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CATEDRA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
- Laboratorio de Microbiología Molecular y Biotecnología -
CASO 2: MICROSCOPÍA Y COLORACIONES
Blgo. José González Cabeza
A continuación, se presenta una situación problemática, la cual deberá ser abordada por el Grupo
de Práctica (03 mesas). Para ello; se realizarán sorteos al azar (docente y alumnos) para cada una
de las interrogantes planteadas.
Situación problemática:
Durante la realización de la Práctica de “Coloraciones y Microscopía” de la asignatura de
microbiología, Ud. dispone de una serie de colorantes y de un microscopio compuesto.
Consecuencia de lo anterior; su docente desmonto uno de los objetivo; ante lo cual Ud. se percata
que el cilindro metálico tiene grabados un conjunto de leyendas (ver figura adjunta).
Cuestionario:
1. ¿Cuál es el significado y función de cada una de las leyendas?

✔ Fabricante del objetivo:
✔ Corrección del plano de campo:
✔ Magnificación lateral:
✔ Propiedades ópticas especiales:
✔ Longitud del tubo:
✔ Espesor del cubre objetos:
✔ Corrección de aberraciones: Los objetivos, como cualquier otra lente, pueden
presentar una serie de defectos o aberraciones durante el proceso de formación de
la imagen. HACEN UNA MEJORA VISUAL
✔ Apertura numérica: Determina el rendimiento de un lente objetivo.
✔ Medio de inmersión:
✔ Distancia focal: Distancia entre el punto focal y el lente frontal del objetivo, se
expresa en el milímetro.
✔ Código de color de magnificación: Facilitan la identificación del aumento.
2. ¿Qué tipo de imagen producen los objetivos? Sustente lo señalado.
✔ AUMENTADA:
✔ REAL:
✔ INVERTIDA:
3. ¿Qué son objetivos acromáticos, apocromáticos y monocromáticos?
✔ Objetivos Acromáticos: Son los más comunes, tienen la aberración
cromática corregida para el amarillo o verde.
✔ Objetivos Apocromáticos: Son corregidos para tres colores, rojo,
verde y violeta, mediante lentes de espato flúor
✔ Objetivos Monocromáticos: Son construidos de cuarzo y corregidos
para una sola longitud de onda. Se usan en microfotografía con luz
UV.Se obtienen buenas imágenes incluso con objetivos frescos o sin teñir,
dado el desigual poder de absorción de los diferentes elementos de una
preparación histológica a los rayos UV. A igual apertura numérica, estos
lentes poseen el doble de poder de resolución.
4. ¿Qué es distancia focal?
Es la distancia entre el centro óptico del lente y el preparado (o punto focal).
5. Defina “apertura numérica”, “poder de resolución”, “limite de resolución”
✔ APERTURA NUMERICA: Sistema óptico es un número adimensional que
caracteriza el rango de ángulos para los cuales el sistema acepta luz.
✔ PODER DE RESOLUCION: Sistema óptico para diferenciar entre dos puntos o líneas muy
próximos entre sí.
✔ LIMITE DE RESOLUCION: Es la menor distancia que debe existir entre dos objetos para
que puedan visualizarse por separado. Cuando se ilumina un objeto, los puntos de su
superficie reflejan las ondas luminosas.
6. ¿Cuántos tipos de preparados microscópicos conoce?
✔ EN SECO: No necesita hidratación.
✔ EN FRESCO: Necesita hidratación.
✔ CON TINCION: Es hidratada y se añade un tinte.
7. ¿Cuál es el propósito de emplear aceite de cedro con el objetivo de inmersión? Sustente su
respuesta.
Para tener una mejor visualización de la muestra, ya que como sabemos vemos
microrganismos muy pequeños y con este aceite tendremos una mejor percepción.
8. Establezca diferencia entre:
Microscopio de Campo Claro Microscopio de Campo Oscuro Microscopio de Fluorescencia
✔ Permiten la ✔ Utiliza un ✔ Se basa en los

observación de condensador mismos principios
preparaciones en especial que de óptica que
su color natural o bloquea los rayos para la
mediante tinciones. que ingresan por el microscopía
centro del común, con
condensador y diferenciaen el
refleja manejo y el
oblicuamente diseño
sobre el objeto los relacionado con
que ingresan por la la generación y
periferia. transmisión de
longitudes de
onda adecuadas a
los fluorocromos
que se quieren
visualizar
Asimismo; en esa misma práctica, Ud. emplea una serie de colorantes para las observaciones
microscópicas, por lo que es necesario tener el conocimiento previo de lo siguiente:
9. ¿Qué es un colorante, y cuáles son sus componentes?.
Es una sustancia que tiñe, dando nuevo color a una muestra.
✔
10. ¿Proponga al menos dos sistemas de clasificación de los colorantes empleados en
microscopía, señalando ejemplos en cada una de ellos.
11. ¿Qué diferencia establece entre una coloración supruvital e intravital? (TOXICOS)
✔ SUPRUVITAL: En este procedimiento se emplean colorantes que se aplican a células
o tejidos provenientes de organismos vivos. Se demuestran: mitocondrias con el
verde de Jano, los gránulos de las células cebadas con el rojo neutro, la sustancia
granulofilamentosa de los reticulocitos con el azul brillante de cresyl, ramificaciones
nerviosas con el azul de metileno; o el ADN y el ARN de las células con naranja de
acridina (empleando el microscopio de fluorescencia).
✔ INTRAVITAL: consiste en la administración de colorantes vitales a través de las vías
digestiva o intratraqueal; mediante inyecciones sanguíneas, linfáticas, subcutánea, o
intraperitoneal. Las soluciones de uso más frecuente son: tinta china, carmín de litio,
azul tripan (partículas colorantes que demuestran la capacidad fagocítica).
12. ¿Qué diferencia establece entre frotis y extensión, durante una preparación microscópica?
13. Fundamento de la coloración Gram. ¿Para qué sirve?

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1. ¿Cuál es el significado y función de cada una de las leyendas?

✔ Permiten la ✔ Utiliza un ✔ Se basa en los

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