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    RETICULOCITOS

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    El documento describe el procedimiento para realizar una tinción de reticulocitos en una muestra de sangre. La tinción implica mezclar gotas de sangre y tinción de reticulocitos en un tubo y dejar reposar, luego preparar un frotis y examinarlo bajo el microscopio para identificar los reticulocitos teñidos de azul. El recuento de reticulocitos se usa para evaluar la producción de eritrocitos en la médula ósea.

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    El documento describe el procedimiento para realizar una tinción de reticulocitos en una muestra de sangre. La tinción implica mezclar gotas de sangre y tinción de reticulocitos en un tubo y dejar reposar, luego preparar un frotis y examinarlo bajo el microscopio para identificar los reticulocitos teñidos de azul. El recuento de reticulocitos se usa para evaluar la producción de eritrocitos en la médula ósea.

    Descripción original:

    detalle de reticulocitos

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    El documento describe el procedimiento para realizar una tinción de reticulocitos en una muestra de sangre. La tinción implica mezclar gotas de sangre y tinción de reticulocitos en un tubo y dejar reposar, luego preparar un frotis y examinarlo bajo el microscopio para identificar los reticulocitos teñidos de azul. El recuento de reticulocitos se usa para evaluar la producción de eritrocitos en la médula ósea.

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    El documento describe el procedimiento para realizar una tinción de reticulocitos en una muestra de sangre. La tinción implica mezclar gotas de sangre y tinción de reticulocitos en un tubo y dejar reposar, luego preparar un frotis y examinarlo bajo el microscopio para identificar los reticulocitos teñidos de azul. El recuento de reticulocitos se usa para evaluar la producción de eritrocitos en la médula ósea.

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    PROCEDIMIENTO:

    1. Poner tres gotas de sangre bien mezclada y dos gotas de tincin de reticulocitos en un
    tubo de vidrio y mezclar bien. Dejar reposar durante 10 minutos a temperatura ambiente
    (1826 C).
    2. Preparar una extensin perifrica o centrifugada convencional, y secar al aire durante
    al menos 15 minutos. No se recomienda la contratincin.
    3. Colocar el cubreobjetos y examinar con el microscopio.

    TINCIN DE
    RETICULOCITOS
    (Procedimiento nmero R 4132)

    APLICACIN

    CARACTERSTICAS DE FUNCIONAMIENTO

    La tincin de reticulocitos se utiliza para la identificacin de stos en frotis de sangre.


    Los reactivos de tincin de reticulocitos son para uso diagnstico in vitro.
    En 1949, Brecher1 introdujo el mtodo de nuevo azul de metileno para la identificacin
    de reticulocitos, basado en la precipitacin del RNA ribosmico mediante el colorante
    catinico. Actualmente, este mtodo ha sustituido a otros y constituye el procedimiento
    reconocido para la cuantificacin de reticulocitos en la sangre perifrica2.
    Sigma-Aldrich proporciona una solucin estable para la tincin de reticulocitos en
    frotis de sangre. La sangre y la solucin de tincin de reticulocitos se mezclan y se incuban
    brevemente a temperatura ambiente. Las extensiones perifricas o centrifugadas se hacen
    en portaobjetos microscpicos, se secan al aire y se evalan mediante inmersin de aceite
    en un microscopio ptico. Un hemate positivo mostrara dos o ms grnulos teidos de azul.

    Los frotis de sangre teidos se evalan subjetivamente para detectar la presencia o


    ausencia de reticulocitos. Se considera un reticulocito cualquier hemate con dos o ms
    partculas teidas de azul2.
    Utilizando un objetivo de inmersin de aceite de 100x y un ocular de 10x, escoger
    aleatoriamente zonas del frotis en las que los hemates estn cerca unos de otros, pero sin
    tocarse ni solaparse. Contar 1000 hemates que incluyan reticulocitos. La proporcin de
    reticulocitos puede calcularse como:
    Recuento de reticulocitos (%) = Nmero total de reticulocitos
    10
    Los valores normales en adultos al nivel del mar son del 1,0 0,5 %2.
    Debido a la variabilidad del hematocrito, puede ser necesario corregir el recuento de
    reticulocitos observado a un hematocrito normal del 45 %:

    REACTIVO

    Recuento de reticulocitos corregido (%) = Recuento observado x Hematocrito medido (%)


    45 %

    TINCIN DE RETICULOCITOS, nmero de catlogo R 4132


    Nuevo azul de metileno, 1 % (p/v), cloruro sdico, 0,9 % (p/v), y oxalato potsico,
    1,6 % (p/v).
    ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD:
    Almacenar la tincin de reticulocitos a temperatura ambiente (1826 C). El reactivo
    es estable hasta la fecha de caducidad.

    En los pacientes normales no anmicos, los reticulocitos se encuentran en la sangre


    circulante en el cuarto da, tras tres das de maduracin, dentro de la mdula. Los factores
    que aumentan la eritropoyesis pueden acortar el tiempo de maduracin de la mdula sea,
    y aumentar el de la sangre. Este cambio da como resultado grandes cantidades de
    reticulocitos cambiantes circulando en la sangre. stos no deben ser considerados al
    cuantificar los reticulocitos como reflejo de la produccin de hemates2-3. Las clulas
    cambiantes pueden detectarse mediante un frotis sometido a tincin de Wright3, y un ndice
    de produccin de reticulocitos2 establecido en el recuento de reticulocitos corregido y el
    hematocrito:

    PREPARACIN:
    La tincin de reticulocitos se suministra lista para su uso.
    PRECAUCIONES:
    Se deben seguir las precauciones normales ejercidas en el manejo de reactivos de
    laboratorio. Deshacerse de los desechos observando todas las normativas locales,
    regionales y nacionales. Consultar la Hoja de datos de seguridad del material para obtener
    cualquier informacin actualizada sobre riesgos, peligros o seguridad.

    ndice de produccin de reticulocitos = Recuento de reticulocitos corregido (%)


    Tiempo de maduracin previsto (en das)
    Con el tiempo de maduracin previsto como sigue:

    Declaracin de riesgos y seguridad (EE.UU. y U.E.) (Precaucin: sustancias en proceso de


    prueba)
    El reactivo de tincin de reticulocitos es IRRITANTE. Irritante para los ojos, sistema
    respiratorio y piel. En caso de contacto con los ojos, enjuagar inmediatamente con agua
    abundante y buscar atencin mdica. Llevar ropa protectora adecuada.

    Das
    1
    1,5
    2
    3

    Hematocrito
    45 %
    35 %
    25 %
    15 %

    Un ndice de produccin de reticulocitos superior o igual a 3 se considera normal,


    mientras que un ndice inferior a 2 se considera por debajo de lo normal2.
    Si los resultados observados varan de los esperados, pngase en contacto con el
    Servicio Tcnico de Sigma-Aldrich.

    PROCEDIMIENTO
    RECOGIDA DE LAS MUESTRAS:
    Se recomienda que la recogida de las muestras se lleve a cabo de acuerdo con las
    directrices del documento M29-A2 de la NCCLS. Ningn mtodo de prueba puede
    garantizar la completa seguridad de que las muestras de sangre o tejido no transmitan
    infecciones. Por lo tanto, todos los derivados de la sangre o muestras de tejido deben
    considerarse potencialmente infecciosos.
    La sangre puede recogerse en tubos evacuados de laboratorio clnico. Todos los
    anticoagulantes habituales son aceptables (p.ej., heparina, citrato y oxalato). La sal de
    tripotasio de etilenodiamina-cido tetraactico (K3 EDTA) es el anticoagulante preferido. Si
    el procedimiento no se lleva a cabo dentro de las 23 horas de la recogida, almacenar la
    sangre a 4 C. sta debe estabilizarse a temperatura ambiente y mezclarse antes de la
    tincin. No se recomienda utilizar sangre que tenga ms de 24 horas.

    REFERENCIAS
    1. Brecher G: New methylene blue as a reticulocyte stain. Am J Clin Pathol 19:895, 1949
    2. National Committee for Clinical Laboratory Standards. Method for Reticulocyte
    Counting, Proposed Standard. H16-P, Vol 5, No. 10, 1985
    3. Perrotta AL, Finch CA: The polychromatophilic erythocyte. Am J Clin Pathol 57:471,
    1972
    Sigma-Aldrich, Inc. garantiza que sus productos concuerdan con la informacin contenida
    en sta y otras publicaciones de Sigma-Aldrich. El comprador debe determinar la idoneidad
    de los productos para su uso particular. Es posible que deban aplicarse trminos y
    condiciones adicionales. En el reverso de la factura o del albarn se incluyen los trminos
    adicionales y las condiciones de venta.

    MATERIAL ESPECIAL NECESARIO PERO NO SUMINISTRADO:


    Microscopio
    Instrumento de extensin de sangre o citocentrfuga
    Tubos de vidrio de 10x75 12x75 mm
    Cuentagotas de laboratorio o pipetas de Pasteur
    Portaobjetos de microscopio y cubreobjetos

    Procedimiento nmero R 4132


    Revisin anterior: 2003-03
    Revisin: 2003-09

    NOTAS:
    Se recomienda procesar las extensiones de sangre procedentes de donantes sanos
    junto con las muestras de paciente como controles normales.
    En la tincin de reticulocitos puede formarse una pequea cantidad de precipitado. En
    caso de observarse precipitado, filtrar con papel de filtro de grado de laboratorio.
    Los datos obtenidos mediante este procedimiento slo sirven como ayuda en el
    diagnstico y deben ser revisados junto con otras pruebas clnicas o informacin de
    diagnstico.

    AR-MED Ltd., Runnymede Malthouse


    Egham TW20 9BD Reino Unido

    SIGMA-ALDRICH, INC.
    3050 Spruce Street, St. Louis, MO 63103 EE.UU. +1 314 771 5765
    Servicio Tcnico: a cobro revertido al +1 314 771 3122
    o por correo electrnico a clintech@sial.com
    Para realizar pedidos: a cobro revertido al +1 314 771 5750
    www.sigma-aldrich.com

    SIGMA-ALDRICH CHEMIE GmbH


    P.O. 1120, 89552 Steinheim, Alemania 49-7329-970

    1-ES

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