LCB - UD Técnicas Análisis Cromosómico

MÓDULO: UNIDAD: LABORATORIO CLÍNICO Y
Biología molecular y citogenética Aplicación de técnicas de análisis cromosómico BIOMÉDICO
Técnico Superior en
Laboratorio Clínico y
Biomédico
MÓDULO: UNIDAD:
Biología molecular y Aplicación de técnicas
citogenética de análisis cromosómico
1
MÓDULO:
Biología molecular y
citogenética
UNIDAD:
Aplicación de técnicas
de análisis
cromosómico
© Hipatia Educación, S.L.

Madrid (España), 2023
2
ÍNDICE
1.
INTRODUCCIÓN 5
2.
OBJETIVOS 6
3.
LOS CROMOSOMAS 7
3.1. Estructura de los cromosomas 8
3.2. Tipos de cromosomas 9
3.3. Número de cromosomas 10
3.4. Alteraciones cromosómicas 12
3.4.1. Alteraciones numéricas 12
3.4.2. Alteraciones estructurales 14
3.4.3. Mosaicismo 15
4.
CITOGENÉTICA 16
4.1. Métodos de obtención de extensiones cromosómicas: cultivo y sacrificio celular 16
4.2. Métodos de tinción y bandeo cromosómico: patrones de identificación 18
4.2.1. Ideograma 19
4.3. Automatización del análisis citogénico 19
4.4. Nomenclatura citogenética 20
5.
CITOGENÉTICA Y DIAGNÓSTICO PRENATAL 24
5.1. Cariotipo de vellosidad coriónica 25
5.2. Cariotipo de líquido amniótico 26
6.
CITOGENÉTICA Y CÁNCER 27
7.
RESUMEN 29
8.
GLOSARIO 31
4
1. Introducción
Los cromosomas son estructuras celulares que contienen la información genética de un

organismo. Juegan un papel fundamental en la herencia y la transmisión de los rasgos
genéticos de una generación a otra.
Están compuestos por moléculas de ADN (ácido desoxirribonucleico) y proteínas aso-

ciadas. Cada especie tiene un número característico de cromosomas en sus células. Por
ejemplo, los humanos tienen 46 cromosomas en cada célula somática, mientras que
otras especies pueden tener un número diferente.
El papel principal de los cromosomas es organizar y mantener el ADN de manera com-

pacta y estructurada dentro del núcleo de la célula. El ADN contiene los genes, que son
secuencias específicas de nucleótidos responsables de la síntesis de proteínas y determi-
nan las características hereditarias de un organismo.
Durante la división celular, los cromosomas se duplican y se condensan para facilitar

su separación equitativa entre las células hijas. Esto ocurre en dos fases principales: la
replicación del ADN durante la interfase y la segregación de los cromosomas duplicados
durante la división celular (mitosis o meiosis).
Además de su función en la herencia y la división celular, también desempeñan un papel

importante en la regulación de la expresión génica. La estructura y la disposición de los
cromosomas en el núcleo celular pueden influir en qué genes están activos o silenciados,
lo que afecta a la función y el desarrollo de los tejidos y órganos.
Las alteraciones en la estructura o el número de cromosomas pueden dar lugar a anoma-

lías cromosómicas, que pueden causar trastornos genéticos y enfermedades. Por ejem-
plo, la trisomía del cromosoma 21 es responsable del síndrome de Down.
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2. Objetivos
Comprender los fundamentos de la estructura y función de los cro-

mosomas, incluyendo su importancia en la herencia y la variabilidad
genética.
Conocer las técnicas de preparación de muestras para el análisis

cromosómico, incluyendo la obtención de células y la obtención de
metafases cromosómicas.
Familiarizarse con las técnicas de tinción utilizadas en el análisis cro-

mosómico, como la tinción con bandas G, bandas Q, bandas R, ban-
das C y técnicas de hibridación in situ fluorescente (FISH).
Conocer las principales alteraciones cromosómicas y anomalías gené-

ticas detectadas mediante el análisis cromosómico, como las aberra-
ciones numéricas (trisomías, monosomías) y las aberraciones estruc-
turales (translocaciones, inversiones, deleciones, duplicaciones).
Entender la importancia del análisis cromosómico en el diagnóstico y

la investigación de enfermedades genéticas, trastornos del desarro-
llo y cáncer.
Conocer los protocolos de seguridad y buenas prácticas en el labo-

ratorio para realizar el análisis cromosómico, incluyendo el manejo
adecuado de las muestras, el uso de equipos de protección personal
y el manejo de sustancias químicas.
6
3. Los cromosomas
La cromatina es una estructura compuesta por ADN, proteínas y ARN que se en-
cuentra en el núcleo de las células eucariotas. Es el material genético que se organiza y
compacta dentro del núcleo celular. La cromatina es esencial para el almacenamiento, la
replicación y la transcripción de la información genética.
La principal función de la cromatina es empaquetar el ADN en un espacio limitado

dentro del núcleo, ya que el ADN es una molécula larga y se necesita almacenar una gran
cantidad de información genética en el núcleo celular. La cromatina permite que el ADN
se enrolle y se condense en una estructura más compacta, lo que facilita su organización
y protección.
Esta sustancia está compuesta por unidades básicas llamadas nucleosomas, que consis-
ten en segmentos de ADN enrollados alrededor de octámeros de proteínas llamadas his-
tonas. Estas histonas se organizan en forma de un núcleo octamérico, alrededor del cual
se enrolla el ADN. Esta estructura repetitiva de nucleosomas se llama “collar de cuentas”
y forma la fibra de cromatina.
La cromatina puede existir en diferentes estados de condensación. Durante la interfase

del ciclo celular, la cromatina se encuentra en un estado menos condensado conocido
como cromatina descondensada o eucromatina. En este estado, el ADN está accesible
para la maquinaria celular de replicación y transcripción, lo que permite la expresión de
los genes.
Durante la división celular, se condensa aún más en una estructura altamente compacta
conocida como cromosoma. Los cromosomas son visibles bajo un microscopio y contie-
nen dos copias idénticas de cada cromosoma después de la replicación del ADN. Esta
condensación adicional asegura que los cromosomas se separen de manera ordenada
durante la mitosis y la meiosis.
Los cromosomas son estructuras de cromatina condensada que se forman cuando la

célula va a dividirse. Están compuestos por ADN, histonas y otras proteínas no históni-
cas como las HMG (Hight Movility Group).
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Figura 1. Aspecto de los cromosomas en células del ápice de

la raíz de una cebolla: células que no se dividen (a), núcleos
preparados para la división (b) y células dividiéndose (c)
¿SABÍAS QUE…?: Existen dos tipos de cromatina: eucromatina y heterocromatina. La eucro-

matina es una forma de cromatina menos compactada que la heterocromatina. Contiene los
genes que se transcriben activamente. La heterocromatina puede ser constitutiva o facultativa.
La heterocromatina constitutiva es transcripcionalmente inactiva. La heterocromatina faculta-
tiva está constituida por eucromatina, que adquiere las características de la heterocromatina en
determinados estadios del desarrollo.
3.1. Estructura de los cromosomas

Los cromosomas constan de dos partes idénticas llamadas cromátidas, que se unen en
un punto denominado centrómero o constricción primaria (2). Los centrómeros están
formados por heterocromatina constitutiva y son pobres en genes. En el centrómero,
cada cromátida presenta una estructura proteica (cinetocoro), que sirve de punto de
anclaje a los microtúbulos del huso mitótico.
Además, las cromátidas pueden presentar otros estrechamientos, menos profundos que
el centrómero, llamados constricciones secundarias.
El centrómero divide a las cromátidas en dos partes que se denominan brazos. El brazo
más corto se llama p (3) y el largo q (4). Al extremo de cada uno de los brazos se le de-
nomina telómero (1).
Los telómeros son regiones de ADN no codificante, altamente repetitivas, cuya función
principal es la estabilidad estructural de los cromosomas en las células eucariotas, la división
celular y el tiempo de vida de las estirpes celulares. Son los extremos de las cromátidas.
8
Figura 2. Estructura del cro-

mosoma
¿SABÍAS QUE…?: Los telómeros se van acortando a medida que aumentan las divisiones celu-
lares. La enzima telomerasa es la polimerasa encargada del alargamiento de los telómeros. Esta
enzima está formada por una parte proteica y un ARN.
3.2. Tipos de cromosomas

Los cromosomas pueden clasificarse en función del conocido como índice centromérico
(Ic). El índice centromérico es un parámetro utilizado para evaluar la morfología de los
cromosomas y hace referencia a la relación entre la longitud del brazo corto (p) y el brazo
largo (q) de un cromosoma. Es una medida que se utiliza para caracterizar y clasificar los
cromosomas en función de su apariencia y estructura.
En un cromosoma metafásico, el centrómero es la constricción primaria que une los dos

brazos del cromosoma. El centrómero divide al cromosoma en dos regiones: el brazo p
(proximo) y el brazo q (distal). El índice centromérico se calcula dividiendo la longitud
del brazo p entre la longitud total del cromosoma y multiplicando el resultado por 100.
El índice centromérico se expresa generalmente como un porcentaje y puede variar des-

de valores cercanos a cero hasta valores cercanos a cien. Los cromosomas con un índice
centromérico cercano a cero tienen un brazo p muy corto en comparación con el brazo q,
mientras que aquellos con un índice centromérico cercano a cien tienen un brazo p muy
largo en comparación con el brazo q. Un índice centromérico de 50 indica que el brazo p
y el brazo q tienen aproximadamente la misma longitud.
• Metacéntricos: los dos brazos son aproximadamente iguales y el centrómero está en

el centro. Poseen un índice centromérico cercano a 50.
9
• Submetacéntricos: el centrómero está ligeramente desplazado hacia un lado dando

dos brazos algo desiguales. Su índice centromérico oscila entre 25 y 50.
• Acrocéntricos: el centrómero está más cerca de un extremo, dando dos brazos muy
desiguales. El índice centromérico es menor que 25.
• Telocéntricos: el centrómero está en un extremo, por lo que en realidad solo existe

un brazo. Su índice centromérico es cero.
Figura 3. Clases de cromosomas según la posición del centrómero
3.3. Número de cromosomas

Todos los seres vivos tienen un número fijo de cromosomas, que pueden estar organiza-
dos en una o varias series de cromosomas homólogos. En el caso de que solo tengan una
serie de cromosomas se denominan haploides (n); si tienen dos series de cromosomas
homólogos, diploides (2n), y si tienen varias, poliploides.
Figura 4. Serie de cromosomas homólogos
10
El número de cromosomas de una especie no tiene que ver con el tamaño de la especie
ni con otra característica conocida. Por ejemplo, el ser humano tiene 46 cromosomas, el
perro 78, el gato 38, la ballena azul 44 y el cangrejo ermitaño 254.
¿SABÍAS QUE…?: La especie con menor número de cromosomas son los machos de la hormiga
Myrmecia pilosula, que solo tienen un cromosoma, mientras que las hembras tienen dos. Por el
contrario, la especie con mayor número de cromosomas es un ser vivo unicelular, un protozoo
marino del grupo de los radiolarios, llamado Aulacantha scolymantha, que contiene en su núcleo
1600 cromosomas diferentes.
Figura 5. Myrmecia pilosula
Los seres humanos somos individuos diploides (2n). Todas las células somáticas tienen
46 cromosomas, organizados en 23 pares de cromosomas homólogos. De ellos, el par 23
es el formado por los cromosomas sexuales (X e Y): las mujeres presentan dos cromo-
somas X y los hombres un cromosoma X y otro Y. A los restantes cromosomas se les
denomina autosomas.
Figura 6. Cariotipo humano del sexo masculino
11
Además de los sexuales, los cromosomas humanos se clasifican en 7 grupos:
Grupo A: incluye los pares 1, 2 y 3. Son cromosomas grandes y metacéntricos o ligera-

mente submetacéntricos.
Grupo B: comprende a los pares 4 y 5. Son cromosomas grandes, claramente submeta-

céntricos.
Grupo C: formado por los pares 6-12. Son cromosomas de tamaño mediano, submeta-
céntricos.
Grupo D: incluye a los pares 13, 14 y 15. Son cromosomas medianos, acrocéntricos.
Grupo E: formado por los pares 16, 17 y 18. Son cromosomas pequeños metacéntricos o
submetacéntricos.
Grupo F: comprende los pares 19 y 20. Son cromosomas pequeños metacéntricos.
Grupo G: incluye a los pares 21 y 22. Son cromosomas pequeños acrocéntricos.
3.4. Alteraciones cromosómicas

Existen dos tipos de alteraciones cromosómicas:
• Alteraciones numéricas: como indica su nombre, consisten en una alteración en el

número de cromosomas del individuo.
• Altraciones estructurales: está modificada la estructura del cromosoma.
Además de estas anomalías, hablaremos del mosaicismo.
3.4.1. Alteraciones numéricas
• Nulisomías: falta una pareja de cromosomas homólogos. En el caso de los seres hu-
manos se representa como 2n-2.
• Monosomías: consisten en la pérdida de un cromosoma. Se representa como 2n-1.

Por ejemplo, en los seres humanos, la monosomía X0 provoca el síndrome de Turner.
12
Figura 7. Cariotipo de una persona con síndrome de

Turner
• Trisomías: consisten en la ganancia de un cromosoma, por lo que existen tres cromo-

somas homólogos. Se representan por 2n+1.
¿SABÍAS QUE…?: Las trisomías más conocidas son la trisomías 13 (síndrome de Patau), 18 (sín-
drome de Edwards), 21 (síndrome de Down) o del síndrome de Klinefelter (XXY).
Figura 8. Cariotipo de una persona con síndrome de

Klinefelter
• Tetrasomías: se caracterizan por la ganancia de dos cromosomas homólogos. Se

representan como 2n+2. Son muy poco habituales.
13
3.4.2. Alteraciones estructurales
En los cromosomas se pueden producir diversos tipos de alteraciones en la estructura:
• Translocación: consiste en el intercambio de material genético entre cromosomas

no homólogos.
• Duplicación: es la ganancia de un segmento cromosómico que se duplica.
• Inversión: ocurre cuando en un mismo cromosoma hay dos roturas y los segmentos
se vuelven a unir de manera invertida.
Figura 9. Transloca-
ción entre los cromo-
somas 9 y 11
• Inserción: un segmento cromosómico se inserta en otro cromosoma no homólogo en

su posición habitual o en su posición invertida.
• Deleción: es la pérdida de un segmento cromosómico, de manera que el individuo es

hemicigótico para la información genética de ese segmento.
• Cromosoma en anillo: se produce una doble deleción terminal, por lo que se pierden los
telómeros. Además se une los extremos provocando la circularización del cromosoma.
14
Figura 10. Cariotipo con un cromosoma (r) en anillo, entre otras altera-
ciones
• Isocromosoma: se trata de un cromosoma que tiene dos brazos iguales, colocados en

posiciones invertidas con respecto al centrómero.
Figura 11. Isocromosoma
3.4.3. Mosaicismo
El mosaicismo se define como la presencia de dos o más líneas celulares distintas en un

mismo individuo. Es decir, no todas las células de un individuo tienen la misma dotación
genética. El mosaicismo puede ser numérico o estructural.
El mosaicismo se puede producir por una no disyunción mitótica en las divisiones tem-
pranas del cigoto. Así, se produce un mosaicismo constitucional, que puede tener o no
repercusiones clínicas. También es común el mosaicismo en el caso del cáncer, ya que los
tejidos tumorales suelen presentar distintas líneas celulares patológicas.
¿SABÍAS QUE…?: Llamamos porcentaje de mosaicismo al porcentaje de células que presentan

la alteración cromosómica. Así, un porcentaje de mosaicismo del 5% significa que el 5% de las
células tienen la alteración y el 95% son normales.
15
4. Citogenética
La citogenética es la parte de la genética que estudia los cromosomas. Se denomina

citogenética constitucional al análisis de los cromosomas en células que representan a la
línea germinal del individuo, como los linfocitos de sangre periférica. Es decir, estudia los
cromosomas tal y como han sido heredados.
El cariotipo es el estudio del juego completo de los cromosomas de un individuo, or-

denándolos en función de su tamaño, forma y número. La citogenética clásica se basa
en el estudio del cariotipo mediante técnicas de bandeo cromosómico. En la actualidad
también se emplean técnicas de citogenética molecular, como el FISH o el CGH-array.
4.1. Métodos de obtención de extensiones cromosómicas: cultivo y

sacrificio celular
Con el fin de realizar un cariotipo se estudian los cromosomas de una célula en metafase
o prometafase. Para ello, hemos de cultivar las células. Generalmente se parte de linfoci-
tos de sangre periférica, aunque pueden utilizarse otras células que contengan núcleo.
Figura 12. Toma de una muestra de sangre periférica
16
El protocolo consta de los siguientes pasos:
1. Siembra de las células: se necesita una muestra de sangre heparinizada. Se añade la

sangre a un frasco de cultivo en una proporción 1:5-1:10 con el medio de cultivo (ge-
neralmente RPMI1640 o DMEM o HAM F10). El medio de cultivo ha de estar suple-
mentado con suero de ternera fetal, glutamina y antibióticos.
2. Inducción de su división: con mitógenos como la fitohe-maglutinina. Esta lectina

de origen vegetal se une a los linfocitos y provoca su desdiferenciación a linfoblastos,
que comienzan a dividirse y proliferar.
3. Incubación: durante 72h a 37ºC, en un incubador.
4. Detención de la mitosis en metafase: se añade colchicina y se incuba durante una

hora a 37ºC.
5. Recogida de las células: se recogen las células del frasco de cultivo y se pasan a un
tubo tipo Falcon. Se centrifugan para precipitar las células. Se retira el sobrenadante.
6. Rotura de las células: se rompen las membranas celulares con una solución hipotó-
nica (cloruro potásico 0,6%). Se incuban 5-20 minutos (varía según el protocolo) a
37ºC (en otros protocolos es a temperatura ambiente). A continuación, se centrifugan
las células y se elimina el sobrenadante.
7. Fijación de metafases: se añade al pellet celular la solución de Carnoy (metanol:

ácido acético glacial 3:1). Se incuba a temperatura ambiente 5 minutos y se vuelve a
centrifugar.
8. Extensión: primero se lavan los restos celulares. Después, se realiza la extensión en

un portaobjetos. Con una pipeta Pasteur se dejan caer 1-2 gotas de la suspensión
celular en un portaobjetos desde una altura aproximada de 30 cm. Al chocar con la
superficie del portaobjetos, los cromosomas se dispersan por el cristal, permitiendo
que se puedan observar separados.
9. Tinción: con solución de Giemsa.
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4.2. Métodos de tinción y bandeo cromosómico: patrones de

identificación
Para identificar los cromosomas se pueden realizar técnicas de bandeo cromosómico.
Permite distinguir unos cromosomas de otros mediante tinciones, que darán lugar a
bandas transversales más oscuras y claras a lo largo de cada cromosoma, que se corres-
ponden a los diferentes tipos de cromatina (eucromatina y heterocromatina).
Existen muchos tipos de bandeo para observar los cromosomas:
• Bandeo G: es la tinción más empleada. En este tipo de bandeo, se emplean prepa-

raciones de extensiones cromosómicas envejecidas. El envejecimiento se consigue
incubando las preparaciones un par de días en una estufa a 65ºC o a 37ºC durante
3-4 días.
Los cromosomas se tratan con tripsina para digerir las proteínas cromosómicas y
después se tiñen con la tinción de Giemsa, de ahí su nombre. Cada pareja de cromo-
somas homólogos presenta un patrón característico de bandas claras y oscuras. Con
esta tinción, las zonas ricas en pares de bases A-T dan lugar a las bandas G (más oscu-
ras). Se corresponden con zonas de heterocromatina, que están más compactadas. En
el cariotipo humano hay unas 850 bandas G, aunque con las técnicas estándar solo se
distinquen unas 400. Las regiones ricas en pares de bases G-C quedan más claras. Se
corresponden con regiones de eucromatina, menos compactadas y compuestas, en
general, por genes que se expresan activamente.
• Bandeo R: tiñe las regiones ricas en C-G, a las que se denominó bandas R o reverse,
dando un patrón reverso al bandeo G. Se puede realizar incubando las preparaciones
con tampón de Sorensen a 80ºC y luego tiñiendo con Giemsa.
Otro protocolo para observar las bandas R es la tinción con naranja de acridina.
• Bandeo Q: fue la primera técnica en utilizarse. Emplea quinacrina, un colorante

fluorescente, que se une a regiones ricas en A-T, dando lugar a bandas fluorescente
brillantes (bandas Q).
• Bandeo C: también conocido como bandeo de bandas constitutivas, es una técni-

ca de tinción utilizada en citogenética para revelar y visualizar las regiones ricas en
heterocromatina de los cromosomas. Produce un patrón característico de bandas
oscuras y claras en los cromosomas, lo que permite identificar y distinguir diferentes
regiones cromosómicas. Las regiones ricas en heterocromatina se tiñen de forma
18
más intensa y aparecen como bandas oscuras en contraste con las regiones menos
condensadas que se tiñen de forma más clara.
El último paso del bandeo cromosómico consiste en observar por lo menos 20 placas
metafásicas y formar un cariotipo, donde se colocan los cromosomas por grupos según el
tamaño y la localización del centrómero. Tradicionalmente se realizaba una fotografía y
se colocaban “a mano”, pero actualmente se emplean programas de análisis de imagen.
4.2.1. Ideograma
Un ideograma es una representación esquemática de un cromosoma o del cariotipo,

teñido con una técnica de bandeo cromosómico, habitualmente el bandeo G. Especifica
todas las características de cada cromosoma: posición del centrómero, tamaño de los
brazos y el patrón de bandas específico.
Figura 13. Ideograma del cariotipo humano
4.3. Automatización del análisis citogénico

En la actualidad existen equipos automáticos, llamados
cariotipadores, capaces de realizar un cariotipo. Son pla-
taformas en las que se colocan las preparaciones teñidas y
que capturan las imágenes gracias a una cámara. Además,
el software les permite clasificar los cromosomas según su
morfología y patrón de bandas, realizar el cariotipo e iden-
tificar o señalar la presencia de alteraciones cromosómicas. Figura 14. Cariotipador
19
4.4. Nomenclatura citogenética

Los cromosomas humanos están numerados del 1 al 22, más los cromosomas sexuales
(XX o XY). Además, tanto el brazo corto como el largo de cada cromosoma están, a su
vez, divididos en regiones, que se numeran, en función del número de bandas de cada
cromosoma, desde el centrómero hasta el telómero. Esto permite utilizar una nomencla-
tura común, consensuada y publicada en el ISCN (International System for Human Cyto-
genetic Nomenclature), que permite localizar los genes en los cromosomas y describir sus
alteraciones.
Para citar una banda G concreta se nombra: cromosoma-brazo-región-banda.subban-

da-subsubbanda. Por ejemplo, la banda 3p22.1 se refiere a la primera sub-banda de la
segunda banda G de la región 2 del brazo corto del cromosoma 3.
Figura 15. Portada de la edi-

ción 2016 de ISCN
Ejemplo 1
3q27.31 se refiere a una ubicación en el brazo largo del cromosoma 3, específicamente en la
subsubbanda 1 de la subbanda 3 de la banda 7 en la región 2.
Alternativamente, podemos decir que es la subbanda 31 de la banda 27.
20
Figura 16.
Ideograma del
cromosoma 3
La fórmula cromosómica consiste en la descripción detallada del cariotipo de un indivi-

duo. En primer lugar se expresa el número de cromosomas, seguido de la fórmula sexual
(XX o XY).
• 46,XX: cariotipo normal de mujer
• 46,XY: cariotipo normal de hombre
Si en el cariotipo existen alteraciones, a continuación, se describen. Las alteraciones cro-

mosómicas numéricas se describen añadiendo los signos “+” o “-“, seguido del número
de cromosoma afectado.
• 45,X: monosomía X
• 47,XYY: disomía del cromosoma Y
• 47,XX,+21: mujer con trisomía del cromosoma 21
Para las alteraciones cromosómicas estructurales se añade una abre-viatura que identifi-
ca el tipo de alteración, el número del cromosoma, el brazo afectado y el punto de rotura.
21
Las abreviaturas más empleadas son:
• Del: deleción. Ejemplo: 46,XX,del(5)(p14) se corresponde con una mujer que tiene
una deleción en la banda 14 del brazo corto del cromosoma 5. Esta deleción provoca
el Síndrome de maullido de gato o Cri-du-chat.
• Dup: duplicación. Ejemplo: 46,XX,dup(17)(p12) se corresponde con una mujer con

una duplicación de la banda p12 del cromosoma 17. Provoca la enfermedad de Char-
cot-Marie-Tooth.
• I: isocromosoma
• Ins: inserción. Ejemplo: 46,XX,ins(5,3)(q2;p10p12) se corresponde con una mujer

con una inserción en la banda 2 del brazo largo del cromosoma 5, del fragmento del
cromosoma 3 correspondiente a las bandas p10 hasta p12.
• Inv: inversión. Ejemplo: 46,XX,inv(1)(p1p3) se corresponde con una mujer con una
inversión en el cromosoma 1, con puntos de rotura y unión en las bandas p1 y p3.
• Mos: mosaicismo.
• Pat: origen paterno.
• Mat: origen materno.
• R: cromosoma en anillo.
Ejemplo 2
6,XX,t(9;22)(q34;q11) se trata de una mujer con una translocación entre la banda q34 de
cromosoma 9 y la banda q11 del cromosoma 22. Es el llamado cromosoma Filadelfia, típico
de la leucemia mieloide crónica.
• Rec: cromosoma recombinante.
• T: translocación.
22
Figura 16. Traslocación t(9;22)(q34;q11)
Ejemplo 3
La fórmula cromosómica 47,XY,+21,dup(7)(p23q21q12) indica una alteración cromosómica
en la que se presentan tres copias del cromosoma 21 (trisomía del cromosoma 21), junto con
una duplicación en el brazo largo (q) del cromosoma 7 en las regiones p23, q21 y q12.
23
5. Citogenética y diagnóstico
prenatal
El diagnóstico prenatal engloba un conjunto de pruebas para la detección de anomalías

congénitas fetales. Durante el primer trimestre de embarazo se realiza a las gestantes de
alto riesgo. Se consideran embarazadas de alto riesgo aquellas que presenten alguna o
varias de las siguientes características o circunstancias:
• Antecedentes familiares o hijo anterior con anomalías cromosómicas u otros defec-

tos congénitos.
• Madre o padre portadores de alguna anomalía cromosómica.
• Padecer alguna enfermedad ligada al cromosoma X, alguna enfermedad crónica como

la diabetes o determinados trastornos endocrinos.
• Ingestión de medicamentos contraindicados durante el embarazo.
• Exposición a radiaciones o productos tóxicos.
• Ciertas infecciones durante la gestación.
• Gestación gemelar.
• Obesidad materna.
• Edad materna avanzada.
• Gestación tras técnica de reproducción asistida.
En el diagnóstico prenatal se emplean técnicas de citogenética, aunque dependiendo de

la semana de embarazo son distintas.
24
5.1. Cariotipo de vellosidad coriónica

El corión es una envoltura externa del embrión que colabora en la formación de la
placenta. Presenta numerosas proyecciones llamadas vellosidades coriónicas. El corión
tiene la misma dotación genética que el embrión.
Figura 17. Vellosidades coriónicas
El cariotipo de vellosidad coriónica es una prueba invasiva de diagnóstico prenatal que se

realiza entre las semanas 8 y 14 de gestación. El protocolo de realización es el siguiente:
• Biopsia: para tomar una muestra de las vellosidades coriónicas, el médico ha de ac-
ceder a las mismas por vía transcervical o por vía transabdominal. En el procedimien-
to transcervical, el médico introduce un catéter por el útero hasta las vellosidades
coriónicas. Después, toma una muestra de estas. En el procedimiento transabdomi-
nal, el médico introduce una aguja a través del abdomen y el útero hasta las vellosi-
dades coriónicas para coger una muestra. En ambos casos, el proceso se monitoriza
mediante ecografía. Las muestras se recogen en un tubo estéril con medio de cultivo
(generalmente, RPMI 1640) y antibióticos.
• Preparación de la muestra: se coloca la muestra en una placa Petri y se lava con

suero o PBS. A continuación, se eliminan todos los posibles restos de tejidos de ori-
gen materno.
• Cultivo: se pueden realizar dos métodos, el cultivo corto (con el que se obtienen
resultados en 24-48h) y el cultivo largo (que tarda 8-10 días).
25
• Cultivo corto: se cultivan las vellosidades en una placa de cultivo durante 24-48h
a 37ºC, dentro de un incubador. Al cabo de ese tiempo, se añade un antimitótico
(como colchicina o colcemid) que detiene las mitosis en metafase. Después se rom-
pen las células por choque hipotónico y se fijan. Después se disgrega el tejido con
ácido acético y agitación mecánica. Por último, se coloca una gota de la suspensión
celular en un portaobjetos y se tiñe (generalmente con tinción de Giemsa).
• Cultivo largo: de los fibroblastos presentes en la vellosidad coriónica. Primero hay

que disgregar el tejido tratándolo con enzimas como colagenasa. Después se coloca
la sus-pensión en un frasco de cultivo con medio. Se incuban durante 8-10 días. Se
continúa con el procedimiento como acabamos de describir en el apartado anterior.
5.2. Cariotipo de líquido amniótico

Entre las semanas 16 a 18 de gestación se puede realizar el diagnóstico prenatal median-
te un cariotipo de líquido amniótico, que analiza las células fetales presentes en dicho
líquido. El procedimiento es el siguiente:
• Amniocentesis: mediante punción transabdominal se toma una muestra de líquido

amniótico con una aguja. Es necesario controlar ecográficamente la operación para
evitar dañar al feto.
• Preparación de la muestra: se centrifuga el líquido amniótico. Se elimina el sobrena-

dante. Se resuspenden las células en medio de cultivo.
• Cultivo: se siembran las células en un

frasco o placa de cultivo. Se incuban du-
rante 8-10 días a 37ºC en un incubador.
Se continúa con el procedimiento descri-
to en el apartado “cariotipo de vellosida-
des coriónicas”.
Figura 18. Amniocentesis
26
6. Citogenética y cáncer
Las células tumorales se caracterizan por presentar alteraciones en su dotación genética

que les permiten proliferan de forma no controlada. Estas alteraciones pueden ser mu-
taciones genéticas o cromosómicas (alteraciones), tanto numéricas como estructurales.
Generalmente afectan a los oncogenes y a los genes supresores de tumores. Las muta-
ciones suelen aparecer en las células cancerosas, pero no en las células no tumorales del
individuo.
¿SABÍAS QUE…?: Llamamos porcentaje de mosaicismo al porcentaje de células que presentan

la alteración cromosómica. Así, un porcentaje de mosaicismo del 5% significa que el 5% de las
células tienen la alteración y el 95% son normales.
Las técnicas citogenéticas se emplean para el diagnóstico y pronóstico del cáncer, ya que
permiten la detección de las mutaciones cromosómicas presentes en las células tumora-
les. En la actualidad el principal campo de actuación es el de oncohematología, aunque
también se realizan cariotipos de tumores sólidos. Parece que, en líneas generales, en las
leucemias y linfomas son frecuentes las translocaciones, mientras que en los carcinomas
lo son las deleciones.
Como ejemplos de las mutaciones detectadas por técnicas citogenéticas que se usan en
el diagnóstico y pronóstico del cáncer podemos citar:
Leucemia mieloide crónica (LMC): en 1960 Peter Nowell y David Hungerford describie-
ron, por primera vez, una alteración citogenética asociada a una hemopatía maligna: el
cromosoma Filadelfia. Esta alteración está presente en el 95% de los pacientes.
27
Figura 19. Muestra de sangre de un paciente con LMC
• Leucemia aguda: en muchos casos de leucemias agudas, tanto linfoblásticas como

mieloblásticas, se producen aneuploidías en las células de la médula ósea
• Linfoma de Burkitt: se caracteriza por una translocación entre los cromosomas 8 y

otros cromosomas como el 14, el 12 o el 11. La translocación más común es la t(8;14)
(q24;q32), aunque existen otras como t(2;8)(p12;q24) y t(8;22)(q24;q11).
• Síndromes mielodisplásicos (SMD): son un conjunto de síndromes que tienen en

común una alteración de la proliferación y diferenciación de las células progenitoras
hematopoyéticas. Algunos de estos SMD presentan una deleción del brazo largo del
cromosoma 5 (síndrome 5q-). Las personas con esta deleción responden bien al trata-
miento con lenalidomida.
• Retinoblastoma: se desencadena por una deleción en el brazo largo del cromosoma

13 (13q14), que afecta al gen supresor de tumores RB1.
• Meningioma: en muchos casos de este tipo de tumor craneal usualmente benigno se

encuentran deleciones o pérdidas del cromosoma 22.
Figura 20. Meningioma
28
7. Resumen
Los cromosomas son estructuras de cromatina condensada que se forman cuando la

célula va a dividirse. Están compuestos por ADN y proteínas. Las partes más importantes
de los cromosomas son las cromátidas, el centrómero y los telómeros. Según la posición
del centrómero, los cromosomas se clasifican en metacéntricos, submetacéntricos, acro-
céntricos y telocéntricos.
Los seres humanos somos individuos diploides (2n), ya que todas las células somáticas
tienen 46 cromosomas, organizados en 23 pares de cromosomas homólogos. De ellos,
el par 23 es el formado por los cromosomas sexuales (X e Y): las mujeres presentan dos
cromosomas X y los hombres un cromosoma X y otro Y. A los restantes cromosomas se
les denomina autosomas y se clasifican en 7 grupos distintos.
Existen dos tipos de anomalías cromosómicas: las anomalías numéricas o aneuploidías,

que consisten en una alteración en el número de cromosomas del individuo y las anoma-
lías estructurales, en las que está modificada la estructura del cromosoma.
La citogenética es la parte de la genética que estudia los cromosomas. Se denomina

citogenética constitucional al análisis de los cromosomas en células que representan a la
línea germinal del individuo, como los linfocitos de sangre periférica. El cariotipo es el es-
tudio del juego completo de los cromosomas de un individuo, ordenándolos en función
de su tamaño, forma y número.
La citogenética clásica se basa en el estudio del cariotipo mediante técnicas de bandeo

cromosómico. Primero es necesario realizar un cultivo de células nucleadas, generalmen-
te linfocitos, hacer una extensión y, finalmente, teñir los cromosomas. Existen distintos
tipos de bandeo cromosómico, como el bandeo G, el bandeo R o el bandeo Q.
Un ideograma es una representación esquemática de un cromosoma o del cariotipo,

teñido con una técnica de bandeo cromosómico, habitualmente el bandeo G. Especifica
todas las características de cada cromosoma: posición del centrómero, tamaño de los
brazos y el patrón de bandas.
29
El ISCN publica la nomenclatura citogenética, que permite localizar los genes en los cro-
mosomas y describir las alteraciones de estos. Para citar una banda G concreta se nom-
bra: cromosoma-brazo-región-banda(punto)sub-banda.
Tanto en el diagnóstico prenatal como en el del cáncer se emplean técnicas citogenéticas

para detectar mutaciones y alteraciones cromosómicas.
30
8. Glosario
• Aneuploidía: alteración del número de cromosomas que presenta un individuo.
• Cariotipo: juego completo de los cromosomas de un individuo.
• Centrómero: constricción del cromosoma al que se une el huso mitótico, que divide
al cromosoma en dos brazos.
• Fórmula cromosómica: descripción detallada del cariotipo de un individuo.
• Ideograma: representación esquemática de un cromosomas o del cariotipo teñido

con una técnica de bandeo cromosómico, generalmente de bandeo G.
• Mosaicismo: presencia de dos o más líneas celulares distintas en un mismo individuo.
• Telómero: extremo de un cromosoma.
31

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MÓDULO: UNIDAD: LABORATORIO CLÍNICO Y

Biología molecular y citogenética Aplicación de técnicas de análisis cromosómico BIOMÉDICO

© Hipatia Educación, S.L.

5.2. Cariotipo de líquido amniótico 26

Los cromosomas son estructuras celulares que contienen la información genética de un

Están compuestos por moléculas de ADN (ácido desoxirribonucleico) y proteínas aso-

El papel principal de los cromosomas es organizar y mantener el ADN de manera com-

Durante la división celular, los cromosomas se duplican y se condensan para facilitar

Además de su función en la herencia y la división celular, también desempeñan un papel

Las alteraciones en la estructura o el número de cromosomas pueden dar lugar a anoma-

Comprender los fundamentos de la estructura y función de los cro-

Conocer las técnicas de preparación de muestras para el análisis

Familiarizarse con las técnicas de tinción utilizadas en el análisis cro-

Conocer las principales alteraciones cromosómicas y anomalías gené-

Entender la importancia del análisis cromosómico en el diagnóstico y

Conocer los protocolos de seguridad y buenas prácticas en el labo-

La principal función de la cromatina es empaquetar el ADN en un espacio limitado

La cromatina puede existir en diferentes estados de condensación. Durante la interfase

Los cromosomas son estructuras de cromatina condensada que se forman cuando la

Figura 1. Aspecto de los cromosomas en células del ápice de

¿SABÍAS QUE…?: Existen dos tipos de cromatina: eucromatina y heterocromatina. La eucro-

3.1. Estructura de los cromosomas

Figura 2. Estructura del cro-

3.2. Tipos de cromosomas

En un cromosoma metafásico, el centrómero es la constricción primaria que une los dos

El índice centromérico se expresa generalmente como un porcentaje y puede variar des-

• Metacéntricos: los dos brazos son aproximadamente iguales y el centrómero está en

• Submetacéntricos: el centrómero está ligeramente desplazado hacia un lado dando

• Telocéntricos: el centrómero está en un extremo, por lo que en realidad solo existe

Figura 3. Clases de cromosomas según la posición del centrómero

3.3. Número de cromosomas

Figura 4. Serie de cromosomas homólogos

Figura 5. Myrmecia pilosula

Figura 6. Cariotipo humano del sexo masculino

Además de los sexuales, los cromosomas humanos se clasifican en 7 grupos:

Grupo A: incluye los pares 1, 2 y 3. Son cromosomas grandes y metacéntricos o ligera-

Grupo B: comprende a los pares 4 y 5. Son cromosomas grandes, claramente submeta-

Grupo F: comprende los pares 19 y 20. Son cromosomas pequeños metacéntricos.

Grupo G: incluye a los pares 21 y 22. Son cromosomas pequeños acrocéntricos.

3.4. Alteraciones cromosómicas

• Alteraciones numéricas: como indica su nombre, consisten en una alteración en el

• Altraciones estructurales: está modificada la estructura del cromosoma.

Además de estas anomalías, hablaremos del mosaicismo.

3.4.1. Alteraciones numéricas

• Monosomías: consisten en la pérdida de un cromosoma. Se representa como 2n-1.

Figura 7. Cariotipo de una persona con síndrome de

• Trisomías: consisten en la ganancia de un cromosoma, por lo que existen tres cromo-

Figura 8. Cariotipo de una persona con síndrome de

• Tetrasomías: se caracterizan por la ganancia de dos cromosomas homólogos. Se

3.4.2. Alteraciones estructurales

En los cromosomas se pueden producir diversos tipos de alteraciones en la estructura:

• Translocación: consiste en el intercambio de material genético entre cromosomas

• Duplicación: es la ganancia de un segmento cromosómico que se duplica.

• Inserción: un segmento cromosómico se inserta en otro cromosoma no homólogo en

• Deleción: es la pérdida de un segmento cromosómico, de manera que el individuo es

• Isocromosoma: se trata de un cromosoma que tiene dos brazos iguales, colocados en

Figura 11. Isocromosoma

El mosaicismo se define como la presencia de dos o más líneas celulares distintas en un

¿SABÍAS QUE…?: Llamamos porcentaje de mosaicismo al porcentaje de células que presentan