Enzimas

UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS - ESPE-SD
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA

CARRERA DE INGENIERÍA EN BIOTECNOLOGÍA
Materia: Operaciones Unitarias Semestre: Sexto

Paralelo: “B” Unidad: 3
NRC: 16687 Fecha: 2024-02-23
Nombre: Sandoval Rodriguez José Miguel
Investigación Bibliográfica Nro. 1
Aplicaciones y procesos de la disolución lipídica de benceno y tolueno.
ROMPIMIENTO DE CELULAS
El rompimiento celular es un proceso fundamental en diversas áreas de la industria alimentaria,

farmacéutica y biotecnológica. Este proceso tiene como objetivo la obtención del contenido intracelular de
microorganismos, sin alterar ninguno de sus componentes (proteínas, ácidos nucleicos, lípidos u otros
bioproductos de interés).Esto nos permite obtener biomoléculas específicas, el producir biocombustibles o
desarrollar nuevos fármacos (Aryal, 2021).
El método de rompimiento utilizado dependerá según el tipo de célula y la composición de su

pared celular. Independientemente del método, para que el rompimiento celular sea efectivo este no
deberá ser demasiado duro para que el producto recuperado permanezca en su forma activa (Aryal,
2021) .
A continuacion se describen los distintos métodos de rompimiento celular empleados

industrialmente:
Métodos mecánicos de rompimiento celular
Los métodos mecánicos requieren algún tipo de fuerza para romper las células y separar la
proteína intracelular sin agregar químicos o enzimas, para ello pueden emplearse morteros, molinos de
perlas, golpes de cuentas, la ultrasonicación y la homogeneización (Aryal, 2021).
Métodos no mecánicos de alteración celular
Los métodos no mecánicos se dividen a su vez en tres clases que son las siguientes:
 Métodos físicos: Utilizan cambios de temperatura o presión para romper las células, como la
congelación y descongelación, microondas/Termólisis, choque osmótico, descargas eléctricas, la
deshidratación y la extrusión.
 Métodos químicos: Emplean agentes como tolueno, amoníaco, hidróxido de sodio, benceno,
éter, acetona, metanol, hexano, alcohol isoamílico y detergentes como triton X-100, para
promover la alteración o la permeabilización celular, entre las técnicas empleadas en este tipo de
métodos encontramos la disolución lipídica, la detergencia y la digestión enzimática.
 Métodos enzimáticos: Otra estrategia para el rompimiento celular es el uso de enzimas

digestivas que descompondrán la pared celular microbiana, el tipo de enzima empleada
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dependerá de los
diferentes tipos y cepas de células.
Ilustración 1. Rompimiento celular químico con detergentes
Fuente: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32074000/
1. Disolución lipídica de benceno y tolueno
La disolución lipídica de benceno y tolueno es una técnica fundamental para el rompimiento

celular. Esta técnica aprovecha las propiedades fisicoquímicas de estos solventes orgánicos para
permeabilizar las membranas celulares y liberar su contenido intracelular (Gomes et al., 2020).
Este proceso es fundamental en las industrias química y farmacéutica para obtener productos
refinados de alta pureza. El proceso de disolución lipídica comienza con la adición de benceno o tolueno a
una suspensión de células, estos solventes disuelven los lípidos de la bicapa lipídica, desorganizando su
estructura y permeabilizándola. Esta interacción nos permite liberar al medio circundante el contenido
intracelular, como proteínas, ácidos nucleicos y metabolitos (Gomes et al., 2020).
El proceso de disolución lipídica puede llevarse a cabo de diferentes maneras, dependiendo de la

aplicación específica y la estructura celular que se va a alterar. En la industria, se suele realizar en un
reactor agitado, donde se añade el solvente a la suspensión de células y se agita durante un tiempo
determinado. La velocidad de agitación, la temperatura y la concentración del solvente son algunos de los
parámetros que pueden afectar la eficiencia del proceso (Gomes et al., 2020).
Otro de los parámetros vitales que pueden afectar la eficiencia del proceso es la elección del
producto químico (disolvente orgánico, detergente o álcali), este depende del tipo de biomolécula,
microorganismo, así como de su ubicación en la célula microbiana. Si bien la disolución lipídica de
benceno y tolueno es fácilmente escalable y requiere un bajo aporte de energía, su aplicación se
considera limitada debido al alto riesgo de degradación de compuestos, principalmente enzimas y
pigmentos (Gomes et al., 2020).
Aplicaciones de la disolución lipídica de benceno y tolueno
La disolución lipídica de benceno y tolueno tiene una gran relevancia en la industria,

especialmente en las áreas de biotecnología, farmacéutica y alimentaria. Entre las aplicaciones de la
disolución lipídica en la industria se tiene la extracción de proteínas de células animales y vegetales, la
extracción de ADN y ARN para su análisis o purificación y el desarrollo de nuevos fármacos al liberar
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compuestos intracelulares con

potencial terapéutico. Además esta técnica ha demostrado ser eficiente en una amplia gama de
microorganismos, incluidas las especies de E. coli, S. cerevisiae y Kluveromyce (Kakko et al., 2016).
Ilustración 2. Estructura de la pared celular de la levadura Saccharomyces cerevisiae
Fuente:https://www.mlsu.ac.in/econtents/404_Unit%204%20Physical%20and
%20Chemical%20Cell%20disruption%20methods.pdf
Ventajas del uso de la disolución lipídica de benceno y tolueno:
Entre las ventajas de emplear el método de disolución lipídica tenemos las siguientes:
 La disolución lipídica es un método rápido y eficiente para romper células.
 La técnica puede ser utilizada para romper una amplia variedad de células en una amplia gama
de microorganismos, incluidas las especies de E. coli, S. cerevisiae y Kluveromyce.
 La a ruptura celular puede producir una mayor liberación del contenido intracelular, (proteínas,
ácidos nucleicos y metabolitos) al elevar las temperaturas en el rango de 25 a 45 °C.
 Mediante la elección del disolvente, es posible el poder seleccionar el producto deseado para
refinarlo y purificarlo.
Desventajas del uso de la a disolución lipídica de benceno y tolueno:
Entre las desventajas de emplear el método de disolución lipídica tenemos las siguientes:
 Los solventes orgánicos utilizados en la disolución lipídica son tóxicos y pueden ser perjudiciales
para el medio ambiente.
 La recuperación de biomoléculas del extracto celular puede ser un proceso complejo.
 Se debe tener cuidado en la aplicación de los diferentes agentes químicos empleados para la
liberación de compuestos intracelulares, debido a su inflamabilidad y potencial de causar
desnaturalización de proteínas y biomoléculas.
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 Su uso puede conducir a

más pasos en el proceso descendente. (sistemas de filtración en el caso de disolventes, por
ejemplo), corrosión de equipos y suministro constante de productos químicos.
(Harrison, 2023)
2. Conclusiones
El rompimiento celular es un proceso crucial en diversas industrias como la alimentaria,

farmacéutica y biotecnológica, permitiendo la obtención de biomoléculas específicas sin alterar su
composición. Se emplean diversos métodos, tanto mecánicos como no mecánicos, para lograr la ruptura
celular de manera efectiva. Entre estos métodos, la disolución lipídica de benceno y tolueno destaca por
su eficiencia en la liberación del contenido intracelular, siendo ampliamente utilizado en la extracción de
proteínas, ADN, ARN y en el desarrollo de nuevos fármacos. A pesar de sus ventajas en rapidez y eficacia,
este método presenta desventajas como la toxicidad de los solventes utilizados, la complejidad en la
recuperación de biomoléculas y el riesgo de desnaturalización de compuestos. Es fundamental considerar
tanto los beneficios como las limitaciones de la disolución lipídica en el rompimiento celular para
garantizar su aplicación segura y eficaz en la industria.
3. Bibliografía
Aryal, S. (2021, octubre 10). Disrupción celular: Definición, métodos, tipos, significado .
https://microbenotes.com/cell-disruption-methods/
Gomes, T. A., Zanette, C. M., & Spier, M. R. (2020). An overview of cell disruption methods for
intracellular biomolecules recovery. Preparative Biochemistry & Biotechnology , 50(7), 635-654.
https://doi.org/10.1080/10826068.2020.1728696
Harrison. (2023). Disrupción celular: Una descripción general | Temas ScienceDirect . Sciencedirect.
https://www.sciencedirect.com/topics/biochemistry-genetics-and-molecular-biology/cell-disruption
Kakko, N., Ivanova, N., & Rantasalo, A. (2016, 12 5). Cell disruption methods. Retrieved February 23,
2024, from https://www.mlsu.ac.in/econtents/404_Unit%204-%20Physical%20and%20Chemical
%20Cell%20disruption%20methods.pdf
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Aplicaciones y procesos de la disolución lipídica de benceno y tolueno.

El rompimiento celular es un proceso fundamental en diversas áreas de la industria alimentaria,

El método de rompimiento utilizado dependerá según el tipo de célula y la composición de su

A continuacion se describen los distintos métodos de rompimiento celular empleados

Métodos mecánicos de rompimiento celular

Métodos no mecánicos de alteración celular

 Métodos enzimáticos: Otra estrategia para el rompimiento celular es el uso de enzimas

Ilustración 1. Rompimiento celular químico con detergentes

1. Disolución lipídica de benceno y tolueno

La disolución lipídica de benceno y tolueno es una técnica fundamental para el rompimiento

El proceso de disolución lipídica puede llevarse a cabo de diferentes maneras, dependiendo de la

Aplicaciones de la disolución lipídica de benceno y tolueno

La disolución lipídica de benceno y tolueno tiene una gran relevancia en la industria,

compuestos intracelulares con

Ilustración 2. Estructura de la pared celular de la levadura Saccharomyces cerevisiae

Ventajas del uso de la disolución lipídica de benceno y tolueno:

 La disolución lipídica es un método rápido y eficiente para romper células.

Desventajas del uso de la a disolución lipídica de benceno y tolueno:

 La recuperación de biomoléculas del extracto celular puede ser un proceso complejo.

 Su uso puede conducir a

El rompimiento celular es un proceso crucial en diversas industrias como la alimentaria,

intracellular biomolecules recovery. Preparative Biochemistry & Biotechnology , 50(7), 635-654.

2024, from https://www.mlsu.ac.in/econtents/404_Unit%204-%20Physical%20and%20Chemical

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