El test de Ames es una prueba in vitro que utiliza cepas de Salmonella typhimurium para evaluar el potencial mutagénico y carcinogénico de sustancias químicas. Las cepas tienen mutaciones que las hacen incapaces de sintetizar histidina y son sensibles a daños en el ADN causados por mutágenos. Una sustancia se considera positiva si causa al menos el doble de mutaciones que el control negativo. Aunque es una prueba sencilla, solo evalúa la mutagenicidad y no replica completamente el metabolismo humano
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El test de Ames es una prueba in vitro que utiliza cepas de Salmonella typhimurium para evaluar el potencial mutagénico y carcinogénico de sustancias químicas. Las cepas tienen mutaciones que las hacen incapaces de sintetizar histidina y son sensibles a daños en el ADN causados por mutágenos. Una sustancia se considera positiva si causa al menos el doble de mutaciones que el control negativo. Aunque es una prueba sencilla, solo evalúa la mutagenicidad y no replica completamente el metabolismo humano
El test de Ames es una prueba in vitro que utiliza cepas de Salmonella typhimurium para evaluar el potencial mutagénico y carcinogénico de sustancias químicas. Las cepas tienen mutaciones que las hacen incapaces de sintetizar histidina y son sensibles a daños en el ADN causados por mutágenos. Una sustancia se considera positiva si causa al menos el doble de mutaciones que el control negativo. Aunque es una prueba sencilla, solo evalúa la mutagenicidad y no replica completamente el metabolismo humano
El test de Ames es una prueba in vitro que utiliza cepas de Salmonella typhimurium para evaluar el potencial mutagénico y carcinogénico de sustancias químicas. Las cepas tienen mutaciones que las hacen incapaces de sintetizar histidina y son sensibles a daños en el ADN causados por mutágenos. Una sustancia se considera positiva si causa al menos el doble de mutaciones que el control negativo. Aunque es una prueba sencilla, solo evalúa la mutagenicidad y no replica completamente el metabolismo humano
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TEST
DE AMES
HEREDIA MAGALI TINELLI ALDANA
El test de Ames es una prueba in vitro que permite evaluar el potencial efecto mutagénico de compuestos químicos o productos biológicos como una medida indirecta del posible efecto carcinogénico sobre seres humanos. Esta prueba utiliza varias cepas de Salmonella typhimurium auxótrofas para el aminoácido histidina, que poseen distintas mutaciones en genes del operón histidina. Esas mutaciones son el blanco para mutágenos que producen daño al ADN por diferentes mecanismos. Se utilizan las siguientes cepas de Salmonella typhimurium: • TA 97ª • TA 98 • TA 100 • TA 102 • TA 1535 • TA1538
Las mismas deberán ser provistas por un centro de referencia que
certifique su autenticidad. Éstas se conservarán congeladas a -80 °C (en freezer) o en nitrógeno líquido. Características de las cepas:
• Defecto en la cubierta de lipopolisacarido, normalmente protege a las
bacterias de las sustancias químicas del ambiente • El sistema de reparación del ADN ha sido inactivado , aumentando su susceptibilidad a los mutágenos • Una de las cepas detecta sustitución de un par de bases y las otras tres corrimiento de marco de lectura • Cada cepa lleva la mutación que la hace incapaz de sintetizar el aminoácido histidina (his-) Evaluacion de los resultados:
Los datos se evalúan según los siguientes criterios:
Una muestra se considera Positiva (mutagénica) si el número promedio de revertantes, con cualquiera de las cepas y en cualquiera de las concentraciones probadas, es al menos dos veces mayor que el número de revertantes detectadas en el control negativo y se observa un incremento relacionado con la concentración en las revertantes por placa con la misma cepa. Una muestra se considera Negativa (no mutagénica) si no hay ninguna concentración en la que se produce un número promedio de revertantes por placa superior, por lo menos en dos veces al número de revertantes detectadas en el control negativo y no muestra un incremento de revertantes relacionado con la concentración. Deben realizarse dos ensayos independientes con cada muestra. Ventajas del uso del test :
Es una prueba sencilla y rápida para detectar si una sustancia es
mutagénica. Es un test para la identificación rápida de la producción de cáncer por sustancias. Existe una similitud entre las lesiones que se producen en el ADN de la bacteria y en las células humanas Gran amplificación biológica. Limitaciones :
Salmonella typhimurium es una célula procariota, por lo tanto no es un
modelo perfecto para los seres humanos. Hígado de rata Fracción S9 se utiliza para imitar las condiciones metabólicas mamíferas por lo que puede evaluarse el potencial mutagénico de metabolitos, sin embargo hay diferencias en el metabolismo y la mutagenicidad de los productos químicos entre humano y rata. La prueba por lo tanto, puede mejorarse mediante el uso de fracción de S9 de hígado humano; su uso fue limitado anteriormente por su disponibilidad, pero es ahora disponible comercialmente y por lo tanto puede ser más factible.