Listeriosis 30-08-2019

LISTERIOSIS
Dra. Cecilia Casabonne

Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas
UNR
2019
Género Listeria
Listeria sensu strictu Listeria sensu lato
• L. monocytogenes • 11 especies
• L. ivanovii
• L. innocua
• L. seeligeri
• L. welshimeri
• L. grayi
Grupo de 6 especies con Incluye 3 grupos

características fenotípicas comunes: No incluyen patógenos
capacidad para crecer a bajas Ta. y
motilidad flagelar
Incluye el patógeno Listeria
monocytogenes
Listeria sensu stricto
 Bacilos Gram positivos

 Crecen a bajas temperaturas (4ºC)
 Móviles a menos de 30ºC
 Catalasa positivos
 No reducen nitratos a nitritos
 Voges-Proskauer positivo: producción de la acetoína
por fermentación de la glucosa- vía butanediólica
Fermentan D- arabitol, α -metil D- glucósido, celobiosa,
D- fructosa, D- manosa, N- acetilglucosamina , maltosa, y
lactosa
No fermentan inositol, L- arabinosa y D - manitol
Listeria monocytogenes: características
Bacilo corto Gram positivo (0,5-2 μm)

No esporulado
Anaerobio facultativo
Catalasa y peroxidasa: positivo
Posee flagelos perítricos
Móvil entre 10-25 ºC
“Tumbling motility” (movilidad tambaleante) a 20-25ºC
https://www.youtube.com/watch?v=fjD_ruKmSfA
Listeria monocytogenes: serotipos
13 serotipos diferentes de L. monocytogenes en

base a su Ag O y Ag H:
1/2a, 1/2b, 1/2c, 3a, 3b, 3c, 4a, 4ab, 4b, 4c, 4d, 4e
y7
1/2a, 1/2b y 4b Listeriosis humana

Condiciones de crecimiento de L. monocytogenes
Temperatura de crecimiento: Ta. óptima: 37ºC, Ta. mínima:

1-3ºC y Ta. máxima: 45ºC
Tiempo de generación en leche: a 4ºC: 1,2-1,7 días / a 8ºC:
8,7-14,6 h
pH: valor mínimo: 4,4 – 4,6 / óptimo: 6-8 / máximo: 9
Halotolerante: sobrevive a conc. > 25% de NaCl, crecimiento
a conc. 10-20% de NaCl
Resistencia condiciones de estrés: calor, desecado y
congelado, acidez y frío  adaptación mediante la producción
de biofilm
Película superficial o biofilm
Adherencia a Resistencia a
superficies y agentes
crecen químicos L.
formando Colonias
y físicos, monocytogenes
colonias protegidas
pudiendo puede sobrevivir
protegidas por por biofilm
una capa sobrevivir por como foco
resultan de
formada por largos continuo de
difícil acceso
polisacáridos periodos con contaminación
para limpieza
extracelulares aportes de alimentos
denominada mínimos de
biofilm nutrientes
Hábitat de L. monocytogenes
Microorganismo ubicuo
 Ampliamente distribuido en ambientes naturales: suelo, agua fresca
y salada, aguas residuales, vegetación en descomposición, pastos y
forrejes
 En plantas de producción de alimentos: suelo, paredes, techos, aguas

estancadas, equipos de procesamiento, cintas transportadoras,
cámaras de frío y túneles de congelación, etc.
 En heces de portadores asintomáticos:

- Animales: ganado, cerdos, ovejas, patos, pavos, pollos
- Hombre: 4,8% trabajadores de mataderos, 1,2% hospitalizados,
1% pacientes con diarrea, 26% familiares de enfermos
Alimentos involucrados en ETA por Listeria
1. Carne: pollo crudo y cocido, salchichas

2. Leche y derivados lácteos. Helados. La pasteurización es el
tratamiento adecuado pero podría ocurrir contaminación posterior
3. Pescado fresco, congelado y ahumado: la presencia y
supervivencia de L. monocytogenes en pescado fresco y congelado
es poco probable, en el pescado ahumado es variable dependiendo
del método de ahumado empleado (en frío o caliente)
4. Frutas y verduras: 10-20% de vegetales listos para su consumo:
semillas germinadas (brotes), lechugas, rábanos, tomates, cebollas,
pepinos, coliflores y setas cultivadas, productos ecológicos
abonados con estiércol
LISTERIOSIS
Enfermedad infrecuente, de elevada tasa de mortalidad (20-30%)
Población de riesgo de contraer Listeriosis

Microorg. Oportunista  afecta a inmunodeprimidos (diabéticos,
alcohólicos, SIDA, trasplantados, enfermos crónicos de diversas
afecciones), mujeres embarazadas, recién nacidos y adultos mayores
Transmisión de la enfermedad
(i). Vertical: madre-hijo
(ii). Zoonótico: contacto con animales enfermos
(iii). Nosocomial: adquisición hospitalaria
(iv). Alimentaria: 99% de casos de listeriosis humana
La mayoría de infecciones ocurre por
ingesta de alimentos contaminados y posterior
acceso del microorganismo a la circulación por
penetración intestinal
ENFERMEDAD NEONATAL ENFERMEDAD DEL ADULTO

Temprana: transplacentaria,
Síntomas de resfrío y
in utero (granulomatosus
enfermedad gastrointestinal
infantiseptica)
Causa: abscesos y granulomas Bacteriemia con escalofríos
y aborto y fiebre
Tardía: al nacer o días
Inmunosuprimidos:
después: meningitis o
meningitis
meningoencefalitis con sepsis
en 2-3 semanas
Detección de Listeria monocytogenes
Normativa internacional
Nivel de L. monocytogenes tolerado en los países es variable:
En EE.UU.: 0 UFC/25 g
En algunos países de la Comunidad Europea: hasta 100 UFC/g
Normativa Argentina
El CAA exige:
- salazones cocidas (art. 286 bis) y crudas (art. 286 tris)

- pernil de cerdo (art. 293 bis)
- chacinados (art. 302)
- quesos de mediana y alta humedad (art. 605)
ausencia de Listeria monocytogenes en 25 g de muestra
ISO 11290-1:1996, Amd 2004;

Carnes
Metodología BAM-FDA:2011; USDA-FSIS:2009
de ensayo
Lácteos FIL 143:1990
Estriado en placa
Enriquecimiento
-Agar OXM (agar oxford

modificado)
-Agar HL (agar sangre de
- Caldo UVM o University caballo/oveja)
of Vermont Medium -TSA-YE (agar tripteina
(USDA) soja + extracto de
-Caldo Fraser o FB (ISO) levadura)
-TSA-SBA (agar
-B-LEB (basal enrichment tripteina soja + 5% de
listeria broth) (FDA) sangre ovina)
-Agar Listeria según
Ottaviani y Agosti (ISO)
-Agar Palcam (ISO)
-Cromogénicos: agar
ALOA, BCM (FDA)
Características de los medios de cultivo para Listeria
ATB (para inhibir la flora

Capaces de detectar 1 acompañante): acido
UFC/25 g de muestra nalidíxico, acrilflavina y
cicloheximida
Esculina: evidencia la
capacidad de hidrólisis de
este glúsido por Listeria Incubación: 37°C / 24-48 h
mediante coloración negra
en el medio
Todas las especies de Listeria
hidrolizan la esculina
El producto de la hidrólisis de la
esculina, la esculetina, reacciona con
iones férricos hasta producir un
complejo de marrón a negro
Medio Oxford modificado Medio Palcam

COMPASS Listeria Agar
Basado en la detección simultánea de 2 actividades
enzimáticas: la β-glucosidasa, común en todas las
cepas de Listeria, y de la fosfatidil-inositol
fosfolipasa C (PI-PLC), que interviene en el proceso
de virulencia de L. monocytogenes.
β-glucosidasa = colonia azul-verdosa (sustrato
cromógeno)
fosfatidilinositol PI-PLC = halo transparente.
Confirm’ L.mono Agar:

Confirmación de L.
monocytogenes
• Acidificación de la
ramnosa: coloración amarilla
• Fosfolipasa C (PI-PLC): halo
opaco
L. monocytogenes: marcadores fenotípicos mínimos
Cocobacilos o bacilos
Movilidad positiva
Gram positivos
B- hemólisis positiva Catalasa Positiva
Este microorganismo presenta como particularidad una motilidad

tipo “tumbling” a los 20 - 25ºC pero es inmóvil a los 35ºC
Prueba de CAMP
Test rápido
API System para Listeria

Identificación definitiva
Una vez identificada como Listeria

monocytogenes enviar al Centro de Referencia
para:
- serotipifación: PCR, aglutinación (Método de
Referencia)
- subtipificación molecular (PFGE)
Métodos comerciales
Brote de L. monocytogenes entre las personas que vivían en el área
de Wiston-Salem (Carolina del Norte - año 2000)
Brote de
Listeriosis (2000)
Elaboración de 13 pacientes (11

queso comercial embarazadas)
manufacturado de Resultado:
estilo mexicano -5 partos con RN
Consumo del
muertos
producto
contaminado con L. -3 muertes
monocytogenes prematuras
- 3 RN infectados
Leche cruda o
pasteurizada
adulterada con
leche cruda
Brote de intoxicación alimentaria causado por L. monocytogenes en
Andalucía. Agencia Española Seguridad Alimentaria y Nutrición
05/08/2019
- Se declaró un brote de ETA en Sevilla
- Producto alertado: Carne mechada. Marca “La Mechá”,
Empresa fabricante: MAGRUDIS, SL
- Se considera afectado todo el producto fabricado desde
el mayo/19
- El producto se ha retirado de la venta y consumo
- Se tomaron muestras para su análisis
14/08/19
El laboratorio oficial de Sevilla informó del resultado positivo a L.
monocytogenes asociado a carne mechada de marca “La Mechá”
-193 afectados
-alrededor de 550 casos sospechosos
una anciana fallecida
-108 enfermos ingresados en hospitales:
25 en centros privados y 28 embarazadas
-1 aborto relacionado
Brote de intoxicación alimentaria causado por L. monocytogenes en
Andalucía. Agencia Española Seguridad alimentaria y Nutrición
AMPLIACIÓN DE LA ALERTA ALIMENTARIA A OTROS PRODUCTOS

ELABORADOS POR LA EMPRESA DE MARCA “LA MECHÁ”.
21/08/19
- chicharrón andaluz
- lomo al jerez
- lomo al pimentón
-lomo casero al pimentón
23/08/19
•Crema de carne mechada
•Manteca colorá
•Pringá estilo casero
•Zurrapa de hígado Se desconoce el foco de la contaminación de
•Zurrapa lomo blanca los productos, pero se ha detectado Listeria
•Zurrapa lomo roja en una de las mechadoras
Medida de precaución. Las personas que tengan en su domicilio algún envase

de carne mechada de la marca “La Mechá” se abstengan de consumirlo y
que, en caso de haberlo consumido y si presentan alguna sintomatología,
acudan a un centro sanitario.

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Dra. Cecilia Casabonne

Listeria sensu strictu Listeria sensu lato

Grupo de 6 especies con Incluye 3 grupos

 Bacilos Gram positivos

Bacilo corto Gram positivo (0,5-2 μm)

13 serotipos diferentes de L. monocytogenes en

1/2a, 1/2b y 4b Listeriosis humana

Temperatura de crecimiento: Ta. óptima: 37ºC, Ta. mínima:

 En plantas de producción de alimentos: suelo, paredes, techos, aguas

 En heces de portadores asintomáticos:

1. Carne: pollo crudo y cocido, salchichas

Población de riesgo de contraer Listeriosis

ENFERMEDAD NEONATAL ENFERMEDAD DEL ADULTO

Nivel de L. monocytogenes tolerado en los países es variable:

- salazones cocidas (art. 286 bis) y crudas (art. 286 tris)

ausencia de Listeria monocytogenes en 25 g de muestra

ISO 11290-1:1996, Amd 2004;

-Agar OXM (agar oxford

ATB (para inhibir la flora

Medio Oxford modificado Medio Palcam

Confirm’ L.mono Agar:

B- hemólisis positiva Catalasa Positiva

Este microorganismo presenta como particularidad una motilidad

API System para Listeria

Una vez identificada como Listeria

Elaboración de 13 pacientes (11

AMPLIACIÓN DE LA ALERTA ALIMENTARIA A OTROS PRODUCTOS

Medida de precaución. Las personas que tengan en su domicilio algún envase

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