BACTERIOLOGÍA
BACTERIOLOGÍA
BACTERIOLOGÍA
“ANTONIO LORENA”
TEMA: BACTERIOLOGÍA
GRUPO: 6
INTEGRANTES:
SEMESTRE: IV
CUSCO-PERU - 2023
INTRODUCCION
Las infecciones microbianas cada vez más constituyen un serio problema de salud pública, ya sea
por su efecto sobre la salud de los pacientes, como por los costos que este problema implica.
Esto hace que en el país se estén aunando esfuerzos para implementar sistemas de vigilancia,
prevención y control, orientados a enfrentar este problema, lo cual a su vez repercutirá en la
calidad de atención de los servicios hospitalarios. Los pacientes con procesos infecciosos
intrahospitalarios pueden presentar una gran variedad de signos y síntomas, algunos de ellos
pueden ser evidentes y fáciles de reconocer, mientras otros pueden pasar inadvertidos; por lo que
el clínico debe basar su diagnóstico en otras evidencias disponibles, como son los aspectos
epidemiológicos y la importante contribución del laboratorio que, además de permitir el
diagnóstico etiológico, orienta el manejo clínico terapéutico del paciente.
El Instituto Nacional de Salud, organismo técnico normativo, pone a disposición del personal de
salud este manual que representa el resultado del esfuerzo de los profesionales de la institución y
otros destacados especialistas en el tema en nuestro país.
BACTERIOLOGÍA
Tinción de Gram
Tinción de micobacterias
Tinción para tricomonádidos
Aplicaciones de la bacteriología en otras industrias
Tinciones habituales en bacteriología diagnóstica y sus usos
Las bacterias son organismos unicelulares. Existen muchos tipos de bacterias. Viven en todo el cuerpo y
la piel. Algunos tipos de bacterias son inofensivos e incluso beneficiosos. Otros causan infecciones y
enfermedades.
Una prueba de cultivo de bacterias puede detectar bacterias perjudiciales dentro o sobre el cuerpo que
pueden estar causando enfermedades. Para hacer la prueba, necesitará entregar una muestra de
sangre, orina, piel u otro tejido. El tipo de muestra depende de dónde parece estar localizada la
infección.
Para detectar qué tipo de bacteria puede tener, un profesional de la salud examinará un gran número
de células bacterianas. Para esto, su muestra se enviará a un laboratorio donde se cultivará hasta que
haya suficientes bacterias para la prueba. En general, los resultados están listos en pocos días. Sin
embargo, algunos tipos de bacterias se reproducen lentamente, por lo que sus resultados pueden tardar
varios días o más.
Las bacterias requieren de sustancias nutritivas cuyos componentes básicos deben satisfacer las
mínimas exigencias nutricionales y condiciones de atmósfera (aerobiosis, anaerobiosis, miroaerofilia),
pH y temperatura óptima para su crecimiento in vitro.
La elección de los medios de cultivo se realiza en función a la localización de las infecciones y las
bacterias a investigar. Los errores cometidos durante este paso del ciclo de procedimientos pueden
invalidar la lectura e interpretación de los cultivos. (minsa, s.f.)
PRINCIPIOS GENERALES
Las bacterias requieren de medios de cultivo que contengan sustancias nutritivas parecidas en lo
posible al medio natural en el que viven y se reproducen.
Es importante conocer la procedencia de la muestra, para escoger el medio de cultivo apropiado que
permita el crecimiento del microorganismo que se necesita estudiar.
Se usa para el cultivo de la mayoría de las bacterias. Ejemplo: caldo y agar nutritivo.
Permiten solo el crecimiento de la especie que se desea aislar. Contienen sustancias que impiden el
desarrollo de algunos grupos bacterianos, favoreciendo a su vez el desarrollo de otros. Ejemplo: agar
Mac Conkey, agar hipertónico de Chapman, etc.
Medios diferenciales
Medios inclinados en tubo, se emplea principalmente para resembrar cepas aisladas previamente,
con la finalidad de identificarlas.
Debe seguirse al pie de la letra las instrucciones escritas en relación con la preparación de medios
de cultivo, debiendo usarse exclusivamente, productos químicamente puros, a no ser que se
indique lo contrario.
PREPARACIÓN
AGAR NUTRITIVO
PREPARACIÓN
AGAR SANGRE
AGAR CHOCOLATE
PREPARACIÓN
PREPARACIÓN
PREPARACION
Pesar 65 g de agar triple azúcar hierro (TSI) para 1 000 mL de agua destilada.
Calentar al fuego hasta mezclar completamente.
Esterilizar a 121 ºC, durante 15 minutos.
Repartir en tubos, de tal manera que queden con 2,5 cm de fondo y 3,5 cm de tendido (medio
inclinado).
D. MEDIOS DE TRANSPORTE
PREPARACIÓN
MEDIO TRANSGROW – TG
Este medio está compuesto por agar Thayer Martin modificado al cual se le agrega bicarbonato de
amonio hasta lograr una concentración final de 0,1 %.
MÉTODOS
A. MÉTODO POR INOCULACIÓN EN MEDIO LÍQUIDO
Una vez sembrada, se rotula correctamente para identificarla y se incuba a 37 °C. Algunos
microorganismos requieren atmósfera con un 3 - 5% de CO2 Y otros como los anaerobios que
requieren una atmósfera privada de oxígeno (O2).
En ocasiones esta descripción puede llevar al diagnóstico presuntivo del género y especie de que
se trata.
Posteriormente de una de las colonias, se debe hacer una coloración Gram para determinar:
Morfología.
Característica de la tinción.
Agrupación.
El aislamiento y pureza de la cepa aislada son indispensables. Debe pasarse a distintos sustratos
para:
UROCULTIVO
Los cultivos son esenciales para determinar la identidad y cantidad exacta de las bacterias y para
reconocer si los microorganismos encontrados en una muestra son patógenos o inocuos (no
afectan la salud del hombre y se llaman también "saprofitos").
Para hacer el cultivo de la orina, llamado también urocultivo, el paciente no debe haber recibido
antibióticos por lo menos cinco días antes del examen.
Los cultivos sirven para aislar microorganismos que se encuentran en escasa cantidad y decidir
cuál será el antibiótico más efectivo en el tratamiento de la infección (antibiograma).
E. coli.
Pseudomona aeruginosa.
Enterococo.
Citrobacter.
Klebsiella.
Se acepta que un recuento superior de 100 000 bacterias por mL de orina, indica infección de las
vías urinarias.
MATERIALES
Muestra de orina.
Microscopio.
Placas de agar Mac Conkey.
Placas de agar sangre.
Asa de siembra estándar (calibrada)
MÉTODO
Tomar la orina sin centrifugar, con el asa de siembra calibrada, es decir, que cada asada
suministre 0,01 o 0,001 mL de orina.
Sembrar la orina por dispersión- agotamiento con un asa de siembra calibrada, sobre una
placa de agar sangre y otra sobre una placa de agar de Mac Conkey.
Rotular e incubar a 37 °C.
LECTURA E INTERPRETACIÓN
Detallar las características de las colonias en el agar Mac Conkey y el agar sangre. Seleccionar
colonias del agar Mac Conkey y replicar (resembrar) en los medios de diferenciación bioquímica
(TSI, citrato, úrea, etc.)
Las interpretaciones se harán de acuerdo con las reacciones bioquímicas de las enterobacterias
(ver Anexos).
Cuando el número de colonias sobrepasa el número de 100 000 bacterias por mL de orina, al
informar no interesa precisar el número exacto de bacterias, solo debe informarse "más de
100 000 bacterias por mL de orina".
HEMOCULTIVOS
PRINCIPIOS GENERALES
Infusión corazón-cerebro con agar, este medio permite el desarrollo de bacterias tanto
aerobias como anaerobias
El caldo de tioglicolato, que se emplea principalmente para cultivar bacterias anaerobias
OBTENCIÓN DE LA MUESTRA
Retirar una gota del hemocultivo positivo con todas las precauciones de asepsia,
utilizando una jeringa pequeña, con este material se siembra.
Sembrar en medios de agar sangre, y otros medios selectivos dependiendo de los
resultados de la coloración Gram. Ejemplo: medio de agar Mac- Conkey, para investigar la
presencia de microorganismos entéricos gramnegativos. Las placas deben incubarse tanto
bajo condiciones aerobias como anaerobias (ver Anexos).
Una vez que se han logrado colonias aisladas, debe determinarse su identificación.
Los resultados, tanto positivos como negativos, deben comunicarse lo antes posible al médico que
lo solicitó.
Streptococcus viridans.
Streptococcus pyogenes.
Staphilococcus aureus y albus.
Diplococcus pnemoniae.
Neisseria meningitidis.
Brucella sp.
Proteus-providence.
Enterococos.
Estreptococcos anaerobios.
Salmonella sp.
Pasteurella tularensis.
Leptospira sp.
Streptobacillus monilifonnis.
Escherichia.
Citrobacter
Klebsiella.
Haemophilus influenzae. (minsa, s.f.)
COPROCULTIVOS
PRINCIPIOS GENERALES
Cada muestra debe contener, por lo menos 4 mL (4 cm3 ). Esta es necesaria para facilitar la
detección de los parásitos cuando se encuentran poco concentrados.
MATERIALES
MÉTODO DE OBTENCIÓN
A. EXAMEN PARASITOLÓGICO
B. EXAMEN BACTERIOLÓGICO
En el caso de niño su otros pacientes que tengan problemas en la recolección de muestra, obtenerla
directamente, introduciendo en el recto un hisopo previamente embebido en el espesor del medio de
transporte que se va usar y luego se introduce en el recto. Una vez que está dentro del recto (alrededor
de 3 cm), aplicar un movimiento de rotación amplio al hisopo para arrastrar mucosidad de la pared de la
ampolla rectal y luego un movimiento circular pequeño para arrastrar deposición.
MÉTODO
Colocar el hisopo con la muestra en un tubo estéril o en el tercio superior del tubo con medio de
transporte.
Cortar la porción sobrante del palo del hisopo y ajustar fuertemente la tapa del tubo.
La parasitología médica es el estudio de los parásitos que causan enfermedades al ser humano.
Los helmintos adultos, que son llevados al laboratorio para ser identificados, se pueden haber recogido
de las heces, la ropa personal o de la cama, o durante una operación quirúrgica.
Se debe anotar:
Su longitud.
Su forma.
Color: rosáceo.
Grosor: 0,3 - 0,5 cm. Longitud: macho: 15 cm (con cola en forma de bucle). hembra: 20 - 25 cm (con
cola recta).
b. Oxiuros Frecuente en heces de niños. También se pueden hallar en los pliegues de la piel que
rodea el ano. Helmintos redondos pequeños
Color: blanco. Longitud: macho: 0,5 cm. hembra: 1 cm (de cola puntiaguda). Capítulo VI Parasitogía y
micología 251
Tenias Color: marfil o azul pálido. Longitud: 3 - 10 m (para el examen por lo general llegan los
segmentos maduros separados, de longitud variable).
Tenias frecuentes
PRINCIPIOS GENERALES
Si en el laboratorio se recibe muchas muestras en el mismo día, comenzar por examinar las más
líquidas.
Examinar heces frescas de menos de una hora de eliminadas. Esto aumenta la posibilidad de
encontrar amebas.
Elegir, preferentemente, para el examen directo una porción de la superficie de la muestra donde
se encuentre el moco.
Examinar en una solución de cloruro de sodio u observar directamente con el microscopio cuando
las heces son muy líquidas.
Los trofozoítos se inmovilizan en solución de yodo y puede ser difícil diferenciar entre trofozoítos
y quistes.
En las heces líquidas los depósitos de moco frecuentemente contienen grupos numerosos de
Giardia lamblia.
Si las heces se dejan expuestas al aire en un recipiente sin tapa pueden caer en ellas
microorganismos de la atmósfera, como los infusorios. Estos son muy semejantes a Balantidium
coli.
MATERIALES
Portaobjetos o láminas.
Cubreobjetos o laminillas.
Aplicadores de madera.
Solución yodurada de lugo
Solución salina o de cloruro de sodio.
Un microscopio.
Lápiz de cera.
MÉTODO
En un portaobjetos colocar
Una gota de solución salina o de cloruro de sodio, en la mitad del lado izquierdo del
portaobjetos.
Una gota de solución yodurada de Lugol, en la mitad del lado derecho del portaobjetos.
Tomar 1 - 2 mg de material fecal (de preferencia de la parte profunda de la muestra y si
hay moco, elegir esta porción) con el aplicador de madera.
Mezclar la porción tomada de la muestra con la gota de solución salina o de cloruro de
sodio.
Tomar otra porción de la muestra y mezclarla con la gota de solución yodurada.
Colocar un cubreobjeto sobre cada gota.
Con el lápiz de cera marcar el número de la muestra en el portaobjetos.
Examinar las preparaciones con el microscopio con objetivos de 10x y 40x, comenzando
en el ángulo superior izquierdo del cubreobjeto.
Observar con atención las formas, recordando que los quistes y trofozoítos de los
protozoarios se observan en forma natural en el lado sin colorear (solución salina o de
cloruro de sodio).
Las estructuras internas (núcleos, vacuolas, etc.) se observan en las tinciones con solución
yodurada de lugol.
Suele encontrarse como elementos normales, estructuras pertenecientes a la ingestión de
alimentos, como fibras vegetales, granos de almidón, esporas de hongos, granos de polen,
fibras musculares lisas o estriadas, cristales de ácidos grasos, cristales de oxalato de
calcio, etc. Capítulo VI Parasitogía y micología
Sus huevos se recogen de los pliegues de la piel que rodea al ano, porque raras veces se hallan en las
materias fecales.
MATERIALES
MÉTODO
l. Obtenida la muestra por el método de la cinta adhesiva, esta queda lista para mirarla al microscopio.
2. Si la muestra es obtenida usando un hisopo de algodón aspirar la solución de cloruro de sodio (donde
ha sido sumergido el hisopo) con una pipeta de Pasteur. Colocar una gota en el portaobjeto, poner un
cubreobjeto encima de la gota y queda lista para mirarla al microscopio.
3. Observar con el microscopio utilizando objetivo de 10x, en busca de los huevos de Enterobius
vermicularis.
Es una técnica mixta de centrifugación y flotación que concentra quistes y huevos con la solución
de sulfato de zinc.
El método permite concentrar los quistes, los huevecillos y las larvas.
MATERIALES
Colocar el tubo centrifugado en una gradilla, llenándolo con el sulfato de zinc hasta el borde del
tubo y colocar encima un cubreobjetos, dejar en reposo por 15 minutos. Después de los 15
minutos, sacar el cubreobjetos, levantándolo. Colocarlo en un portaobjetos con una gota de lugol
y observarlo al microscopio con objetivos de 10x y 40x.
MÉTODO
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
Podemos concluir diciendo que una correcta toma de muestras es un paso clave para la obtención
de óptimos datos de laboratorio. Siguiendo las indicaciones anteriores, se pretende disminuir el
número de muestras rechazadas, evitando el riesgo de malas interpretaciones en el diagnóstico
de los pacientes y las molestias ocasionadas a los pacientes por la repetición de pruebas
analíticas.
Si sea realizado algún examen de radiología con medio de contraste, no se realice ningún
examen de laboratorio clínico hasta después de tres días.
No realice ninguna actividad física (trotar, correr, hacer deportes, ejercicios) antes de
realizar los exámenes.
Las muestras que entrega en el laboratorio clínico, deben estar marcadas con el nombre
completo del paciente a quien pertenecen.
No realice ninguna actividad física (trotar, correr, hacer deportes, ejercicios) antes de
realizar los exámenes.
Si sea realizado algún examen de radiología con medio de contraste, no se realice ningún
examen de laboratorio clínico hasta después de tres días.
Las muestras que entrega en el laboratorio clínico, deben estar marcadas con el nombre
completo del paciente a quien pertenecen.
Bibliografía
(s.f.). Obtenido de http://bvs.minsa.gob.pe/local/minsa/3187-2.PDF
(s.f.). Obtenido de
https://antimicrobianos.ins.gob.pe/images/contenido/documentos/nacionales/
Manual___Procedimientos__Bacteriologicos__IIH.pdf