Ni siquiera con gafas

¡Ni siquiera con gafas!
1. Microscopio óptico
Mediante el microscopio podemos ver el tamaño de las bacterias, su morfología y
las diferentes formas de hacer grupos.
- Estudio directo de bacterias
- Mediante tinción, las bacterias se ven muertas
Consta de dos sistemas principales

- Sistema mecánico: incluye la base, el brazo, la platina, el macrométrico y el
micrométrico.
- Sistema óptico: comprende el condensador, los objetivos y el ocular.
 Resolución: capacidad de distinguir dos puntos cercanos. La resolución

depende de la apertura numérica (AN) y la longitud de onda de la luz.
 Amplificación: aumento del tamaño de la imagen coma que se calcula

multiplicando el aumento del objetivo por el del ocular
( Incremento del objetivo ∙ Aumento del ocular= Aumento del microscopio ).
λ
PR=
An
Donde:
o PR: diferencia
o : mitad del ángulo de luz que entra en el objetivo
o An: amplificación numérica
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An=n ∙ sinθ
Donde:
o An: amplificación numérica

o n: índice de refracción
La amplificación numérica puede ser:
Objetivo seco 4x, 10x y 40x <0,1

Objetivo sumergido 100x 1,2-1,4
2. Uso del microscopio

Para enfocar correctamente el microscopio, se comienza con el objetivo de menor
aumento y utilizando el macrométrico y micrométrico para enfocar.
El objetivo de inmersión requiere la aplicación de aceite de inmersión sobre la
muestra.
1. Compruebe que el objetivo con menor aumento está colocado.
2. Colocar el porta de la muestra en la platina.
3. Acerca la lente del objetivo a la preparación, no hagas este procedimiento
mirando desde el ocular.
4. Alejar el objetivo de la preparación utilizando el macrométrico hasta ver la
mancha.
5. Ajustar utilizando el micrométrico hasta obtener un enfoque claro.
6. Utilice el siguiente objetivo.
7. La imagen debe estar casi enfocada.
Uso del objetivo de inmersión:
1. Gira el revolver entre el objetivo de inmersión y otro.

2. Sobre el preparado, inclinar una gota de aceite sobre el punto de luz.
3. Terminar el giro del revolver al objetivo de inmersión.
4. Enfoca cuidadosamente a través del micrométrico.
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3. Tipos de microscopia
Utiliza un haz de electrones para
escanear la superficie de una
Microscopia electrónica
muestra, produciendo imágenes
de barrido (SEM)
tridimensionales detalladas de
Microscopia su topografía
electrónica Pasa electrones a través de una
muestra ultrafina, permitiendo
Microscopia electrónica
observar su estructura interna
de transmisión (TEM)
con una resolución
extremadamente alta
Utiliza luz visible para iluminar la
muestra desde abajo,
Luminoso exterior
observando la luz transmitida a
través de ella
Ilumina la muestra desde los
lados, haciendo que solo la luz
dispersada por la muestra entre
Exterior oscuro
el objetivo, ideal para observar
detalles en muestras
transparentes
Emplea luz ultravioleta para
aumentar la resolución y el
Ultravioleta contraste, útil para observar
Microscopia de detalles finos en muestras
luz óptica biológicas
Utiliza fluoroforos que emiten luz
cuando son excitados por una
longitud de onda específica,
Fluorescencia
permitiendo visualizar
estructuras específicas dentro
de la muestra
Convierte diferencias en el
índice de refracción de la
muestra en variaciones de
Contraste de fases intensidad, facilitando la
observación de células vivas y
estructuras transparentes sin
necesidad de teñirlas
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4. Mediciones micrométricas
Cómo medir estructuras microscópicas utilizando el retículo (situado en el ocular) y
el micrométrico objetivo (situado en la platina). La calibración, que consiste en
ajustar el retículo con el micrométrico objetivo, permite determinar el valor de cada
división del retículo.
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5. Estudio de bacterias
Dos métodos principales para observar bacterias:
 En fresco: se observan bacterias vivas en un medio líquido, lo que permite
estudiar su movilidad y morfología.
o Entre portaobjetos y cubreobjetos
o Suspendido en portas excavadas sobre gota
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 Tinción: se utilizan diferentes técnicas de tinción para visualizar las
bacterias. El proceso de tinción implica la preparación del frotis (extender y
fijar la muestra en un portaobjetos), la aplicación de colorante y la
observación al microscopio.
o Simples: utilizan un solo colorante para visualizar la morfología de
las bacterias.
o Negativas: usan un colorante ácido que no tiñe las bacterias,
destacándolas sobre un fondo oscuro.
o Diferenciales: usan varios colorantes para diferenciar bacterias en
base a sus propiedades, como la composición de su pared celular.
Se menciona en la tinción de gram (qué diferencia bacterias gram
positivo y gram negativo) y la atención de Ziehl-Neelsen (que
identifica bacterias ácido-alcohol resistentes).
o Estructurales: tiñen estructuras específicas como esporas.
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Consta de dos sistemas principales

 Resolución: capacidad de distinguir dos puntos cercanos. La resolución

 Amplificación: aumento del tamaño de la imagen coma que se calcula

o An: amplificación numérica

La amplificación numérica puede ser:

Objetivo seco 4x, 10x y 40x <0,1

2. Uso del microscopio

Uso del objetivo de inmersión:

1. Gira el revolver entre el objetivo de inmersión y otro.

o Suspendido en portas excavadas sobre gota

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