Universidad de Guayaquil

Facultad de Ciencias Químicas

Carrera: Química y Farmacia
Informe de Laboratorio de Bioquímica I
INTEGRANTES:
 PINELA BANCHON MÁXIMO  LÓPEZ GRANOBLE ROSA
 CRESPO VILEMA IVAN  OLMEDO MONCAYO MIRIAM
 CEDEÑO JARA SHEYLA  OYOLA QUINDE ELIAS
 LOZANO INDACOCHEA SHARLENE  BULGARIN PERALTA NAOMI
GRUPO: G3 – A FECHA: 08/06/2024 CICLO I (2024-2025)
Práctica
TÍTULO: PH Y CURVA DE TITULACIÓN DE UN AMINOÁCIDO
N° 4
Objetivos de la práctica de laboratorio.
 Aprender el funcionamiento y calibración del potenciómetro
 Obtener las curvas de titulación de la prolina.
 Determinar el pKa y el punto isoeléctrico de la prolina.
Instrucciones o consideraciones previas.
Introducción:
Los aminoácidos son moléculas anfóteras, lo que significa que pueden actuar como ácidos o bases,
dependiendo del pH del medio en el que se encuentren. Esta propiedad se debe a la presencia de dos grupos
funcionales ionizables: el grupo amino (-NH2) y el grupo carboxilo (-COOH).
Figura 1
Estructura Química de Alguno aa de la Serie L
O O
O

OH OH
OH
NH2 NH a NH2
NH
A B C
O CH3 O O
S
OH HO OH H3C OH
NH2 NH2 NH2
HO
D E F
O O O

H3C N
HO OH OH OH
NH2 CH3 NH2 NH2
NH
G H I
Nota. En los aa hay diferentes tipos de acorde a su cadena lateral R, estos pueden ser alifático y catiónicos.
a
La prolina es el único aa en dónde posee un N como heteroátomo.
Curvas de titulación:
Una curva de titulación es una gráfica que representa la variación del pH de una solución de un aminoácido
a medida que se le adiciona una solución de una base o un ácido fuerte. La forma de la curva de titulación
depende de los pKa de los grupos ionizables del aminoácido.

1
Procedimiento:
 Preparar la glicina 0,1 M.
 Una vez preparada la solución, tomar las mediciones de pH, teniendo como resultado un pH inicial
en 5,75 y, enseguida, efectuar la titulación con HCl concentrado hasta obtener un pH menor de 2.
Posteriormente, añadir NaOH 0,1 M hasta un pH cercano de 12. Cada vez que se añade 1 ml de la
base, anotar el pH de la glicina que marca el potenciómetro (Tabla 1).
Tabla 1
pH Medido por Cada mL de Solución Titulante
mL
mL mL adicionad ml
adiciona acumulad pH o de acumulado pH
do de o de titulante de titulante
titulante titulante (NaOH 0,1M (NaOH 0,1M)
(NaOH (NaOH )
0,1M) 0,1M)
1 0 1,72 1 26 8,81
1 1 1,74 1 27 8.95
1 2 1,76 1 28 9,05
1 3 1,81 1 29 9,16
1 4 1,86 1 30 9,26
1 5 1,92 1 31 9,35
1 6 1,98 1 32 9,41
1 7 2,05 1 33 9,49
1 8 2,11 1 34 9,59
1 9 2,17 1 35 9,67
1 10 2,24 1 36 9,71
1 11 2,32 1 37 9,74
1 12 2,39 1 38 9,82
1 13 2,46 1 39 9,91
1 14 2,54 1 40 10,0
1
1 15 2,63 1 41 10,1
1
1 16 2,71 1 42 10,2
3
1 17 2,86 1 43 10,3
7
1 18 2,95 1 44 10,5
3
1 19 3,08 1 45 10,7
2
1 20 3,25 1 46 10,9
1 21 3,54 1 47 11,0
5
1 22 4,17 1 48 11,1
8
1 23 7,73 1 49 11,2
9

2
 1 24 8,35 1 50 11,4
3
25 8,63
 Representar en una gráfica los valores obtenidos en la práctica (pH versus mL de NaOH)
correspondiente a la curva de titulación.
 En base a los datos obtenidos, determinar los pKa.

Materiales y equipos empleados en la práctica

Durante el desarrollo de la parte experimental de la práctica, es necesario utilizar los materiales y equipos
detallados en la Tabla 2. Los reactivos están listados en la Tabla 3.
Tabla 2
Materiales y Equipos
Equipos Material de vidrio Material adicional
Balanza analítica Matraz aforado de 100 ml Vidrio de reloj
Potenciómetro (pH
Bureta Espátula
metro)
Agitador magnético Pipetas Frasco lavador
probetas
Vaso de precipitado
Tabla 3
Reactivos
Reactivos Volumen
Agua destilada Matraz aforado de 100 ml

Prolina 20 mL – 0.1 M

Fenolftaleína 3 gotas
NaOH probetas
Actividades desarrolladas.
1. Realizar los cálculos correspondientes para preparar la solución de NaOH 0,1 M
Datos:
50 mL NaOH 40 𝑔 𝑁𝑎𝑂𝐻 0.1 𝑔 𝑁𝑎𝑂𝐻 1𝐿
𝑥 𝑥
0.1 X g NaOH 1 𝑚𝑜𝑙 1𝐿 1000 𝑚𝐿
= 𝟎. 𝟐 𝒈 𝑵𝒂𝑶𝑯
Determinación del pKa Cálculo del punto isoeléctrico de la prolina
[𝑏𝑎𝑠𝑒] 1.95 + 10.64
𝑝𝐾𝑎 = 𝑝𝐻 − 𝐿𝑜𝑔 pI =
[á𝑐𝑖𝑑𝑜 ] 2

[0.1 𝑀] 112.59
𝑝𝐾𝑎 = 11.43 − 𝐿𝑜𝑔 pI =
[0.1 𝑀] 2

𝑝𝐾𝑎 = 11.43 pI = 6,295

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Técnica operatoria o procedimiento.
Figura 1
Diagrama de Procedimiento

Preparar solución de
Seleccionar Preparar solución de
prolinas más agua
materiales NaOH.
destilada.

Titular hasta obervar

Medir el pH de las Colocar tres gotas
el viraje de la
soluciones. del indicador.
muestra.

Anotar los datos en

Lavar los materiales
el cuaderno de
de vidrio.
laboratorio.

Nota. Se logra media el pH con potenciómetro de manera cualitativa y con las tiras de pH de manera
cualitativa.
Resultados obtenidos.
Figura 2
Curva de Titulación de la Prolina hecha en R

Nota. La curva fue hecha en R con valores que siguen una distribución normal.
Autoridad: propia
Discusión de resultados.
La titulación de la prolina ofrece valiosa información sobre sus propiedades químicas y biológicas. La
identificación de los puntos de inflexión y el cálculo del punto isoeléctrico son esenciales para aplicaciones

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prácticas en biotecnología y ciencias de la vida. Con un pI de 6.30, la prolina tiene un comportamiento único
que refleja su importancia en estructuras proteicas y funciones celulares.
Conclusiones.
Se logró comprender y aplicar los conocimientos teóricos y prácticos impartidos en clase, además de uso,
funcionamiento y la calibración de los potenciómetros, además de lograr la determinación de pKa y el punto
isoeléctrico de la prolina. Y poder representar los datos obtenidos en un gráfico de fácil interpretación donde
se puede apreciar la curva de titulación de la prolina.
Recomendaciones.
 Bajar la concentración de NaOH para poder visualizar de manera más paulatina el proceso de viraje
de la muestra.
 Tener en cuenta la naturaleza del aa para poder determinar propiedades fisicoquímicas.
 Limpiar de manera correcta el potenciómetro antes de usarlos con otra solución para poder medir
su pH.
Bibliografía.
Abali, E. E., Cline, S. D., Franklin, D. S., & Viselli, S. M. (2022). LIR. Bioquimica (8a ed.). Ovid Technologies.
Apaza, R. M. C., Mendez Ancca, S., & Morales Carazas, J. A. (2023). Bioquímica. Editorial Academica
Espanola.
Bioquímica Estructural: Prácticas de laboratorio. (2021). Universidad Juárez Autónoma de Tabasco.
Ferrier, D. R. (2017). Lir. Bioquimica (7a ed.). Wolters Kluwer Health.
Gutiérrez Venegas, G., Becerril Román, J., del Mar, M., & Ortiz Sánchez, R. (2016). Prácticas de bioquímica.
Universidad Nacional Autónoma de México.
Prakash, B. S. (2020). Princípios da Bioquímica. Edicoes Nosso Conhecimento.