T1. Introducción

T1: Introducción
Diferencias entre eucariotas y procariotas
Procariota Eucariota
Nucleo No Si
Diámetro Menos de 1picom Mayor a 10-100 picom
Orgánulos No Si
Cantidad de ADN de 10^6 a 5x10^6 1,5x10^7 hasta 5x10^9
Cromosomas Solo uno circular ADN lineal
Teoria endosimbionte
Lynn Margulis plantea la diferenciación de las células procariotas y
eucariotas partiendo de una célula originaria. Las células eucariotas
surgirían a partir de unas células procariotas primitivas, explicando así el
origen de las mitocondrias y cloroplastos:
Las mitocondrias provienen de bacterias aerobias ingeridas por células

eucariotas ancestrales que en vez de ser ingeridas del todo,
desarrollaron una relación de simbiosis con estas células.
Los cloroplastos privienen de la ingesta de una bacteria fotosintética

que desarrollo una simbiosis.
Teoría celular unificada
1. Todos los seres vivos están compuestos por una o más células (unidad
estructural).
2. Todas las funciones de un organismo dependen de las actividades

celulares (unidad funcional o fisiológica).
3. La célula contiene el material hereditario que se transmite de una

generación a la siguiente (unidad genética).
4. Toda célula procede de una célula anterior. Las células solamente

pueden originarse por la división de una célula existente (onmis cellula
e cellula).
T1: Introducción 1
Tipos de estudios
Estudios in vivo: con organismos completos unicelulares (Escherichia

coli, Saccacharomyces cerevisae) o pluricelulares (pez cebra, Mus
musculus), que suelen ser accesibles y sobre los que existe un
reglamento para evitar el maltrato animal.
Estudio in vitro: con células aisladas en cultivos. Se escoge la especie

más adecuada para el objetivo de la investigación, haciendo que solo
se obtenga una visión parcial.
Técticas para el estudio celular
Electroforensis
Consiste en la separación de elementos (moléculas de ADN, ARN o
proteínas) en base a su peso molecular, tamaño y carga eléctrica. Se
usa una corriente eléctrica para mover las moléculas a través de un gel
o matrices de polímeros con poros.
Fraccionamiento celular
Consiste en, tras la disgregación de la muestra, la separación y
reagrupación de partículas celulares (células u orgánulos) basándose
en sus propiedades biofísicas. Esta técnica permite aislar y estudiar
componentes celulares específicos.
Se realiza mediante centrifugación diferencial con una
ultracentrifugadora que supera las 100000rpm. En ella las moléculas (la
célula ha sido previamente triutrada) sedimentan tras realizar varias
centrifugaciones a distintas velocidades y tiempos, en función de su
T1: Introducción 2
densidad y tamaño. Todos los componentes se separan según su
coeficiente de sedimentación (no son sumarios).
Citometría de flujo
Consiste en recuento y clasificación de células según sus
características morfológicas. También sirve para identificar marcadores
tumorales en la superficie celular, el porcenaje de células vivas, etc.
Las células deben de estar en suspensión y pasar por un tubo que pasa
por un capilar muy fino. Así, las células van pasando una por una por un
detector con luz laser que incide en la muestra y modifica la luz.
Microscopía
Microscopía óptica:
T1: Introducción 3
El microscopio está compuesto por un sistema de lentes y utiliza luz
visible. Se utilizan técticas de fluorescencia y tinción para localizar
estructuras, proteinas o secuencias de ADN concretas. Distinguimos:
campo claro, campo oscuro, contraste de fases y fluorescencia.
Microscopía electrónica:
El microscopio utiliza radiación electrónica en vez de luz, consiguiendo

aumentos muchos miles de veces superiores a los del microscopio
ordinario.
De transmisión (MET)
Permite la observación de células en cortes muy finos preparados

con un ultramicrótomo que se depositan sobre rejillas de cobre para
observar la ultraestructura de la célula o tejido. Las secciones
deben de ser tratadas con metales pesados como osmonio o
plomo, que tienen una función similar a las tinciones.
Para preparar las muestras se utiliza la criofractura, una técnica que

consiste en la congelación de muestras biológicas con nitrógeno
líquido, seguido de un corte o fractura y del sombreado metálico o
recubrimiento con carbono de la superficie de la muestra.
Se emplea la transmisión/dispersión de los electrones para formar

imágenes, la difracción de los electrones para obtener información
acerca de la estructura cristalina y la emisión de rayos X
característicos para conocer la composición elemental de la
muestra.
Tomografía electrónica
Consiste en el análisis con resolución molecular tridimensional
de las interacciones entre proteínas en su estado nativo y
funcional
De barrido
Se emplea para estudiar superficies de objetos sólidos (elementos
completos), utilizando un haz de electrones enfocados con energía
baja como una sonda de electrones que se escanea de manera
regular sobre la muestra. Primero se debe de cubrir la muestra de
mentales que se adapten a su relieve. La acción del haz de
T1: Introducción 4
electrones estimula la emisión de electrones dispersados de alta
energía y electrones secundarios de baja energía de la superficie
de la muestra (rebote).
T1: Introducción 5

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Diferencias entre eucariotas y procariotas

Diámetro Menos de 1picom Mayor a 10-100 picom

Cantidad de ADN de 10^6 a 5x10^6 1,5x10^7 hasta 5x10^9

Cromosomas Solo uno circular ADN lineal

Las mitocondrias provienen de bacterias aerobias ingeridas por células

Los cloroplastos privienen de la ingesta de una bacteria fotosintética

Teoría celular unificada

2. Todas las funciones de un organismo dependen de las actividades

3. La célula contiene el material hereditario que se transmite de una

4. Toda célula procede de una célula anterior. Las células solamente

Estudios in vivo: con organismos completos unicelulares (Escherichia

Estudio in vitro: con células aisladas en cultivos. Se escoge la especie

Técticas para el estudio celular

El microscopio utiliza radiación electrónica en vez de luz, consiguiendo

Permite la observación de células en cortes muy finos preparados

Para preparar las muestras se utiliza la criofractura, una técnica que

Se emplea la transmisión/dispersión de los electrones para formar

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