs/azucares.htm

http://bioquimicamarzo-julio.blogspot.com/2014/06/prueba-de-fehling.html?m=1