La Transcription

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Régulation de l’expression

génétique: la transcription
Introduction
 Les fonctions et les caractéristiques de chaque type cellulaire
sont déterminées par les protéines qui les composent.
Questions qui se posent:
Qui choisit les types de protéines exprimées par les cellules ? Et qui
détermine le taux d’expression de ces protéines ? Ou encore
comment un organisme unicellulaire s’adapte aux différents milieux ?
 Les facteurs déterminant sont:
 La concentration en ARNm propre à chaque protéine, qui
dépend de la nature du gène transcrit et de la vitesse à
laquelle il est transcrit dans une cellule donnée;
 La fréquence à laquelle il est traduit;
 Et la stabilité, id est (ie) la demi-vie de la protéine.

C’est donc principalement la transcription différentielle des


gènes en ARNm dans une cellule qui détermine ses
caractéristiques (propriétés et fonctions).
Expression d’un gène = processus entier qui décode l’information
porté par un gène donné et la traduit en protéine.
Etapes-clé de la découverte de l’ARNm
La transcription?
 La transcription est le processus de copie du matériel génétique
(ADN) en ARN.
Adenine Guanine

Cytosine

Thymine Uracile
Les Mécanismes de la Transcription
Les Mécanismes de la Transcription
Les ARN Polymérases

ARN polymérase I : permet de transcrire les ARN ribosomiques (sauf le 5S)


ARN polymérase II : permet de transcrire les ARN messagers
ARN polymérase III : permet de transcrire les petits ARN comme les ARNt et
l’ARNr 5S.
Le Cycle de Transcription
Brin matrice

ARN Poly II

Brin d’ADN codant Brin d’ARN néo-synthétisée:


 complémentaire au brin d’ADN matrice
 identique au brin d’ADN codant
Mécanismes généraux de la Transcription
par l'ARN polymérase II
La transcription des gènes se déroule selon trois phases principales: phases
d’initiation, d’élongation et de terminaison.
Phase d’initiation:
 L’initiation de la transcription par l’ARN polymérase II est assurée par des
facteurs transcriptionnels (protéines).
 Ces facteurs s’assemblent sur une région située en amont de l’ADN à transcrire
qui porte le nom de promoteur (ex. TATA box chez les eucaryotes).
Cet assemblage entraîne la formation d’un complexe d’activation qui permet la
liaison de l’ARN polymérase II.
L’ensemble forme le complexe d’initiation de la transcription.
La transcription débute à 20-30 paires de base (pb) en aval de la boite TATA, au
site d’initiation de la transcription (ATG), qui par convention est appelé +1.
Le complexe d’initiation de la transcription va catalyser la formation de la
première liaison phosphodiester entre les deux premiers nucléotides de l ’ARN
messager (ARNm).
L’ARN polymérase II se déplace ensuite le long de l’ADN en ouvrant une partie
de la molécule d’ADN par déroulement de la double hélice sur une courte distance
en formant une boucle de transcription.
Phase d’élongation:
 La boucle de transcription se déplace dans le sens 3’-5’ du brin matriciel et la
chaîne d’ARNm s’allonge dans le sens 5’-3’.
 L’élongation de la molécule d’ARNm se fait par l’appariement des bases
complémentaires et par l’addition successive de nucléotides 5’ triphosphates.
 Des facteurs supplémentaires appelés facteurs d’élongation sont nécessaires
au déplacement de l’ ARN polymérase II.
 L’ADN lu se rembobine immédiatement après la lecture.

Phase de terminaison:
 La terminaison de la transcription est encore mal connue.
 L’ARN polymérase II continue à transcrire jusqu’à plus de 1000pb (non
traduit), jusqu'à ce qu'elle rencontre des sites localisés dans des régions dont la
nature est peu connue.
Maturation de l’ARNm (spécificité des eucaryotes):
1) L’ajout de la coiffe en 5’ (Capping)

!!! Cette coiffe empêche la dégradation de l’ARN par une exonucléase 5’3’ (ce qui augmente sa demi-vie).
2) La polyadénylation en 3’ des ARNm

L’extrémité 3’ de la plupart des ARNm eucaryotes est polyadénylée.


Une fois la transcription achevée, l’ARNm sera clivé 15-30 nucléotides en aval de
la séquence signal, puis des AMP seront ajoutés par une poly(A) polymérase pour
former une queue poly(A).
La polyadénylation facilite l’exportation des ARNm hors du noyau, les protège des
dégradations une fois dans le cytosol et facilite la traduction.
3) L’épissage des introns (le splicing)
NB: Les régions UTR (untranslated regions en anglais), sont les parties de l'ARNm issues de la transcription de
l'ADN qui ne sont pas traduites en protéines.
Transcription chez les procaryotes.

L’ARN polymérase ADN dépendante de E.Coli comporte 4 sous unité de 3 sous


type différents b, b’, a2 = core enzyme.
Une 5ème sous unité ou facteur est nécessaire à l’initiation de la transcription = s
(sigma), lorsqu’elle est associée avec le core enzyme on obtient l’Holoenzyme.

Ces 5 sous-unités s'organisent pour former 3 domaines fonctionnels de l'enzyme :


• 2 domaines d'interactions avec l'ADN
• 1 site catalytique pour la formation des liaisons phosphodiester.
Transcription chez les procaryotes
(suite)

La transcription se déroule en 5 étapes :


1. Interaction de l’holoenzyme avec l’ADN au niveau du
promoteur. Formation d’une bulle de transcription ie
déroulement de l’ADN sur environ 17pb.
2. Initiation de la polymérisation de la chaîne d’ARN.
3. Libération du facteur σ.
4. Elongation de la chaîne ARN.
5. Terminaison de la transcription (deux mécanismes
possibles)
La Terminaison de la Transcription chez
les procaryotes (Rho-indépendante)
La Terminaison de la Transcription chez
les procaryotes (Rho-dépendante)
La Terminaison de la Transcription chez
les procaryotes (Rho-dépendante)
Particularités de la Transcription Procaryote

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