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UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL
INFORME DE LABORATORIO :
ELECTROFORESIS DE ADN (POLIQUETOS Y BACTERIAS)
ELABORADO POR:
ORIHUELA ALVA, VALERIA
CURSO:
BIOTECNOLOGÍA
DOCENTE:
SOTO GONZALES, HEBERT HERNAN
ILO – MOQUEGUA
2024
ÍNDICE
1
I. INTRODUCCIÓN 3
II. OBJETIVOS 4
2.1. OBJETIVO GENERAL 4
2.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS 4
III. MARCO TEÓRICO 4
3.1. Electroforesis 4
3.2. Gel 5
3.3. Movimiento de los fragmentos del ADN en el gel 6
IV. METODOLOGÍA 7
4.1. Materiales 7
4.2. Procedimiento 9
V. RESULTADOS 13
VI. CONCLUSIONES 14
VII. BIBLIOGRAFÍA 14
I. INTRODUCCIÓN
En la presente práctica de laboratorio aplicaremos lo que es la electroforesis en gel, que es

una técnica utilizada para separar fragmentos de ADN (u otras macromoléculas, como ARN y
proteínas) por su tamaño y carga. La electroforesis consiste en aplicar una corriente a través
de un gel que contiene las moléculas de interés. Con base en su tamaño y carga, las moléculas
se desplazan por el gel en diferentes direcciones o a distintas velocidades, con lo que se
separan unas de otras.
El ADN tiene una proporción constante de carga por masa en todas sus moléculas. Por esta
razón, la electroforesis en gel separa los fragmentos de ADN basándose únicamente en su
tamaño. Esta técnica nos permite identificar la cantidad de fragmentos distintos de ADN
presentes en una muestra y comparar sus tamaños relativos. Además, es posible determinar el
tamaño exacto de un fragmento de ADN al analizarlo junto a una escala estándar compuesta
por fragmentos de tamaños conocidos
El objetivo principal de esta práctica de laboratorio es separar y analizar fragmentos de ADN

mediante el uso de la electroforesis en gel de agarosa, donde se aprenderá a preparar geles de
agarosa, cargar muestras de ADN en los pocillos del gel, realizar la electroforesis y visualizar
los resultados utilizando un sistema de documentación.
II. OBJETIVOS
2.1. OBJETIVO GENERAL
● Desarrollar una comprensión básica de la teoría de la electroforesis y en

adquirir práctica con los procesos de separación de diversas moléculas a través
de la electroforesis horizontal sobre gel.
2.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS
● Preparar un gel de agarosa con la concentración adecuada.

● Cargar las muestras de ADN en los pocillos del gel de agarosa.
● Realizar la electroforesis de las muestras de ADN aplicando un campo
eléctrico.
● Analizar los patrones de bandas obtenidos para determinar el tamaño
aproximado de los fragmentos de ADN.
III. MARCO TEÓRICO
3.1. Electroforesis
La electroforesis es una técnica de laboratorio que se usa para separar moléculas de

ADN, ARN o proteínas en función de su tamaño y carga eléctrica. Se usa una
corriente eléctrica para mover las moléculas a través de un gel o de otra matriz. Los
poros del gel o la matriz actúan como un tamiz, lo cual permite que las moléculas más
pequeñas se muevan más rápido que las moléculas más grandes. Para determinar el
tamaño de las moléculas de una muestra, se usan estándares de tamaños conocidos
que se separan en el mismo gel y luego se comparan con la muestra.
3.2. Gel
Como su nombre lo indica, en la electroforesis en gel participa un gel: un bloque de

material similar a la gelatina. Los geles para separar ADN suelen estar hechos de un
polisacárido llamado agarosa, que se consigue como hojuelas secas pulverizadas.
Cuando la agarosa se calienta en una solución amortiguadora (agua mezclada con
algunas sales) y deja enfriar, se forma un gel sólido ligeramente blando. A nivel
molecular, el gel es una matriz de moléculas de agarosa que se mantienen unidas por
puentes de hidrógeno y que forman pequeños poros.
En un extremo, el gel tiene muescas en forma de ranuras llamadas pozos, que son
donde se colocarán las muestras de ADN:
Antes de agregar las muestras de ADN, el gel debe colocarse en una cámara. Uno de
los extremos de la cámara se conecta a un electrodo positivo y el otro extremo se
conecta a un electrodo negativo. El cuerpo principal de la cámara, donde se coloca el
gel, se llena con solución amortiguadora con sales que puede conducir la corriente.
Aunque tal vez no puedas verlo en la imagen superior (gracias a mis fabulosas
habilidades artísticas), la solución amortiguadora llena la cámara hasta un nivel en el
que apenas cubre el gel.
El extremo del gel que tiene los pozos se coloca hacia el electrodo negativo. El
extremo sin pozos (hacia donde migrarán los fragmentos de ADN) se coloca hacia el
electrodo positivo.
3.3. Movimiento de los fragmentos del ADN en el gel
las muestras de ADN se colocan en los pozos del gel junto con un marcador de peso
molecular, que contiene fragmentos de ADN de tamaños conocidos. Luego, se aplica
una corriente eléctrica al gel, lo que hace que las moléculas de ADN, debido a su
carga negativa, se desplacen hacia el polo positivo del gel. Este proceso se denomina
"correr el gel".
IV. METODOLOGÍA
4.1. Materiales
○ Equipo de electroforesis horizontal

○ Fuente de corriente continua
○ Micropipetas automáticas con puntas
○ Balanza
○ Microondas, placa de calentamiento o estufa
○ Propipeta
○ Matraces o vasos de precipitado de 250 ml
○ Guantes anticalor
○ Lentes protectoras y guantes de laboratorio desechables
○ Agua destilada o desionizada
tampón concentrado (50x)

Tris-Acetate-EDTA
Papel parafilm
polvo de agarosa
4.2. Procedimiento
- Diluimos el tampón concentrado (50x) en agua destilada para obtener

tampón 1x
-Cubrimos con el papel parafilm para mezclar bien
- Pesamos y mezclamos el polvo de agarosa con el tampón 1x en un

matraz de 250 ml
- Disolvemos el polvo de agarosa, poniendo la solución a hervir, para
ello calentamos la solución en el microondas durante 1 minuto a alta
temperatura, luego retiramos con cuidado el matraz del microondas y
mezclamos la solución agitando con cuidado el matraz.
- Continuamos calentando la solución por periodos de 15 minutos hasta
que la agarosa esté completamente disuelta (la solución debe tener un
color claro como el agua).
- Mientras la agarosa se enfría, cerramos el soporte por medio de los

tornillos de caucho de los sujetadores, situamos el molde (peine) en la
ranura central.
- Vertimos la solución de agarosa enfriada en el soporte. El gel debería
solidificarse al cabo de veinte minutos máximo. El gel se reafirma y
se vuelve menos transparente al solidificarse
- Procedemos a colocar el gel junto a nuestras muestras con ayuda de

una propipeta
- Depositamos las muestras (35 - 38 μL) en los pocillos en el orden
especificado
-Conectamos los enchufes con la fuente de corriente y realizamos la
electroforesis
- Una vez que haya completado la electroforesis, retiramos el gel y el

soporte de la cuba de electroforesis y visualizamos el gel de agarosa.
V. RESULTADOS
Como podemos apreciar en la imagen, en la parte superior del gel, se observan varios pozos
donde se cargaron las muestras de ADN.
Se aprecian varias bandas en diferentes carriles del gel. Cada banda representa un fragmento
de ADN que ha migrado a través del gel.
● Carril 1 (izquierda): Vemos que hay varias bandas finas y cercanas a la parte superior
del gel, indicando posiblemente fragmentos de ADN pequeños.
● Carril 2 y 3 (centro): En estos carriles se observan bandas más gruesas y difusas, lo
que podría indicar la presencia de fragmentos de ADN más grandes y/o una mayor
cantidad de ADN cargado.
● Carril 4 (derecha): Muestra varias bandas bien definidas a diferentes distancias de los
pozos, sugiriendo la presencia de múltiples fragmentos de ADN de distintos tamaños.
VI. CONCLUSIONES
● Los carriles con bandas más gruesas y cercanas a la parte superior podrían
indicar ADN de mayor tamaño o mayor cantidad. Los carriles con bandas
múltiples y bien definidas sugieren una mezcla de fragmentos de diferentes
tamaños.
● La presencia de bandas claras y definidas generalmente indica un buen
proceso de electroforesis, mientras que las bandas difusas pueden indicar
problemas como sobrecarga del pozo o impurezas en las muestras.
● Las bandas difusas y gruesas podrían indicar una mayor cantidad de ADN
cargado o posibles contaminaciones, lo que podría afectar la claridad y
precisión del análisis.
VII. BIBLIOGRAFÍA
Khan Academy. (2023). Khanacademy.org.
https://es.khanacademy.org/science/ap-biology/gene-expression-and-regulation/b
iotechnology/a/gel-electrophoresis
Electroforesis. (2024). Genome.gov.
https://www.genome.gov/es/genetics-glossary/Electroforesis#:~:text=Definici%
C3%B3n,gel%20o%20de%20otra%20matriz.

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En la presente práctica de laboratorio aplicaremos lo que es la electroforesis en gel, que es

El objetivo principal de esta práctica de laboratorio es separar y analizar fragmentos de ADN

2.1. OBJETIVO GENERAL

● Desarrollar una comprensión básica de la teoría de la electroforesis y en

2.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS

● Preparar un gel de agarosa con la concentración adecuada.

III. MARCO TEÓRICO

La electroforesis es una técnica de laboratorio que se usa para separar moléculas de

Como su nombre lo indica, en la electroforesis en gel participa un gel: un bloque de

3.3. Movimiento de los fragmentos del ADN en el gel

○ Equipo de electroforesis horizontal

tampón concentrado (50x)

- Diluimos el tampón concentrado (50x) en agua destilada para obtener

-Cubrimos con el papel parafilm para mezclar bien

- Pesamos y mezclamos el polvo de agarosa con el tampón 1x en un

- Mientras la agarosa se enfría, cerramos el soporte por medio de los

- Procedemos a colocar el gel junto a nuestras muestras con ayuda de

- Una vez que haya completado la electroforesis, retiramos el gel y el

Khan Academy. (2023). Khanacademy.org.

Electroforesis. (2024). Genome.gov.

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