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Proteínas y enzimas

INSTITUTO DE EDUCACIÓN SUPERIOR TECNOLOGICO


PÚBLICO NARANJILLO

PROTEINAS

UNIDAD DIDACTICA:

DOCENTE:

ESPECIALIDAD:

INTEGRANTES:

1
Proteínas y enzimas

2
Proteínas y enzimas

INDICE

Introducción -------------------------------------------------------------------------------------------------4

Proteínas ------------------------------------------------------------------------------------------------5_11

1. Historia
2. Definición
3. Estructura:
 primaria
 Secundaria
 Terciaria
 Cuaternaira

Clasificación-------------------------------------------------------------------------------------------------
12_16

 Según su composición
 Según su conformación
 Según su función

Funciones --------------------------------------------------------------------------------------------------17

Importancia en el organismo---------------------------------------------------------------------------20

Derivados---------------------------------------------------------------------------------------------------24

Propiedades------------------------------------------------------------------------------------------------29

Ensayos de reconocimiento-----------------------------------------------------------------------------31

Conclusiones-----------------------------------------------------------------------------------------------57

Bibliografía----------------------------------------------------------------------------------------------- --59

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Proteínas y enzimas

INTRODUCCIÓN

Por noción sabemos que las biomoleculas son: carbohidratos, lípidos, proteínas.

Estos últimos de gran importancia en nuestro organismo, son compuestos


químicos muy complejos que se encuentran en todas las células vivas: en la
sangre, en la leche, en los huevos y en toda clase de semillas y pólenes. Hay
ciertos elementos químicos que todas ellas poseen, pero los diversos tipos de
proteínas los contienen en diferentes cantidades. En todas se encuentran un alto
porcentaje de nitrógeno, así como de oxígeno, hidrógeno y carbono. En la mayor
parte de ellas existe azufre, y en algunas fósforo y hierro.
Las proteínas son sustancias complejas, formadas por la unión de ciertas
sustancias más simples llamadas aminoácidos, que los vegetales sintetizan a
partir de los nitratos y las sales amoniacales del suelo. Los animales herbívoros
reciben sus proteínas de las plantas; el hombre puede obtenerlas de las plantas o
de los animales, pero las proteínas de origen animal son de mayor valor nutritivo
que las vegetales. Esto se debe a que, de los aminoácidos que se conocen, que
son veinte, hay ocho que son imprescindibles para la vida, y es en las proteínas
animales donde éstas se encuentran en mayor cantidad.

Aparte están las enzimas, grandes proteínas, moléculas de suma importancia que
aceleran las reacciones químicas. Catalizadores muy potentes y eficaces,
químicamente son proteínas.Como catalizadores, los enzimas actúan en pequeña
cantidad y se recuperan indefinidamente. No llevan a cabo reacciones que sean
energéticamente desfavorables, no modifican el sentido de los equilibrios
químicos, sino que aceleran su consecución.
En su estructura globular, se entrelazan y se pliegan una o más cadenas
polipeptídicas, que aportan un pequeño grupo de aminoácidos para formar el sitio
activo, o lugar donde se adhiere el sustrato, y donde se realiza la reacción. Una
enzima y un sustrato no llegan a adherirse si sus formas no encajan con exactitud.

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Proteínas y enzimas

PROTEÍNAS

1. HISTORIA

En el primer siglo de nuestra vida Plinio E Viejo acuñó el término albumen


haciendo referencia a la clara de huevo

En 1747, lacopo Beccari describió como obtener gluten a partir de la harina de


trigo, solo con amasar ésta con agua para eliminar el almidón. También se sabía
cómo la separación de la sangre coagulada del suero daba lugar a un material
rojo, insoluble en agua, llamada fibrina. Por Furcroy. El último de los materiales
proteicos estudiados intensamente durante esa época fue el cuajo obtenido tras
tratar la leche con ácidos. Este material fue el que se denominó caseína

En 1827 William Prout, clasificó las sustancias que formaban los alimentos en tres
categorías: las sacarinas (los azúcares actuales), las oleaginosas (los actuales
lípidos) y las albuminosas (las que hoy llamamos proteínas)

Luego las proteínas fueron descritas por primera vez por el químico sueco Jöns
Jakob Berzelius en 1838. Posteriormente en 1902 Hermann Emil Fischer y
Hermann Emil Fischer proponen la existencia del enlace peptídico. Sin embargo,
el papel central de las proteínas en los organismos vivos no se aprecia
plenamente hasta 1926, cuando James B. Sumner mostró que la enzima ureasa
es una proteína. La primera secuencia de proteínas que se descubrió fue la de
insulina, por Frederick Sanger, quien ganó el Premio Nobel por este logro en 1958.

Las primeras estructuras de proteínas resueltas fueron la hemoglobina y la


mioglobina, por Max Perutz y Sir John Cowdery Kendrew, respectivamente, en
1958. Las estructuras tridimensionales de ambas proteínas fueron determinadas
por análisis de difracción de rayos-x; Perutz y Kendrew comparten el Premio Nobel
de 1962 de Química por sus descubrimientos.

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Proteínas y enzimas

2. DEFINICIÓN

Proteína deriva del griego proteuo que significa “En primer lugar o yo
primero” o del Dios Proteo, por la cantidad de formas que puede adoptar. Sugiere
que todas las funciones básicas de las células dependen de proteínas específicas;
entonces se puede decir que no xiste vida sin proteínas. Están presentes en cada
célula y en cada organoide celular pudiendo ser estructurales o enzimáticas.

Las proteínas son sustancias complejas nitrogenadas a las cuales se le une


azufre y fósforo (biomoléculas), formadas por la unión de ciertas sustancias más
simples llamadas aminoácidos. Son los más sólidos, más abundantes en el
protoplasma celular.

La formación de estos polímeros o macromoléculas se da cuando un


aminoácido cede al OH del carboxilo y un H del grupo amino de otro aminoácido
liberándose una molécula de agua, dando origen al puente o enlace peptídico
resultando un dipéptido, si se unen 3 aminoácidos se les llama tripéptido, 5 es un
pentapéptido, (la distancia entre las uniones peptídicas es de 3.5 A), el aminoácido
terminal de la cadena que tiene el grupo carboxilo se denomina aminoácido C
terminal y el que lleva el grupo amino libre aminoácido N terminal.

…….!”
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Proteínas y enzimas

3. ESTRUCTURA

La organización de una proteína viene definida por cuatro niveles estructurales


denominados: estructura primaria, estructura secundaria, estructura terciaria y
estructura cuaternaria. Cada una de estas estructuras informa de la disposición de
la anterior en el espacio.

A. ESTRUCTURA PRIMARIA

La estructura primaria es la secuencia de aminoácidos (aa) que conforman la


proteína. Nos indica qué aminoácidos componen la cadena polipeptídica y el
orden en que dichos aminoácidos se encuentran, determinando así su función. La
primera estructura primara determinada fue de la insulina por Singer (Nobel -
1957)

Presentan enlace dusidulfuro por aminoácidos que tienen azufre, como la cisteína.

Estructura primaria de
la insulina

B. ESTRUCTURA SECUNDARIA

La estructura secundaria es la disposición de la secuencia de aminoácidos en el

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Proteínas y enzimas

espacio. Los aminoácidos (aa), a medida que van siendo enlazados durante la
síntesis de proteínas y gracias a la capacidad de giro de sus enlaces, adquieren
una disposición espacial estable, la estructura secundaria.

Existen dos tipos de estructura secundaria:

 La alfa hélice, forma de cilindro, aquí la cadena peptídica se enrolla


alrededor de un cilindro imaginario y se halla estabilizada por enlaces
puentes de hidrógeno entre el grupo amino y el grupo carboxilo de los
aminoácidos situados cuatro residuos más adelante en la misma cadena
polipeptídica. Es la más estable, dextrógira ser repite cada 5.4 A. presentan
esta estructura colágeno, prolina

 La conformación beta, forma de hoja plegada, aquí la molécula adopta la


conformación de una hoja de papel plegada, y se halla estabilizada por
puentes de hidrógeno entre grupos amino y carboxilo de los tramos
apareados de la cada polipeptídica. Presentan esta estructura la queratina
de la seda o fibroína.

Estructura secundaria
(Alfa hélice)

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Proteínas y enzimas

Estructura secundaria
(Hoja plegada)

C. ESTRUCTURA TERCIARIA

Es la más común de las proteínas. La estructura terciaria informa sobre la


disposición de la estructura secundaria de un polipéptido al plegarse sobre sí
misma originando una conformación globular o filamentosa, los globulares son
solubles en agua y soluciones salinas y así realizar funciones de transporte,
enzimáticas, etc., se mantienen unidos por enlaces puente disulfuro, puente de
hidrógeno, fuerza de Vander Walls y puente salino; presentan esta estructura, la
Mioglobina, ésta posee 153 aminoácidos. Los de conformación filamentosa son
insolubles en agua y disoluciones salinas.

En definitiva, es la estructura primaria la que determina cuál será la secundaria y


por tanto la terciaria.

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Proteínas y enzimas

D. ESTRUCTURA CUATERNARIA

Resulta de la combinación de dos o más cadenas polipeptídica con estructura


terciaria, para formar un complejo proteico, cada una de estas cadenas
polipeptídicas recibe el nombre de protómero, el número de protómeros varía
desde dos como en la hexoquinasa, cuatro como en la hemoglobina, o muchos
como la cápsida del virus de la poliomielitis, que consta de 60 unidades proteícas.

Están unidas por fuerzas de tipo físico, químico, enlaces de hidrógeno y puente
disulfuro. Presentan esta estructura virus mosaico, la hemoglobina.

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Proteínas y enzimas

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Proteínas y enzimas

CLASIFICACIÓN

Las proteínas poseen veinte aminoácidos, los cuales se clasifican en:

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Proteínas y enzimas

Glicina, alamina, valina, leucina, isoleucina, fenil, alanina, triptófano, serina,

treonina, tirosina, prolina, hidroxiprolina, metionina, cisteína, cistina, lisina,

arginina, histidina, ácido aspártico y ácido glutámico.

1. Según su composición:

Pueden clasificarse en proteínas "simples" y proteínas "conjugadas".

 Las "simples" o "Holoproteínas"

Son aquellas que al hidrolizarse producen únicamente aminoácidos.

Tenemos:

Globulares

 Prolaminas:Zeína (maíz),gliadina (trigo), hordeína (cebada)

 Gluteninas:Glutenina (trigo), orizanina (arroz).

 Albúminas:Seroalbúmina (sangre), ovoalbúmina (huevo), lactoalbúmina

(leche)

 Hormonas: Insulina, hormona del crecimiento, prolactina, tirotropina

 Enzimas: Hidrolasas, Oxidasas, Ligasas, Liasas, Transferasas...etc.

Fibrosas

 Colágenos: En tejidos conjuntivos, cartilaginosos

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Proteínas y enzimas

 Queratinas: En formaciones epidérmicas: pelos, uñas, plumas, cuernos.

 Elastinas: En tendones y vasos sanguineos

 Fibroínas: En hilos de seda, (arañas, insectos).

 Las proteínas cojugadas, complejas o heteroproteinas

 Se subclasifican de acuerdo con la

naturaleza de sus grupos prostéticos.

 Las "conjugadas" o "Heteroproteínas"

son proteínas q ue al hidrolizarse

producen también, además de los

aminoácidos, otros componentes

orgánicos o inorgánicos.

 La porción no protéica de una proteína

conjugada se denomina "grupo prostético".

La siguiente tabla muestra la clasificación completa:

CONJUGADAS

NOMBRE COMPONENTE NO PROTEICO

Nucleoproteínas Acidos nucleicos

Lipoproteínas Lípidos

Fosfoproteínas Grupos fosfato

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Proteínas y enzimas

Metaloproteínas Metales

Glucoproteínas Monosacáridos

Glucoproteínas

 Ribonucleasa

 Mucoproteínas

 Anticuerpos

 Hormona luteinizante

Lipoproteínas

De alta, baja y muy baja densidad, que transportan lípidos en la sangre.

Nucleoproteínas

 Nucleosomas de la cromatina

 Ribosomas

Cromoproteínas

 Hemoglobina, hemocianina, mioglobina, que transportan oxígeno

 Citocromos, que transportan electrones

2. Según su conformación

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Proteínas y enzimas

Se entiende como conformación, la orientación tridimensional que adquieren los

grupos característicos de una molécula en el espacio, en virtud de la libertad de

giro de éstos sobre los ejes de sus enlaces. Existen dos clases de proteínas que

difieren en sus conformacxiones características: "proteínas fibrosas" y

"proteínas globulares".

Las proteínas fibrosas se constituyen por cadenas polipeptídicas alineadas en

forma paralela. Esta alineación puede producir dos macro-estructuras diferentes:

fibras que se trenzan sobre sí mismas en grupos de varios haces formando una

"macro-fibra", como en el caso del colágeno de los tendones o la a-queratina del

cabello; la segunda posibilidad es la formación de láminas como en el caso de las

b-queratinas de las sedas naturales.

Las proteínas fibrosas poseen alta resistencia al corte por lo que son los

principales soportes estructurales de los tejidos; son insolubles en agua y en

soluciones salinas diliudas y en general más resistentes a los factores que las

desnaturalizan.

Las proteínas globulares son conformaciones de cadenas polipeptídicas que se

enrollan sobre si mismas en formas intrincadas como un "nudillo de hilo enredado"

. El resultado es una macro-estructura de tipo esférico.

La mayoría de estas proteínas son solubles en agua y por lo general desempeñan

funciones de transporte en el organismo. Las enzimas, cuyo papel es la catálisis

de las reacciones bioquímicas, son proteínas globulares.


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Proteínas y enzimas

3. Según su función:

La diversidad en las funciones de las proteínas en el organismo es quizá las más

extensas que se pueda atribuir a una familia de biomoléculas.

Enzimas:

Son proteínas cuya función es la "catalisis de las reacciones bioquímicas".

Algunas de stas reacciones son muy sencillas; otras requieren de la participación

de verdaderos complejos multienzimáticos. El poder catalítico de las enzimas es

extraordinario: aumentan la velocidad de una reacción, al menos un millon de

veces.

Las enzimas pertenecen al grupo de las proteínas globulares y muchas de ellas

son proteínas conjugadas.

Proteínas de transporte:

Muchos iones y moléculas específicas son transportados por proteínas

específicas. Por ejemplo, la hemoglobina transporta el oxígeno y una porción del

gas carbónico desdes y hacia los pulmones, respectivamente. En la memebrana

mitocondrial se encuentra una serie de proteínas que trasnportan electrones hasta

el oxígeno en el proceso de respiración aeróbica.

Proteínas del movimiento coordinado: El músculo está compuesto por una

variedad de proteínas fibrosas. Estas tienen la capacidad de modificar su

estructura en relación con cambios en el ambiente electroquímico que las rodea y

producir a nivel macro el efecto de una contracción muscular.

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Proteínas y enzimas

Proteínas estructurales o de soporte:

Las proteínas fibrosas como el colágeno y las a-queratinas constituyen la

estructura de muchos tejidos de soporte del organismo, como los tendones y los

huesos.

Anticuerpos:

Son proteínas altamenmte específicas que tienen la capacidad de identificar

susustancias extrañas tale como los virus, las bacterias y las células de otros

organismos.

Proteoreceptores:

Son proteínas que participan activamente en el proceso de recepción de los

impulsos nerviosos como en el caso de la "rodapsina" presente en los bastoncillos

de la retina del ojo.

Hormonas y Proteínas represoras:

son proteínas que participan en la regulación de procesos metabólicos; las

proteínas represoras son elementos importantes dentro del proceso de

transmisión de la información genética en la bisíntesis de otras moléculas.

FUNCIONES

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Proteínas y enzimas

Las proteinas determinan la forma y la estructura de las célul as y dirigen casi

todos los procesos

vitales. Las funciones de

las proteinas son

específicas de cada una

de ellas y permiten a las

células mantener su

integridad, defenderse de

agentes externos,

reparar daños, controlar

y regular funciones,

etc...Todas las proteinas realizan su función de la misma manera: por unión

selectiva a moléculas. Las proteinas estructurales se agregan a otras moléculas

de la misma proteina para originar una estructura mayor. Sin embargo,otras

proteinas se unen a moléculas distintas: los anticuerpos a los antígenos

específicos, la hemoglobina al oxígeno, las enzimas a sus sustratos, los

reguladores de la expresión génica al ADN, las hormonas a sus receptores

específicos, etc...

A continuación se exponen algunos ejemplos de proteinas y las funciones que

desempeñan:

Función estructural

Algunas proteinas constituyen estructuras


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Proteínas y enzimas

celulares:

 Las histonas, forman parte de los cromosomas que regulan la expresión

de los genes.

 Ciertas glucoproteinas forman parte de las membranas celulares y actuan

como receptores o facilitan el transporte de sustancias.

Otras proteinas confieren elasticidad y resistencia a órganos y tejidos:

 El colágeno del tejido conjuntivo fibroso.

 La elastina del tejido conjuntivo elástico.

 La queratina de la epidermis.

 Las arañas y los gusanos de seda segregan fibroina para fabricar las telas

de araña y los capullos de seda, respectivamente.

Función enzimatica

Las proteinas con función enzimática son las más numerosas y especializadas.

Actúan como biocatalizadores de las reacciones químicas del metabolismo celular.

Función hormonal

Algunas hormonas son de naturaleza protéica, como la insulina y el glucagón (que

regulan los niveles de glucosa en sangre) o las hormonas segregadas por la

hipófisis como la del crecimiento o la adrenocorticotrópica (que regula la síntesis

de corticosteroides) o la calcitonina (que regula el metabolismo del calcio).

Función reguladora

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Proteínas y enzimas

Algunas proteinas regulan la expresión de ciertos genes y otras regulan la división

celular (como la ciclina).

Función homeostatica

Algunas mantienen el equilibrio osmótico y actúan junto con otros sistemas

amortiguadores para mantener constante el pH del medio interno.

Función defensiva

Las inmunoglogulinas actúan como anticuerpos frente a posibles antígenos.

La trombina y el fibrinógeno contribuyen a la formación de coágulos sanguíneos

para evitar hemorragias.

Las mucinas tienen efecto germicida y protegen a

las mucosas.

Algunas toxinas bacterianas, como la del botulismo,

o venenos de serpientes, son proteinas fabricadas

con funciones defensivas.

Función de transporte

 La hemoglobina transporta oxígeno en la sangre de los vertebrados.

 La hemocianina transporta oxígeno en la sangre de los invertebrados.

 La mioglobina transporta oxígeno en los músculos.

 Las lipoproteinas transportan lípidos por la sangre.

 Los citocromos transportan electrones.

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Proteínas y enzimas

Función contractil

 La actina y la miosina constituyen las

miofibrillas responsables de la

contracción muscular.

 La dineina está relacionada con el movimiento de cilios y flagelos.

Función de reserva

 La ovoalbúmina

hordeina de la cebada, constituyen la reserva de aminoácidos para el

desarrollo del embrión.

 La lactoalbúmina de la leche.

IMPORTANCIA EN EL ORGANISMO

Debe aportarse en la alimentación diaria al menos 0,8 gramos de proteínas por kg

al día.

Una capacidad inmune adecuada requiere de una alimentación mixta, es decir

mezclar proteínas en cada comida. Esto es necesario para constituir una

adecuada estructura de ladrillos de las proteínas, conocidos como aminoácidos.


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Proteínas y enzimas

Diariamente se recambia el 1 a 2% de nuestras proteínas, razón por la que

debemos ingerir dicha cantidad.

Existen aminoácidos indispensables para la salud dado que el organismo es

incapaz de sintetizarlos si no se ingieren.

Estos ladrillos (aminoácidos) se conocen como esenciales y constituyen los

factores limitantes para alcanzar la óptima nutrición proteica.

Los cereales son deficitarios en dos: la treonina y lisina (trigo) o triptofano y lisina

(el maíz).

Los lácteos de vaca son deficitarios en metionina, cisteína y hoy semi deficitarios

en triptofano.

El pescado, pollo,vacuno, tubérculos (papas) y leguminosas (porotos lentejas,etc)

son deficitarias en cisteína y metionina.

El huevo es deficitario en metionina para el adulto.

La mal nutrición provoca:

Reducción de la competencia inmune, vale decir la respuesta específica de

anticuerpos y de glóbulos blancos disminuye.

La respuesta inflamatoria de fase aguda se reduce considerablemente.

La restrición proteica reduce la síntesis del antioxidante y protector más importante

de nuestras células, el glutation. Su deficiencia es secundaria a una pobre ingesta

de sus precursores aminoácidicos, el glutamato, la glicina y la cisteína.

Su déficit reduce la capacidad de limpiar los productos de desechos que los


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Proteínas y enzimas

microorganismos nos dejan, los conocidos Radicales Libres. Estos actúan

prolongando el daño a las células propias y de paso aumentan el riesgo de un

cáncer, promovido por una infección de un virus, por ejemplo la hepatitis B o por la

ingestión de productos químicos inductores o promotores de cáncer, por ejemplo

pesticidas, toxinas de hongos, etc.

La falta de proteína produce vulnerabilidad a las infecciones en nuestro organismo

lo que se manifiesta en el pulmón y en el intestino delgado.

En ambos, la secreción continua de mucosidades permite un verdadero barrido de

las sustancias dañinas, entre ellos sustancias potencialmente cancerígenas y

también de microrganismos infecciosos que pudieron entrar.

Esta sustancia viscosa constituida por azúcares y proteínas (glucoproteínas) es de

secreción constante y requiere del aporte de proteínas adecuado, si este aporte

falla en cantidad o calidad (falta de ciertos aminoácidos conocidos como cisteína o

treonina) el mucus será pobre o de mala calidad reduciendo nuestra capacidad de

defensa

DERIVADOS

 Proteínas citosólicas.

Representa uno de los grupos que tiene mayor abundancia de proteínas. En él se

distinguen:

Las proteínas fibrilares: son las que constituyen el citoesqueleto (los

neurofilamentos) y entre ellas se encuentran la tubulina, la actina y sus proteínas

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Proteínas y enzimas

asociadas. Representan alrededor de un 25% de las proteínas totales de las

neuronas.

Enzimas: catalizan las reacciones metabólicas de las neuronas.

 Proteínas citosólicas

Se forman en los poliribosomas libres o polisomas, ubicados en el citoplasma

neuronal, cuando el mRNA para esas proteínas se une a los ribosomas. En

relación a estas proteínas hay que considerar a otra proteína pequeña, la

ubiquitina, que se une residuos de lisina de las proteínas para su posterior

degradación.

 Proteínas nucleares y mitocondriales

También se forman en los polirribosomas y luego son enviadas al núcleo o a las

mitocondrias, donde existen receptores específicos a los que se unen para

incorporarse al organelo, por el proceso de traslocación. El mecanismo por el que

se incorporan las proteínas después de su síntesis, es la importación post-

transducción.

Hay dos categorías de proteínas de membranas

1.- Las proteínas integrales:

Se incluyen en este grupo los receptores químicos de membrana (a

neurotransmisores, a factores de crecimiento). Ellas están incertadas o embebidas

en la bicapa lipídica o están unidas covalentemente a otras moléculas que sí


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Proteínas y enzimas

atraviesan la membrana. Una proteína que atraviesa la membrana y que ofrece un

grupo N-terminal, hacia el espacio extraneuronal, es designada como del tipo I.

Las hay también del tipo II que son aquellas en que el grupo N-terminal se ubica

en el citosol.

2.- Las proteínas periféricas:

se ubican en el lado citosólico de la membrana a la cual se unen por asociaciones

que hacen con los lípidos de la membrana o con las colas citosólicas de proteínas

integrales o con otras proteínas periféricas (proteína básica de la mielina o

complejos de proteínas).

Las proteínas de la membrana plasmática y las de secreción se forman en los

polirribosomas que se unen al retículo endoplasmático rugoso. Ellos constituyen

un material de naturaleza basófila (se tiñen con colorantes básicos como el azul

de toluidina, el violeta de cresilo y el azul de metileno) que al microscopio óptico se

han identificado como la substancia de Nissl. Una vez que las proteínas formadas

en este sistema pasan al interior del retículo, ellas son modificadas por procesos

que se inician el retículo y que continuan en el sistema de Golgi y aún,

posteriormente, en los organelos finales a donde son destinadas (vesículas de

secreción).

Las proteínas que son componentes de las membranas abandonan el retículo en

una variedad de vesículas. Además de las de secreción, son muy importantes

para las neuronas, las vesículas sinápticas. A través de ambos tipos de vesículas

las proteínas son enviadas al espacio extraneural por la vía constitutiva o la vía
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Proteínas y enzimas

regulada

PROPIEDADES

 Especificidad

Las propiedades de las proteínas dependen de la estructura tridimensional en el

medio acuoso, es decir, de los aminoácidos que se disponen en su superficie, que

son los que constituyen el centro activo; también de los aminoácidos que se

disponen hacia el interior, ya que son los que dan rigidez y forma a la proteína.

Cada proteína tiene una conformación según su estructura primaria. Así, un

pequeño cambio en la secuencia de aminoácidos provoca cambios en la

estructura primaria, secundaria, terciaria, y por tanto pérdida de la actividad

biológica.

 Solubilidad

Las proteínas globulares son solubles en agua, debido a que sus radicales polares

o hidrófilos se sitúan hacia el exterior, formando puentes de hidrógeno con el

agua, constituyendo una capa de solvatación. Esta solubilidad varía dependiendo

del tamaño, de la forma, de la disposición de los radicales y del pH

 Desnaturalización

Pérdida de la estructura tridimensional o conformación, y por tanto también de la

actividad biológica. Se produce al variar la temperatura, presión, pH,

electronegatividad, etc. Esto provoca la rotura de los puentes de hidrógeno que

mantienen las estructuras secundaria y terciaria, y las proteínas se convierten en


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Proteínas y enzimas

fibras insolubles en agua. Si las condiciones son suaves, el proceso es reversible,

y si el cambio es más drástico, es irreversible.

ENSAYOS DE RECONOCIMIENTOS

Los métodos utilizados en este caso,

químicos o de coloración, se basan

esencialmente en poner de manifiesto

ciertos aminoácidos componentes de las

proteínas, algunos de sus radicales o de

sus enlaces. De esta manera los colorantes

que tiñen a las proteínas al unirse a ciertos

radicales que intervienen en sus

constitución (radical indolico, fenolico, sulfhidrilo, etc.), o a las ligaduras

peptidicas , pero sin lograr por ello caracterizar a la proteína presente.

Es frecuente recurrir a la caracterización de algunos grupos de los aminoácidos

que concurren a la formación de una proteína para poder así determinarla.

Mencionemos aquí unas pocas reacciones de este tipo usadas más generalmente

y sus fundamentos.

A. Reacción de la nihidrina

Tiene como objetivo detectar y cuantificar cantidades de aminoácidos libres. Los

aminoácidos, en general reaccionan con la ninhidrina o hidrato de

tricetohidrindeno descubierta en el año de 1954; es un oxidante energético,

28
Proteínas y enzimas

cuando son calentados con un exceso de la misma. Todos los aminoácidos que

poseen un grupo amino libre y uno carboxilo libre reaccionaran y forman dióxido

de carbono, amoníaco, un aldehído que contiene un átomo de carbono menos que

el compuesto original y formación de la ninhidrina reducida o hidrindrantina. Esta

reacción da lugar a la formación de un producto color azul o púrpura (que

posteriormente puede ser utilizado para cuantificar el aminoácido).

La molécula de hidridantina, en presencia de otra de ninhidrina, condensa a

través del amoniaco produciendo una estructura denominada indanona o púrpura

de Ruhemann, manifestando un color rojizo, excepto para la prolina, hidroxiprolina

y en menor medida para la histidina En el caso de la prolina, que estructuralmente

no posee el grupo amino libre, sino un grupo imino, la coloración final es amarilla.

El amoníaco, la mayoría de los polipéptidos y las proteínas pueden desarrollar

coloración en esta reacción, pero a diferencia de los aminoácidos, no liberan CO2

La ninhidrina, un agente oxidante poderoso, reacciona con todos los a-

aminoácidos a un pH entre 4 y 8 para dar un compuesto de color violeta.

Las reacciones implicadas son las siguientes:

NINHIDRINA + AMINOACIDO --------------- HIDRINDANTINA + ALDEHIDO + CO2+

NH3

HIDRINDANTINA + NH3 + NINHIDRINA ------------- COMPLEJO DE COLOR VIOLETA

+ AGUA

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Proteínas y enzimas

B.Reacción de Biuret

 El uso de la reacción de

Biuret como método para la

estimación de proteínas en el

plasma la introdujo por

primera vez Reigler . Gornall

y colaboradores modificaron

el procedimiento al agregar

tartrato de sodiopotasio en

cual actúa con un agente que

forma un complejo para producir un complejo de proteína-cobre estable.

este método utiliza la reacción de Biuret donde la proteína reacciona con el

reactivo a pH alcalino para formar un complejo colorido azul-violeta.

 El Reactivo de Biuret es aquel que detecta la presencia de proteínas,

péptidos cortos y otros compuestos con dos o más enlaces peptídicos en

sustancias de composición desconocida

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Proteínas y enzimas

 El método de Biuret permite determinar la concentración de proteínas de

una muestra.

 Se basa en la reacción que tiene lugar entre los iones de cobre del reactivo

de Biuret y los nitrógenos de los enlaces peptídicos de las proteínas.

 Consiste en tratar una proteína o péptido con Cu ++ en medio alcalino,

produciéndose una coloración violácea por formación de un complejo de

coordinación entre el Cu++ y los pares electrónicos libres de los nitrógenos

de los grupos imino de la unión peptídica. Son necesarias por lo menos dos

uniones peptídicas para que tenga lugar la reacción.

 La reacción del biuret no es una reacción específica para proteínas. Eso

hace que un resultado positivo con este reactivo deba ser cuidadosamente

evaluado para descartar los resultados falsos positivos.

 Las determinaciones de proteína total son útiles en el diagnóstico y

tratamiento de una diversidad de enfermedades que afectan el hígado,

riñones, médula ósea así como otros trastornos metabólicos o nutricionales.

 Un resultado negativo de la reacción del biuret sobre una muestra problema

no necesariamente indica la ausencia de proteínas, ya que puede ocurrir:

a) que no existan proteínas o péptidos en la muestra (ni tampoco otras

sustancias no proteicas biuret positivas).

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Proteínas y enzimas

b) que existan una o más sustancias interferentes en la muestra que

impidan que se produzca la reacción (lo que daría lugar a un resultado

falso negativo). Esto puede descartarse (o evitarse) si conozco de

antemano la composición aproximada de la muestra. Por ejemplo, si deseo

determinar el contenido de péptidos generados por una reacción de

hidrólisis ácida, los H+ del medio interferirán con la reacción del biuret, ya

que ésta necesita de un medio alcalino para la formación del complejo con

Cu++. En este caso la interferencia puede eliminarse alcalinizando el medio

antes de realizar el ensayo (en caso contrario obtendría un falso negativo

como resultado).

c) Que existan péptidos, pero a una concentración inferior al límite de

sensibilidad del método. Todo método permite determinar la presencia de

un compuesto sólo si la concentración del mismo es superior a cierto valor.

Existen métodos mucho más sensibles que el biuret.

C.Reacción de Xantoproteica

Está basada en el empleo del acido nítrico que desarrolla color amarillo, el cual

pasa al anaranjado por acción de vapores de NH3.

Esta prueba caracteriza a los aminoácidos aromáticos. Esta reacción se debe la

presencia de un grupo fenilo en la molécula proteica. Los complejos de la

molécula proteica que son de importancia en esta reacción son la tirosina y el

32
Proteínas y enzimas

triptófano. La fenilalanina no reacciona en las condiciones que se realiza en el

laboratorio.

Para esta prueba se produce la nitración del anillo bencénico presente en los

aminoácidos obteniéndose nitrocompuestos de color amarillo, que se vuelven

anaranjado en medio fuertemente alcalino (formación de ácido picrámico o

trinitrofenol). No puede realizarse esa reacción para identificar albúmina en orina,

por el color anaranjado de la reacción final.

D.Reacción de millón

 La reacción del Millón se debe a la presencia del grupo hidroxifenilo en la

molécula proteica. Cualquier compuesto fenólico que no esté sustituido en la

posición 3,5 como la tirosina, el fenol y el timol producen resultados positivos

en esta reacción. De estos compuestos, sólo la tirosina está presente en las

proteínas, de manera que sólo las proteínas que tienen este aminoácido

ofrecen resultados positivos.

 En esta prueba los compuestos mercúricos en medio fuertemente ácido (ácido

nítrico del reactivo) se condensan con el grupo fenólico formando un

compuesto de color rojo ladrillo o rojizo. La prueba no es satisfactoria para

soluciones que contienen sales inorgánicas en gran cantidad, ya que el

mercurio del reactivo del Millón es precipitado y se vuelve negativo, razón por

la cual este reactivo no se usa para medir albúmina en orina.

 Debe tomarse en cuenta que en el caso de que la solución a examinar sea

muy alcalina, debe ser previamente neutralizada, ya que el álcali precipitaría al

33
Proteínas y enzimas

ion mercurio en forma de óxidos amarillos. Además, proteínas como la

ovoalbúmina producen un precipitado blanco que progresivamente por acción

del calor se torna rojo; pero, las peptonas, dan solamente una solución de color

rojo.

E .Reacción de sakaguchi

Utiliza el α_naftol y el hipoclorito de sodio en solución alcalina que comunican

color rojo a las proteínas que contienen el aminoácido arginina (proteínas básicas:

protaminas e histonas presentes en los núcleos).

F. Reacción de diazonio

Al tratar los cortes con una solución alcalina de una sal de diazonio , las proteínas

que contienen grupos tirosina , triptófano o histidina se colorean de amarillo o rojo

según la técnica empleada

G. Reacción de nitroprusiato de sodio

En medio amoniacal las proteínas que poseen grupos sulfhidrilos o disulfuros (-SH

o S-S) toman color rojo o violáceo.

H. Reacción del azul de Prusia

Los grupos antes mencionados producen una coloración azul cuando se tratan de

cortes histológicos con el ferricianuro ferrico , que se transforma en ferrocianuro

férrico o azul de Prusia mediante una técnica adecuada .

Existen otros métodos destinados a la localización de las proteínas que contienen

grupos sulfhidrilos , como la cisteína y el glutatión que intervienen activamente en

el metabolismo celular y en los fenómeno de crecimiento y multiplicación celular ,

34
Proteínas y enzimas

así como en los procesos de queratinización .las células de los islotes de

langerhans del páncreas y las células del lóbulos anterior de la hipófisis poseen

también proteínas caracterizadas por su alto tenor en grupos SH y S-S .

I .Metodo histoespectrometrofotometrico

Se ha recurrido a este método utilizando al luz ultravioleta par descubrir, localizar y

dosar los aminoácidos aromáticos que absorben la radiación ultravioleta en una

zona limitada del espectro .es un método completo, y por o tanto poco práctico.

J .Metodo inmunohistoquimico

Ciertas proteínas pueden ser localizadas e identificadas utilizando anticuerpos

específicos marcados, generalmente fluorescentes .también puede seguirse el

curso del transporte proteico en la células y tejidos utilizando anticuerpos

copulados con ferritina con otra proteína con capacidad enzimática , por ejemplo

la peroxida .en el primer caso , al fijarse el anticuerpo al anfígeno

correspondiente , se habar fijado también la ferritina que lleva acoplada , y como

esta es electrodensa (por su riqueza de hierro), será fácil localizarla con

microscopio electrónico .en el segundo caso deberá procederse a localizar al

peroxidasa fijada en el antígeno mediante uno de los procediemintos que se

mencionaran oportunamente y que da lugar a la formación de un precipitado

electrodendo fácilmente reconocible .

35
Proteínas y enzimas

METODOLOGÍA PARA DESARROLLO DE LA PRÁCTICA:


Considerando la bibliografía entregada en silabo y otras fuentes bibliográficas
confiables, los estudiantes agrupados desarrollarán la práctica, considerando
aspectos farmacológicos y/o bioquímicos.
CASO CLÍNICO
Mujer de 45 años, acude al servicio
de emergencia por
presentar Hinchazón alrededor de
los ojos, pies, orina espumosa y
cansancio, refiere que está
utilizando ketoprofeno 40
mg/cada 6 horas para controlar sus
cefaleas, Dicloxacilina 500
mg/cada 6 horas para una
Infecciones leve en el pie derecho.
El médico de turno solicitó las
siguientes pruebas bioquímicas.

DESARROLLO DEL CASO CLÍNICO


➔ Establezca un diagnóstico presuntivo
SÍNDROME NEFRÓTICO: Es una entidad clínica definida por cinco
características:

36
Proteínas y enzimas

1. Proteinuria (> 3.5 g/24 h)


2. Hipoalbuminemia (< 3.5 g/dL)
3. Edema
4. Hipercolesterolemia
5. Lipiduria
- Justificación: La paciente presentó hipoalbuminemia, hipoproteinemia
e hinchazón alrededor de los ojos y en pies (edema), lo cual es signo de
poder pensar en un diagnóstico presuntivo de síndrome nefrótico de
acuerdo a sus hallazgos bioquímicos de este.

➔ Características bioquímicas de las proteínas séricas totales y


fraccionadas (según el interés clínico)
Proteínas séricas totales: Es la suma de todos los componentes
presentes en el cuerpo humano, que contiene proteínas, como por ejemplo
alfa globulina, beta globulina, gamma globulina y albúmina. Sus valores
normales oscilan 6.0 a 8.4 g/dL gramos por decilitro.
Proteínas fraccionadas: Es la medición de una cantidad determinada de
una o alguna proteína, específica. Sus valores normales, específicamente
son, para: Alfa 1 globulina : 0.1 a 0.4 g/dL, Alfa 2 globulina: 0.6 a 1.1 g/dL,
Beta globulina: 0.7 a 1.3 g/dL, Gammaglobulina: 0.7 a 1.7 g/dL y Albúmina:
3.5 a 5.1 g/dL .
Características y Interés clínico
- Globinas: Constituyen el 38% de las proteínas sanguíneas, transportan
sustancias y son útiles para procesos de solubilidad con otras
sustancias y disolución salinas.
- Globinas alfa 1: Tienen función neutralizadora con enzimas
proteolíticas, se encuentran disminuida en enfermedades pulmonares y
aumentadas en reacciones e procesos inflamatorios. - Betaglobinas: la
Transferrina; que transporta hierro y C3 y C4: son componentes de la

37
Proteínas y enzimas

vía de complemento, tienen función de lisis con bacterias y presentan


inmunidad específica.
- Albúmina: Es una de las proteínas más abundante en el plasma,
presenta un ph de 7.4, tiene como función el transporte de sustancias y
el mantenimiento de la presión coloidosmótica.
➔ Fisiopatología y estrategias farmacológicas (según el diagnóstico
presuntivo)
FISIOPATOLOGÍA DEL SÍNDROME NEFRÓTICO:
En la actualidad, se considera a la barrera de filtración glomerular como la
membrana biológica más compleja con una impermeabilidad casi total a la
albúmina y demás proteínas de alto peso molecular (> 40 kD).2,6 Tal
permeabilidad selectiva para el tamaño, carga y configuración molecular es el
resultado de la interacción compleja entre las células epiteliales viscerales
(podocitos), los diafragmas en hendidura de éstos, la membrana basal glomerular
y los glucosaminoglicanos en la superficie de las fenestras propias del endotelio
vascular del capilar glomerular.6 Así pues, el daño o disfunción de alguno de
estos componentes da como resultado proteinuria, aun cuando el resto de la
barrera de filtración se encuentre íntegra. Esto explica el por qué diferentes
mecanismos de lesión glomerular en patologías muy distintas se manifiestan
como proteinuria: la microangiopatía diabética o la endoteliosis de la
preeclampsia, las podocitopatías que dañan específicamente a las células
epiteliales viscerales, defectos genéticos del diafragma en hendidura como en el
síndrome nefrótico congénito de la variedad finlandesa, y/o las patologías del
colágeno que afectan la membrana basal glomerular (Enfermedad de Alport).La
proteinuria mayor a 3.5 g/24 h es el evento desencadenante de las alteraciones
descritas del síndrome nefrótico: edema, dislipidemia, estado de
hipercoagulabilidad y mayor susceptibilidad a infecciones
DISCUSIÓN PRE PRÁCTICA

❖ Clasificación de las proteínas plasmáticas

38
Proteínas y enzimas

❖ Analice la importancia clínica de las proteínas séricas totales y


fraccionadas en el diagnóstico de enfermedades.
La prueba de electroforesis de proteínas séricas (SPEP, por sus siglas en
inglés) mide proteínas específicas en la sangre para ayudar a identificar
algunas enfermedades. Las proteínas son sustancias formadas por
componentes básicos más pequeños llamados aminoácidos . Las proteínas
tienen una carga eléctrica positiva o negativa, y se mueven en un líquido
cuando se colocan en un campo eléctrico. La electroforesis de proteínas
séricas usa un campo eléctrico para separar las proteínas en el suero
sanguíneo en grupos de tamaño, forma y carga similares.
Proteínas séricas Proteínas séricas encontradas en cada fracción
1. Albúmina: es la más abundante del plasma, representa el 50 % de las mismas.
Transporta numerosas sustancias (aminoácidos, ácidos grasos, enzimas, drogas,
hormonas tiroideas y productos tóxicos). También es responsable del control del
equilibrio de líquidos entre los compartimentos intravascular y extravascular del
organismo, manteniendo la presión coloidosmótica del plasma (la presión
osmótica del plasma es la suma de 2 presiones: la oncótica y la hidrostática que
es la presión del agua)
a. Aumento: en deshidratación
b. Disminución: enfermedad renal, enfermedad hepática, infección crónica, neoplasias,
hemorragias, inanición, desnutrición.

CONCLUSIONES

 Las proteínas son materiales polímeros que se encuentran en las células

vivientes. Sirven como materiales estructurales en el cuerpo y son


39
Proteínas y enzimas

fundamentales para muchos procesos vitales.

 Las proteínas son polímeros de aminoácidos y se producen en las células

del cuerpo.

 Las proteínas de otros animales y de algunas plantas son un alimento

importante, ya que proporcionan los aminoácidos que son esenciales para

el cuerpo en la producción de las proteínas necesarias.

 Cada tejido recoge constantemente de la sangre los aminoácidos

especiales que necesita para su reparación o crecimiento. Un cuerpo que

se desarrolla necesita un amplio suministro de aminoácidos para ayudar al

crecimiento de sus tejidos. Por eso, los niños y los adolescentes necesitan

más proteínas que los adultos.

 Por estas razones concluimos que las proteínas son sustancias esenciales

para los seres vivientes.

Bibliografía

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Proteínas y enzimas

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Decimoquinta edición. 2005. Argentina

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Mª José Aparicio

Angel Martín Costalago

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Antonio Prevosti. 696 pp. Editorial McGraw- Hill.

 Biología. Alvin Nason. Editorial Limusa. México 1980. Primera edición

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