Ca-Color

C Arsenazo III AA
Método colorimétrico directo para la determinación de
calcio en suero, plasma y orina
SIGNIFICACION CLINICA INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
El calcio es esencial en la mayoría de las reacciones de la REACTIVOS
coagulación sanguínea y en la regulación de la La turbidez o decoloración del Reactivo A indica deterioro
excitabilidad de las fibras musculares. del mismo, mientras que absorbancias del blanco mayor a
Su concentración en suero y orina está regulada por la ac- 1,200 D.O. a 650 nm (ver LIMITACIONES DEL PROCEDI-
ción de factores tales como niveles de parathormona, MIENTO), son indicio de contaminación con calcio. En
vitami-na D y fósforo, observándose fluctuaciones am-bos casos, desechar.
fisiológicas debi-das a edad, sexo, embarazo, actividad
física, cambios estacionales (por acción de la luz solar). MUESTRA
La hipercalcemia está relacionada con distintas Suero, plasma heparinizado u
patologías: hi-perparatiroidismo, neoplasias óseas, orina a) Recolección:
intoxicaciones con vita-mina D. - Suero o plasma: obtener de la manera usual.
La hipocalcemia se asocia con desórdenes tales como hipo- - Orina: recolectar orina de 24 horas sobre 20 ml de ácido
paratiroidismo, deficiencia de vitamina D, malabsorción. clorhídrico al 50%. Llevar a 2 litros con agua y
homogenei-zar.
FUNDAMENTOS DEL METODO b) Aditivos: en caso de utilizar plasma, se debe usar
El calcio reacciona con arsenazo III dando un complejo de hepari-na como anticoagulante. Si la muestra a emplear
color azul que se mide fotocolorimétricamente a 650 nm. es orina, se debe acidificar con ácido clorhídrico al 50%
durante su reco-lección.
REACTIVOS PROVISTOS c) Sustancias interferentes conocidas: los
A. Reactivo A: solución de arsenazo III 100 mg/l y 8-hidroxi- anticoagulan-tes distintos de la heparina, complejan al
quinolina sulfonato 1,4 g/l en buffer Tris 100 mM, pH 8,5. calcio produciendo resultados erróneos. No interfieren:
S. Standard*: solución de calcio 10 mg/dl. bilirrubina hasta 200 mg/l, hemoglobina hasta 350 mg/dl,
magnesio hasta 10 mg/dl, ni triglicéridos hasta 500 mg/dl.
REACTIVOS NO PROVISTOS Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de
- Agua destilada o desionizada. las drogas en el presente método.
- Calibrador A plus de Wiener lab. cuando se emplea la d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
téc-nica automática. Puede también emplearse en muestra debe ser preferentemente fresca. Puede conservar-
calibración de técnicas manuales. se una semana en refrigerador (2-10 oC) o más de 5 meses en
el congelador, sin agregado de conservadores.
INSTRUCCIONES PARA SU USO
Reactivos Provistos: listos para usar. MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
Standard: cada vez que se use, transferir una cantidad - Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
en exceso a un tubo limpio y pipetear de allí el volumen - Micropipetas y pipetas capaces de medir los volúmenes
necesa-rio, descartando el sobrenadante. indicados.
- Tubos o cubetas espectrofotométricas.
PRECAUCIONES - Cronómetro.
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
Utilizar los reactivos guardando las precauciones CONDICIONES DE REACCION
habituales de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. - Longitud de onda: 650 nm en espectrofotómetro o 620-
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de 650 nm en fotocolorímetro.
acuerdo a la normativa local vigente. - Temperatura de reacción: temperatura ambiente (15-25 oC).
- Tiempo de reacción: 2 minutos
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE - Volumen de muestra: 10 ul
ALMACENAMIENTO - Volumen final de reacción: 1,01 ml
Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10 oC) Los volúmenes de muestra y Reactivo A se pueden variar
hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Evitar la pro-porcionalmente (ej.: 20 ul de muestra + 2 ml de
exposición prolongada del Reactivo A a la luz directa. Reactivo A o 5 ul de muestra + 0,5 ml de Reactivo A).
* No provisto en todas las presentaciones 864120500 / 01 p. 1/6
 En una población de 120 individuos sanos, provenientes de la
PROCEDIMIENTO ciudad de Rosario (Argentina), de ambos sexos (entre 20 y
En tres tubos marcados B (Blanco), S (Standard o 45 años), con una ingesta restringida en calcio, se
Cali-brador) y D (Desconocido) colocar: encontró: Orina: 60 - 200 mg/24 hs
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus
B S D propios valores de referencia.
Muestra - - 10 ul
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Standard o Calibrador - 10 ul -
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
Agua destilada 10 ul - - A longitudes de onda inferiores a 650 nm, pueden
Reactivo A 1 ml 1 ml 1 ml encontrar-se lecturas de Blanco superiores a 1,200 D.O.
que no afectan los resultados.
Mezclar e incubar 2 minutos a temperatura ambiente Contaminaciones: el material a utilizar debe estar rigurosa-
(15-25oC). Leer la absorbancia en espectrofotómetro a mente limpio, libre de calcio y de toda traza de anticoagulan-
650 nm o en fotocolorímetro (620-650 nm), llevando el te. Para ello aconsejamos lavar con detergentes no iónicos
aparato a cero con el Blanco. (Noión de Wiener lab.) o ácidos minerales diluidos,
efectuan-do varios enjuagues con agua destilada.
Se aconseja separar pipetas y tubos para uso exclusivo
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL de esta determinación.
El color de reacción final es estable 1 hora, por lo que la
absorbancia debe ser leída dentro de este lapso. PERFORMANCE
a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente 20 re-
CALCULO DE LOS RESULTADOS plicados de las mismas muestras en un mismo día, se
10 mg/dl o C obtu-vieron los siguientes datos:
1) Calcio sérico (mg/dl) = D x f f=
S Nivel D.S. C.V.
9,2 mg/dl  0,18 mg/dl 1,93 %
donde: Suero
C = concentración de calcio en el Calibrador A plus en 11,0 mg/dl  0,10 mg/dl 0,88 %
caso de utilizar este reactivo 104 mg/24 hs  2,68 mg/24 hs 2,57 %
Orina
372 mg/24 hs  6,64 mg/24 hs 1,79 %
D
2) Calcio urinario (mg/24 hs) = x 200 mg/24 hs Procesando la misma muestra en diferentes días, se obtuvo:
S
9,1 mg/dl  0,16 mg/dl 1,74 %
En el caso de orinas con volúmenes de diuresis Suero
12,1 mg/dl  0,16 mg/dl 1,29 %
superiores a los 2 litros o que no han sido llevadas a 2
litros con agua destilada, utilizar el siguiente cálculo: 117 mg/24 hs  2,9 mg/24 hs 2,44 %
Orina
D 266 mg/24 hs  7,0 mg/24 hs 2,62 %
Calcio urinario (mg/24 hs) = x 100 x V b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 20 mg/dl. Para
S valores superiores, repetir la determinación empleando mues-
donde: tra diluida al 1:2 ó 1:4 con solución fisiológica y multiplicar el
100 = concentración del Standard en mg/l resultado obtenido por 2 ó 4 respectivamente.
V = volumen de la diuresis en litros/24 hs c) Límite de cuantificación: la mínima concentración de
calcio detectable por este método es de 2,5 mg/dl.
CONVERSION DE UNIDADES
Ca (mg/dl) = Ca (mmol/l) x 4 PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
Ca (mmol/l) = Ca (mg/dl) x 0,25 Para las instrucciones de programación consulte el manual del
Ca (mg/dl) = Ca (mEq/l) x 2 usuario del analizador en uso. Para la calibración debe
Ca (mEq/l) = Ca (mg/dl) x 0,5 emplearse Calibrador A plus de Wiener lab.

METODO DE CONTROL DE CALIDAD PRESENTACION

Si la muestra a ensayar es suero, procesar 2 niveles de - 4 x 50 ml (Cód. 1152004)
un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 - 8 x 20 ml (Cód. 1009307)
niveles) con concentraciones conocidas de calcio, con - 8 x 20 ml (Cód. 1009248)
cada determi-nación. En el caso de muestras de orina, - 8 x 20 ml (Cód. 1009606)
utilizar un control con base de orina.
BIBLIOGRAFIA
VALORES DE REFERENCIA - Morgan, B.R.; Artiss, J.D.; Zak, B. - Clin. Chem. 39/8:1608 (1993).
Suero: 8,5 - 10,5 mg/dl - Leary, N.O.; Penbroke, A.; Duggan, P.F. - Clin. Chem.
Orina: hasta 300 mg/24 hs (para una dieta normal) 38/ 6:904 (1992).
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- Burtis C., Ashwood, E. - Tietz Texbook of Clinical Chemistry, SIMBOLOS
WB Saunders Co., 3º ed, 1999. Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
- Martinek, R.G. - J. Am. Med. Techn. 33:416 (1971). reac-tivos para diagnóstico de Wiener lab.
- Rojkín, M. y Mariani, M. de - Bioquím. Clín. VII/4:405 (1973).
- Lorenzo, L.E. ; Drappo, G.A. - 1o Congreso Argentino de Este producto cumple con los requerimientos previs- Ctos por la Directiva
Europea 98/79 CE de productos
Osteología y Metabolismo Mineral - Rosario (1984). sanitarios para el diagnóstico "in vitro"
- Drappo, G.; Lorenzo, L.; - Revista ABA 239:230 (1979).
- Connerty, H.V.; Briggs, A.R. - Am. J. Clin. Path. 45:290 (1966). PRepresentante autorizado en la Comunidad Europea
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory
Tests", AACC Press, 4th ed., 2001. V Uso diagnóstico "in vitro"
- Tietz, N.W. - "Fundamentals of Clinical Chemistry", W.B. X Contenido suficiente para <n> ensayos
Saunders, Philadelphia, 2001.
H Fecha de caducidad

l Límite de temperatura (conservar a)

G No congelar

F Riesgo biológico

Volumen después de la reconstitución

 Cont. Contenido

g Número de lote

M Elaborado por:
Xn
Nocivo

Corrosivo / Caústico

Xi
Irritante

i Consultar instrucciones de uso

Calibr. Calibrador

b Control
b Control Positivo

c Control Negativo

h Número de catálogo
 M Wiener Laboratorios S.A.I.C.
Riobamba 2944
2000 - Rosario - Argentina

Wiener lab.
http://www.wiener-lab.com.ar
Dir. Téc.: Viviana E. Cétola
Bioquímica
Producto Autorizado A.N.M.A.T.
Cert. Nº: 4209/01
2000 Rosario - Argentina
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