TEMA 2.

REACTORES BIOQUÍMICOS:
La fabricación de ciertos alimentos, medicamentos, antibióticos… está relacionado con la
biotecnología. Estos procesos tienen lugar en reactores bioquímicos o biorreactores.

Existen diversas reacciones utilizadas en biotecnología:

Generación de productos a partir de un sustrato y ciertos microorganismos. Por ejemplo,
la fermentación, en donde los cambios químicos
producidos en compuestos orgánicos (sustratos)
tienen lugar por la actividad enzimática de
microorganismos.
Los microorganismos se usan para seguir
renovando los que tenemos en el reactor, pero
no buscamos nada de ellos, lo normal es que los
quitemos del medio. Por tanto, estas reacciones
están acopladas a operaciones de separación.

Generación de microorganismos. En estos casos, nos

interesa la generación de mayor cantidad de
microorganismos; es decir, aumentar su concentración.
Por ejemplo, cuando nos interesa obtener levaduras para
la panificación.

Obtención de enzimas. En este caso, mediante un

sustrato con microorganismos queremos aumentar
la cantidad de microorganismos en el reactor con
el fin de luego obtener o concentrar enzimas que
estos contienen. Se suelen emplear efluentes
alimenticios con azúcares.

*CARACTERÍSTICAS GENERALES DE REACCIONES

BIOTECNOLÓGICAS:

Inconvenientes:
 Procesos generalmente lentos, llegando a tardar horas o incluso días.
 La actividad específica de los biocatalizadores sele ser baja. Es necesario tener una gran
cantidad de enzima para obtener gran cantidad de producto, teniendo en cuenta que de
por sí, en las reacciones biotecnológicas no se obtienen grandes cantidades.
 Procesos muy dependientes de las condiciones ambientales (T, pH, redox, oxígeno…). Es
necesario controlar las condiciones para obtener el producto que nosotros queramos, de
forma que los microorganismos funciones en las mejores condiciones posibles y
obengamos el producto que nos interesa y no otro.

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 Puede existir la inhibición tanto por producto como por sustrato. Para evitar esto
debemos tener en cuenta las condiciones del proceso y el tipo de reactor.
o Inhibición por sustrato: se da al tener una gran cantidad de sustrato dentro del
reactor, por lo que lo más recomendable es utilizar biorreactores semicontinuos
fed-batcth, que van añadiendo el sustrato poco a poco, en forma de pulsos.
o Inhibición por producto: se da al acumularse el producto, por lo que se recomienda
usar biorreactores continuos, que va sacando siempre producto.
 La naturaleza del biocatalizador (enzimas) puede modificarse a lo largo del proceso
(inhibición, desactivación de enzimas, activación por adaptación…). Siempre se va a buscar
que la enzima sea lo más estable posible.
 La distribución de los productos está condicionada por las condiciones ambientales, de
forma que se origine un producto u otro. Por ejemplo, microorganismos que produzcan
metabolitos diferentes dependiendo de si se encuentran en un ambiente aerobio o
anaerobio.
 La energía de activación de la reacción es importante (la velocidad de reacción depende
de la temperatura). Tenemos que vigilar el intervalo de temperatura: esta ha de ser lo
suficientemente elevada para que los microorganismos comiencen la reacción, pero no
demasiado para que no afecte a su estabilidad/crecimiento/desnaturalización proteica.
Dependiendo del tipo de microorganismo así será la temperatura.
 Buen contacto de fases sólido, líquido y gas, por lo que es necesario tener un buen diseño
que permita la transferencia de materia entre las fases. Por ejemplo, la mejor manera de
hacerlo es mediante un reactor de agitación. En el caso de tener la fase gaseosa, también
es recomendable contar con un difusor de burbuja fino.
 El aporte y la eliminación del gas pueden ser problemáticos.
 Variaciones de las propiedades reológicas del fluido (no newtoniano) durante la
fermentación. Esto es, cambio de la viscosidad del fluido con el tiempo durante la
fermentación. Normalmente, esto ocurre al aumentar la temperatura.
 Es necesaria una separación final.

Ventajas:
 Los procesos de fermentación son autocatalíticos; es decir, un propio producto (enzima
generada por el propio microorganismo) que obtenemos durante el proceso actúa como
catalizador; esto es, no se consume, pero es necesario para que se dé la reacción sin tener
que adicionarlo. Supone una ventaja, puesto que nos sale más barato porque se genera y
no tenemos que añadirlo, pero también una desventaja ya que tenemos que vigilar que
este se produce.
 Las entalpías de activación son bajas (no hay problemas de intercambio de calor). No es
necesario ceder o quitar mucho calor, por lo que desde el punto de vista energético son
baratas estas reacciones.
 La temperatura y presión de operación son moderadas. Bueno desde el punto de vista
económico, puesto que nos permite utilizar materiales mucho menos resistentes.

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Análisis de costes:
 Se obtienen productos muy diferentes (volumen de producción, precio, innovación…). Es
muy difícil comparar la producción de un producto u otro.
 Materias primas bastante caras, siendo su coste superior al 50% de los costes totales.
 Elevados costes de capital (producción y separación): es una industria donde se gasta
mucho dinero en I+D puesto que hay que actualizar y desarrollar mejor el proceso (por
ejemplo, tener equipos más eficaces).
 Industria que requiere servicios y suministros (electricidad, agua, vapor…) energía de
agitación/aireación y esterilización, recuperación del producto.

*CARACTERÍSTICAS DE LOS BIORREACTORES:

Objetivos de un fermentador:
 Se busca un alto rendimiento en el producto deseado (alta conversión de la materia
prima, elevada selectividad en el producto deseado).
 Elevada productividad global, que son los mol/kg·h conseguidos de producto.
 Producto de concentración elevada para disminuir los costes de separación. Si obtenemos
un producto muy diluido nos será muy difícil separarlo del caldo de cultivo; en cambio, si
es concentrado, será más fácil.

Limitaciones y soluciones de los biorreactores:

 Baja productividad puesto que suelen ser operaciones discontinuas (tiempos muertos y
poca cantidad de producto).

 Inhibición por sustrato.

o Podemos realizar una alimentación adecuada mediante la adición progresiva de
sustrato o la adición escalonada (se añade un poco y se espera a que se consuma
para añadir más).
o Podemos realizar una mezcla completa, favoreciendo que no se acumule el sustrato.

 Inhibición por producto. Se desaconseja totalmente utilizar reactores discontinuos.

o Se elimina el producto producido usando reactores continuos, los cuales pueden ser
o bien de mezcla completa, o bien de flujo pistón.

 Baja concentración celular o enzimática, sobre todo si trabajamos en suspensión. Se va a

intentar siempre mantener una concentración elevada de células o enzimas.
o En el caso de tener reactores en discontinuo, podemos inmovilizar la biomasa de
forma que esta quede sobre un soporte sólido permitiendo así una mejor
transformación del sustrato a producto. Es muy común usarlo en reactores de flujo
pistón. Es importante que usemos alguna bomba para introducir y sacar/recircular el
líquido puesto que no podemos utilizar agitación mecánica.
o También, podemos utilizar la recirculación celular. Los microorganismos en
concentraciones bajas se devuelven al reactor para que sigan llevando a cabo la
reacción y generen más producto.

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 Limitaciones en la transferencia de materia en procesos con más de una fase.
o Si se tienen un sólido, se pretenderá que sea lo más pequeño posible.
o Si se tiene un gas, se pretenderá que se administre como burbujas lo más pequeñas
posibles. Para ello se usarán sistemas de dispersión de gas (boquillas, difusores)
o Si se tiene un líquido, que se mueva lo más rápido posible y haya turbulencias, para lo
que se usará agitación.

*CINÉTICA DE PROCESOS ENZIMÁTICOS Y MICROBIANOS:

Tenemos dos grandes grupos de reacciones, por lo que tenemos dos tipos de reactores, cuya
principal diferencia es la cinética que estos llevan:
- Reactores enzimáticos  cinética de Michaelis-Menten
- Reactores microbiana:  cinética según la ecuación de Monod.

Cinética enzimática:
Está basada en el mecanismo llave-cerradura.
En este caso, a la enzima se le une un
sustrato mediante una reacción reversible
dando lugar al complejo enzima-sustrato (ES)
que, una vez que se forme, origina el
producto tras una reacción irreversible.

La enzima final se recupera y pasa al primer paso de la reacción; actúa como un catalizador.

La velocidad máxima (rMAX) no llega a alcanzarse nunca, puesto que la formación del complejo
ES es reversible, pero en condiciones adecuadas nos aproximamos mucho a ella.

Una de las aplicaciones son la industria láctica, vinícola…

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Cinética microbiana:
En este caso, nos interesa aumentar la concentración de la biomasa.
r

hace referencia a la velocidad del proceso total, mientras que  hace referencia a la velocidad
específica.

Una de las aplicaciones es el tratamiento de aguas residuales en depuradoras

En una depuradora, se elimina primero los contaminantes de mayor tamaño y a medida que
avanzamos tenemos contaminantes más pequeños.
Al proceso biológico tienen que llegar compuestos disueltos en agua; todo lo demás que lleve
el agua hay que eliminarlo antes.
1- Primero tiene lugar una eliminación por
densidad en la que todos los sólidos de mayor
densidad del agua acaban en el fondo del pozo.
Estos son recogidos con una cuchara electro-
hidráulica.
2- El agua se desplaza al desbaste. Son una serie
de rejas de forma que los sólidos que vayan
llegando queden retenidos dependiendo del
tamaño. Estos solidos posteriormente son
tratados y desechados en vertederos.

3- Se mete una aireación con

difusores de burbuja, las cuales
arrastran todos los aceites y
grasas que el agua contenga
hacia la parte superior del
agua al pesar mucho menos
(menor densidad).
Así, en la parte superior del
agua se queda como una costra que se puede ir eliminando. Además, en esta parte, se
eliminan los sólidos pequeños como arenas que puedan contener.

4- El agua pasa a una piscina de decantación primaria

de forma que cualquier sólido con tamaño suficiente
sedimente y se pueda separar.
5- Tratamiento biológico. En este caso se pueden
utilizar tanto bacterios aerobias como anaerobias.
En el caso de las aerobias, se contará con unos
difusores en la parte inferior que proporcionen el
oxígeno. Se pretende eliminar toda la materia
orgánica que tenga el agua, incluidos el N y el P. Esto

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 es importante puesto que si luego acaba en un cauce provoca un crecimiento
desmesurado de agua y vegetales.
6- Se quitan los microorganismos y
moléculas más pequeñas que el agua
empleando un segundo decantador.
7- Tratamiento de fagos. Finalmente, se
hace un tratamiento para poder liberar
dicho agua en ríos y así se diluya.

Puede haber una digestión anaerobia, cuyo

objetivo es tratar la materia orgánica sólida. En
esta reacción se produce metano, que puede
recogerse y usarse como combustible.

Tanto la digestión aerobia (en líquidos), como en la anaerobia (en sólidos) ocurre la ecuación
de una cinética microbiana, en la que, a partir de un sustrato y microorganismos, se generan
más microorganismos, junto con un producto (que suele ser gaseoso) y energía, ya que es un
proceso que produce calor.

Así con estas ecuaciones, según sea una cinética enzimática o microbiana, junto con las
ecuaciones de diseño de cada reactor, podemos determinar el volumen necesario del reactor,
la temperatura, tiempo necesario….

A continuación, se muestran los cambios de los perfiles de las especies químicas en un proceso
enzimático o microbiano (discontinuos).

Procesos discontinuos

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En un sistema con un proceso enzimático, el catalizador (enzimas) de manera general no
cambia con el tiempo, aunque puede darse el caso de que se active, y aparentemente haya
más con el tiempo; o inactive y aparentemente haya menos con el tiempo; cambio de
actividad, hay que cambiarla con el tiempo. Con respecto al sustrato, su concentración decae
con el tiempo, y el producto aumenta con el tiempo hasta que el sustrato desaparece.

En un sistema con un proceso microbiano. Los microorganismos (biomasa) aumentan su

concentración con el tiempo, al principio hay pocos, pero luego conforme se alimentan
aumentan su concentración. Normalmente no se deja que crezcan de forma descontrolada,
sino que se controla la concentración a la que crecen. Esto se puede hacer mediante el uso de
un decantador (piscina circular del ejemplo de la depuradora), haciendo que los
microrganismos sedimenten, siendo un residuo, que se llevará a una digestión anaerobia. Con
respecto a los nutrientes bajan con el tiempo, y el producto aumenta. Cada cierto tiempo hay
que quitar el exceso de microorganismos que se han formado.

*CARACTERÍSTICAS DE LOS REACTORES QUE SE VAN A USAR

(BIORREACTOR DE TANQUE AGITADO):

Reactores discontinuos:
Es típico de la industria alimentaria, farmacéutica y
biotecnológica (a pequeña escala, 5000L como máximo). Es
un reactor heterogéneo porque presenta dos fases distintas
(líquida y gaseosa).

Tanto el medio de fermentación como el inóculo se añaden al

principio de la operación. La variable más importante es el
tiempo; la reacción se llevará acabo hasta que a un
determinado tiempo se alcance una conversión determinada.
Además, al ser agitados, son reactores de mezcla completa,
por lo que su funcionamiento se parece mucho al ideal.

Va a presentar una serie de inconvenientes:

- Periodos de arranque y de parada (carga y descarga del reactor) donde no se va a estar
produciendo producto, lo que deriva a tener una pérdida de tiempo. Es por esto que
requiere mucha mano de obra.
- Pérdida de homogeneidad de producto. Se da siempre y cuando no controlemos muy
bien las condiciones experimentales (como el tiempo). Si estas varían, en cada tanda de
productos obtendremos compuestos diferentes. De aquí la importancia de los sistemas de
control de calidad.
- Baja densidad celular o enzimática, puesto que vamos a tener la biomasa en suspensión.
- Responde peor ante una inhibición, ya que se carga todo el sustrato al principio y se
acumula todo el producto que se forma.

Ejemplos:
 Producción de ácido acético.
 Producción de ácido L-ascórbico (vitamina C) o del ácido L-glutámico.
 Producción de levadura de panificación.

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Este tipo de reactores va a seguir la siguiente cinética:
La velocidad de reacción (r), se
despejará dependiendo de la
n
operación (r = K · CX ).
También, podemos representarla
teniendo en cuenta la velocidad de
consumo de los reactivos.

Reactores fed-batch:
Es una alternativa a trabajar si el proceso presenta una
inhibición por sustrato, puesto que el alimento se añade en
tandas sucesivas y no se retira el producto; sería un
discontinuo alimentado, pudiendo considerarse como un
reactor semi-contínuo.

Es interesante tener un reactor con dos recipientes, en uno

en el que introducimos el sustrato y está conectado con una
válvula al otro recipiente donde ocurre la reacción, así,
abriendo y cerrando la válvula se puede suministrar el
sustrato poco a poco (tendremos un medidor que abrirá la
válvula cuando llegue a una determinada concentración. Con
esto se consigue que la inhibición por sustrato sea baja.

Ejemplos: Procesos de fermentación industriales: producción de levadura de pan o de

antibióticos.

Reactores continuos:
Constantemente se está metiendo y sacando medio líquido teniendo siempre un volumen
constante dentro del reactor, de forma que se utilizarán para una producción a gran escala.

Son reactores con alta productividad que requieren menos mano de obra, menos energía y un
elevado control de las variables, siendo muy importante puesto que, si estas cambian, cambian
las características de la corriente de salida del reactor. Hay que intentar evitar detener el
reactor puesto que, al ser continuo, nos va a costar más llegar de nuevo al estado estacionario.

Cuando el estado estacionario se alcance, las condiciones son independientes con el tiempo; y
el producto que se obtenga va a ser muy homogéneo.
Son de mezcla completa que se ajustan más a la situación ideal.

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Pueden trabajar en serie; esto es, podemos tener un reactor seguido de otro de forma que el
producto de uno de los reactores se convierte en el alimento del segundo biorreactor.
Esto puede ser interesante para cuando
se necesita producir un producto en el
que están involucradas diversas
reacciones o etapas; en cada reactor se
establecen unas determinadas
condiciones dependiendo de la etapa del
proceso que se vaya a realizar, como el
pH, la Tª, la concentración de O 2 (aerobio,
anaerobio)…
Además, también son útiles para evitar la
inhibición por producto.

Normalmente, estos reactores trabajan con la biomasa en suspensión, por lo que, al igual que
los reactores en discontinuo, tendrán una baja densidad celular. Una solución a este problema
es la recirculación de la biomasa. En este caso, cada cierto tiempo, se eliminará parte de la
biomasa para mantener el estado estacionario y evitar que aumente el volumen de esta dentro
del reactor.

El principal problema que podemos tener es que el caudal que estemos utilizando sea muy
elevado, dando lugar al caudal de arrastre o lavado; esto es, prácticamente el alimento que
entra sale del reactor sin interaccionar con la biomasa de forma que no tiene lugar la
conversión.
La solución es la recirculación, permitiéndonos obtener una gran concentración de
enzimas/microorganismos al igual que poder trabajar con grandes caudales.

Ejemplos:
- Producción de la levadura del pan.
- Producción de proteínas microbianas.
- Producción de etanol.
- Producción de cerveza y fangos activos

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Reactor de flujo pistón:
El fluido se va desplazando a lo largo del reactor que tiene forma
cilíndrica; entrará por un orificio y saldrá por el otro.

La concentración de sustratos y reactivos va a ser siempre la misma en el punto donde se tome

la medida; sin embargo, va a ir cambiando a lo largo del reactor de forma que la concentración
de sustrato vaya disminuyendo y la de producto vaya aumentando. Por tanto, este reactor
podemos dividirlo en múltiples secciones las cuales se comportarán individualmente como
reactores discontinuos a pesar de ser un reactor continuo.

A diferencia de los continuos, en este caso la variable tiempo

si es importante, puesto que el tiempo de residencia () es
muy importante. El tiempo de residencia es el tiempo que
están los reactivos dentro del reactor para transformarlos en
productos; el cual, es proporcional al volumen del reactor e
inversamente proporcional al caudal.

En muchas ocasiones se opera con recirculación parcial de la corriente de salida o con

microorganismos inmovilizados.

La ecuación recuerda a la de un proceso discontinuo. Las expresiones son idénticas a las

correspondientes a un reactor discontinuo de tanque agitado. R
e
s

*PARTICULARIDADES DE REACTORES ENZIMÁTICOS (ENZIMAS EN

DISOLUCIÓN):
Las enzimas pueden ser recuperadas de los microorganismos, induciéndolos a dejar la célula o
directamente del material celular por procedimientos químico-mecánicos. Las enzimas libres
de células, extracelulares, son solubles en agua e inestables, puesto que no cuentan con la
protección que les proporciona estar en el interior celular.

Los reactores enzimáticos se usan para obtener enzimas que luego se van a usar en procesos
industriales, como son:
 Proteasa, que lleva a cabo hidrólisis de proteínas, y se usa en preparación de productos
lácteos, extracción de aceite de pescado).
 Amilasa, que lleva a cabo la hidrólisis del almidón, importante en cocción del pan.
 Pectinasa, que lleva a cabo la hidrólisis de la pectina, importante en la clarificación de
zumos de frutas).

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Estas enzimas se producen en un reactor enzimático, por lo que siempre habrá dos etapas, una
primera etapa de producción de las enzimas, y otra etapa de recuperación/purificación de
producto, ya que las enzimas estarán en el caldo de cultivo junto con otros compuestos. Hay
algunas enzimas que se usan en disolución, pero habrá otras que se inmovilizan ya que son
muy sensibles.

Recuperación enzimática:

CROMATOGRAFÍA:
Separación de los componentes de una disolución (fase móvil) por retención diferenciada
sobre un soporte sólido (fase estacionaria). Principio de retención:
 Adsorción. Se basa en fuerzas físicas superficiales. Se pueden usar tierra
de diatomeas o geles de poliacrilamida.
 Intercambio iónico. Se basa en enlaces químicos heteropolares
reversibles. El eluyente suele ser una fase acuosa. Encontramos las resinas
de intercambio iónico.
 Gel filtración. Se basa en hacer una separación por tamaño. Consta de
una fase estacionaria que será un tamiz molecular, por lo general, de
polidextrano entrecruzado; dependiendo del grado de entrecruzamiento
dejará pasar a moléculas de un tamaño u otro.

Otro tipo de cromatografía muy

importante es la cromatografía de
afinidad.
Es la que tiene una mayor afinidad,
puesto que se va a diseñar
específicamente la fase estacionaria para
que interaccione única y específicamente
con el compuesto de interés.

INTERCAMBIO IÓNICO:

Contacto de un sólido iónico (intercambiador) con una mezcla líquida que contiene iones en
disolución, produciéndose el intercambio entre los grupos iónicos del sólido y los iones de
aquella que se alcance el equilibrio dinámico.
Es necesario que sea una reacción reversible, para permitir que la enzima se separe de la
resina.
Esta separación se hace gracias a la adición de un disolvente de elución, proceso conocido
como elución.

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La forma más común son columnas de vidrio que están rellenas con las
esferas de resina. Por la parte superior se introduce el caldo de cultivo,
y según va pasando, la enzima cargada va uniendo selectivamente a los
grupos funcionales iónicos de la resina, la cual se va saturando.
Tenemos tres zonas:
 Zona de saturación: zona de la columna completamente saturada
de forma que no tiene lugar la retención de la enzima.
 Zona de transición: zona donde tiene lugar una adsorción activa.
 Zona virgen: zona por donde pasa el caldo de cultivo
prácticamente sin concentración de enzima.

Conforme se vaya añadiendo más volumen de caldo la zona de saturación va aumentando a lo

largo de toda la columna, hasta el punto en el que toda la columna quedé completamente
saturada (todas las moléculas de resina quedan sustituidas por las moléculas de interés).

Antes de llegar a esto, habrá que parar la reacción, ya que, si llega a este punto, la resina no
será capaz de retener selectivamente nuestro compuesto de interés, sino que según entra el
caldo de cultivo, sale con la misma composición, sin llevar a cabo la separación. Llegado este
momento se necesita regenerar la columna.
Este punto se denomina breackthrough, punto de ruptura o punto de regeneración.

Podemos trabajar con la columna en discontinuo o en semicontinuo.

OPERACIONES DE MEMBRANA:
Separación por permeación a través de membranas selectivas bajo la acción de un gradiente
de presión (ósmosis inversa, ultrafiltración) o de concentración/eléctricos (diálisis,
electrodiálisis).
Se tiene que obligar con presión al disolvente para que pase a través de la membrana.

Cuanto más pequeña sea el tamaño de la molécula que queramos separar debemos aplicar
presiones más altas.

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Una manera de determinar como de bien
estamos separando una molécula es
mediante el coeficiente de rechazo (R):
 R=1: CP < C0, de forma que no tenemos concentración en el permeado (estamos
separando).
 R=0: CP = C0, de forma que no estamos separando bien.

Las operaciones de membrana también se utilizan para aumentar la concentración celular o

enzimática.

Se trata de una técnica de filtración

sencilla, donde la enzima es
retenida en una membrana, la cual
es permeable al producto y que
puede ser o no permeable al
sustrato. El flujo que pasa a través
de la membrana viene controlado
por la presión de la bomba.

El permeado de la operación contendrá el producto ya formado. En cambio, las enzimas

quedan retenidas en la membrana por lo que se pueden recircular al reactor.

Es una recirculación mejorada puesto que solo se recircula la enzima, no el producto.

En resumen, tenemos tres métodos de aumentar la concentración enzimática en el reactor:

- Recirculación.
- Inmovilización.
- Operación de membrana.

REACTORES DE DIÁLISIS (ENZIMA EN DISOLUCIÓN):

En este caso, tenemos un reactor continuo de mezcla
completa en la que la disolución de enzima está contenida en
un tubo de diálisis y se recircula por medio de una bomba
peristáltica. El sustrato y el producto tienen que difundir a
través de la membrana.

En el tubo tiene lugar un movimiento de sustrato y producto debido por lo que la reacción se
concentra en el interior de tubo, permitiendo así que las enzimas estén acumuladas solo en
esta parte (enzimas en suspensión).

Para compensar la pérdida de actividad de la enzima, pueden alternarse diversos tubos de

diálisis que se van vaciando y recargando (semi-continuo).

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*PARTICULARIDADDES DE LOS REACTORES ENZIMÁTICOS (ENZIMAS
INMOVILIZADAS):
Tenemos dos grupos de inmovilización.
- Químicos: Interacción química.
- Físicos: Rodear a la enzima con una fase diferente.

La principal ventaja al usar enzimas inmovilizadas es el aumento de la concentración

enzimática.
El principal inconveniente es que disminuye la estabilidad de enzimas in vitro, aparte de que
tengamos centro activos inaccesibles.

Métodos químicos:
 Soportado: entre el soporte y la enzima tendremos un residuo de aminoácido no esencial
químicamente activado. Estos interaccionan con la enzima. Normalmente se utilizan
cuando el soporte es celulosa, vidrio o polímeros sintéticos.
 Adsorción: es el más antiguo puesto que es el más sencillo. La enzima se pone en contacto
con un material que tenga la superficie activada (albúmina, carbón, arcilla, resinas de
intercambio iónico, celulosa o vidrio). Se debe tratarlas previamente con un producto
químico para activar la superficie.

En ambos casos se debe vigilar las condiciones ambientales para evitar tener pérdidas de
enzima.

 Reticulación: Enlaces covalentes intermoleculares entre las moléculas de enzimas y

agentes bifuncionales (diisotiocianato, agentes alquilantes, aldehídos). Es más complicado
separar posteriormente la enzima del soporte.

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 Membrana semipermeable: membrana plana y fibras huecas. La membrana es el soporte;
las enzimas están adheridas. Las moléculas de sustrato y producto pueden atravesar la
membrana.

El principal inconveniente es que podemos retener anclar

enzimas en la membrana de forma que el centro activo
quede junto a la membrana, por lo que la enzima no puede
realizar su función (tenemos una menor actividad).
Además, las enzimas in vitro presentan una baja
estabilidad.

Métodos físicos:
 Microencapsulación: atrapamiento físico mediante
membranas semipermeable de polímeros; esto es,
solo va a dejar pasar determinadas especies y en un
sentido concreto (sustrato de fuera a dentro; y
producto de dentro a fuera). Las enzimas están en
disolución en el interior de la membrana.

Esto favorece la protección contra esfuerzos mecánicos, burbujas de gas y contaminación.

Además, permite la fácil eliminación de gases y la purificación de la disolución (la
disolución interior de la microcápsula se irá empobreciendo de sustrato y enriqueciendo
de producto, de forma que con cualquier proceso de purificación podemos coger todas las
microcápsulas y tener el producto purificado).

 Geles hidrofílicos (poliacrilamida, gel de sílice,

agar, gelatina) mediante polimerización
térmica/química de monómero y enzima.
La enzima se queda en la matriz polimérica y
sustratos y productos se mueven libremente.
El principal inconveniente es la posible
pérdida de actividad de la enzima por la
contaminación, la temperatura de reacción,
etc.

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