Dokumen tersebut memberikan informasi tentang prosedur inokulasi virus pada telur berembrio untuk tujuan isolasi dan identifikasi virus. Inokulasi dilakukan melalui membran korioalantois pada telur berembrio umur 11-13 hari untuk menumbuhkan virus-virus epiteliotrofik seperti virus Marek dan Gumboro. Pertumbuhan virus ditandai dengan munculnya pocks pada membran tersebut.
0 penilaian0% menganggap dokumen ini bermanfaat (0 suara)
34 tayangan20 halaman
Dokumen tersebut memberikan informasi tentang prosedur inokulasi virus pada telur berembrio untuk tujuan isolasi dan identifikasi virus. Inokulasi dilakukan melalui membran korioalantois pada telur berembrio umur 11-13 hari untuk menumbuhkan virus-virus epiteliotrofik seperti virus Marek dan Gumboro. Pertumbuhan virus ditandai dengan munculnya pocks pada membran tersebut.
Dokumen tersebut memberikan informasi tentang prosedur inokulasi virus pada telur berembrio untuk tujuan isolasi dan identifikasi virus. Inokulasi dilakukan melalui membran korioalantois pada telur berembrio umur 11-13 hari untuk menumbuhkan virus-virus epiteliotrofik seperti virus Marek dan Gumboro. Pertumbuhan virus ditandai dengan munculnya pocks pada membran tersebut.
Dokumen tersebut memberikan informasi tentang prosedur inokulasi virus pada telur berembrio untuk tujuan isolasi dan identifikasi virus. Inokulasi dilakukan melalui membran korioalantois pada telur berembrio umur 11-13 hari untuk menumbuhkan virus-virus epiteliotrofik seperti virus Marek dan Gumboro. Pertumbuhan virus ditandai dengan munculnya pocks pada membran tersebut.
Unduh sebagai PDF, TXT atau baca online dari Scribd
Unduh sebagai pdf atau txt
Anda di halaman 1/ 20
PEMERIKSAAN VIRUS PADA
TELUR BEREMBRIO (INOKULASI PADA MEMBRAN CHORIOALLATOIC) Oleh : Kelompok 3 - 3B D3 TLM ANGGOTA KELOMPOK 1. AMANDA FATMA NUGRAHA (PO7134121050) 2. DESTINA (PO7134121058) 3. HELDI JOCELIN (PO7134121063) 4. JELA AYUNI (PO7134121064) 5. LUTFIAH RAMADHANI (PO7134121067) 6. NOVA ANGGRIANI (PO7134121047) 7. NURLAILA (PO7134121048) 8. RINI PERMATA SARI (PO7134121081) 9. WIDYA CAPRINA (PO7134121052) LATAR BELAKANG Virus dapat di biakkan dalam media kultur jaringan atau dalam telur berembrio dengan kondisi lingkungan yang dikendalikan (Jawetz, 1996). Virus akan melakukan replikasi menggunakan komponen makromolekular untuk mengambil energi sel hospes sehingga fungsi sel hospes terganggu (Radji, 2010). Telur berembrio seperti telur ayam berembrio (TAB) telah lama digunakan sebagai media isolasi virus. Metode pengujian invivo merupakan salah satu media penumbuh berbagai macam virus yang memiliki keunggulan dibandingkan pengujian in vitro dengan menggunakan kultur sel karena tidak membutuhkan media dan kondisi laboratorium yang sulit ( Murtini dkk ., 2006) INOKULASI VIRUS
Inokulasi adalah tindakan menanamkan patogen atau mikroba atau virus ke dalam organisme lain. Ini adalah metode yang secara artifisial menginduksi kekebalan terhadap berbagai penyakit menular. Istilah "inokulasi" juga digunakan secara lebih umum untuk merujuk pada penyimpanan mikroba secara sengaja ke dalam media pertumbuhan apa pun. INOKULASI VIRUS
Virus adalah mikroorganisme yang hidup secara obligat intra seluler, oleh karena itu cara pembiakannya lebih sulit daripada pembiakan bakteri. Ada tiga cara yang umum digunakan untuk membiakkan virus yaitu dengan inokulasi pada hewan percobaan, inokulasi pada telur berembrio, inokulasi pada biakan jaringan.
a. Pembiakan virus dengan hewan percobaan (In vivo)
b. Pembiakan virus pada kultur jaringan (In vitro) c. Pembiakan virus dalam telur berembrio (In ovo) INOKULASI PADA TELUR BEREMBRIO Beberapa jenis virus dapat dibiakkan pada sel-sel yang membungkus rongga telur berembrio atau pada embrio yang sedang tumbuh itu sendiri. Untuk mencegah masuknya bakteri, lapisan lilin diluar dinding telur hanya boleh disikat, tidak boleh dicuci dengan sabun. Umur telur berembrio, suhu dan lamanya pengeraman serta cara penyuntikan yang bermacam-macam tergantung kepada jenis virus yang akan dibiakkan atau diisolasi. INOKULASI PADA CHORIO ALLANTOIS MEMBRANE (CAM) Inokulasi pada Chorio Allantois Membrane (CAM): Inokulasi melalui membrane korioalantois dilakukan untuk mengisolasi virus -virus yang bersifat epiteliotrofik, misalnya: virus Marek, Gumboro, Distemper, Pox, Variola, Vaccinia Biasanya pertumbuhan virus bersifat lambat yang ditandai dengan pembentukan pock pada CAM. Pada Fowl pox, Variola, Vaccinia dan Cowpox terbentuk pocs khas untuk masing- masing virus. Sedangkan pada Herpes simplex membentuk plaque Pocks adalah bintik-bintik putih berbentuk bundar dan menonjol pada permukaan CAM. Plaques adalah bintik-bintik putih berbentuk bundar yang sangat datar dan transparan. INOKULASI PADA CHORIO ALLANTOIS MEMBRANE (CAM) Sifat pocks dan plaques dari beberapa virus : 1. Sifat pocks virus variola: bentuk bundar, diameter kira-kira 1 mm, berwarna putih keruh, menonjol pada permukaan CAM. 2. Sifat pocks Virus Vaccinia: berwarna putih jernih, berukuran besar, tidak begitu menonjol pada permukaan CAM. 3. Sifat pocks Virus Cowpox: Ukurannya sama dengan pocks Virus Vaccinia, warnanya putih yang ditengahnya terdapat warna merah karena adanya perdarahan. INOKULASI PADA CHORIO ALLANTOIS MEMBRANE (CAM) Sifat pocks dan plaques dari beberapa virus : 4. Sifat pocks Virus Fowlpox: Ukurannya jauh lebih besar dari pocks Virus Vaccinia tetapi lebih menonjol pada permukaan CAM. 5. Sifat plaques Virus Herpes simplex: Warnanya sama dengan pocks Vaccinia tetapi sama sekali tidak menonjol pada permukaan CAM dan transparan, ukurannya lebih kecil dari pocks Variola. PROSEDUR INOKULASI VIRUS PADA TELUR BEREMBRIO
A. Persiapan telur ayam
Telur Ayam dibersihkan permukaan kerabangnya. Kemudian ditata dengan rapi, inkubasi pada suhu 37°C. Pada hari ketiga telur diteropong dengan senter candling untuk memisahkan telur yang fertil dengan yang steril. Bagian yang berlawanan dengan kepala embrio diberi tanda dengan menggunakan pensil untuk memudahkan proses inokulasi virus. Telur diinkubasi lagi hingga hari ketujuh sebelum diinokulasikan sampel virus. PROSEDUR INOKULASI VIRUS PADA TELUR BEREMBRIO
B. Pembuatan Inokulum Sampel dan Spesimen unggas yang akan diidentifikasi jenis virusnya disiapkan, untuk sampel swab bisa. langsung diambil suspensinya sementara untuk isolat yang akan dilanjutkan ke tahapan passage 2 bisa langsung diinokulasikan ke telur. Sampel dagan dihancurkan kemudian ditambah dengan larutan Phosfat Buffer Saline (PBS) kemudian diambil supernatannya untuk diinokulasikan kedalam telur.. PROSEDUR INOKULASI VIRUS PADA TELUR BEREMBRIO C. Inokulasi Virus Melalui Membran Chorioallantois (CAM)
1. Telur dipilih yang fertile dan berumur 11-13 hari
2. Dilakukan candling dan ditandai ruang udaranya dengan pensil 3. Dibuat satu tanda (x) dibagian horizontal yang dekat dengan pembuluh darah. 4. Kulit telur didesinfeksi dengan alkohol 70 % kemudian dibuat lubang pada posisi ruang udara alami dengan menggunakan jarum penusuk steril. 5. Dibuat lubang satu lagi di bagian horizontal yang telah diberikan tanda PROSEDUR INOKULASI VIRUS PADA TELUR BEREMBRIO 6. Gambar dibawah ini Jalur Inokulasi Virus kedalam Telur Berembrio. Lubang penyuntikkan kemudian ditutup menggunakan kuteks. Telur kemudian diinkubasi pada suhu 37°C. Setiap 1x24 jam telur diperiksa dengan senter candling untuk mengetahui jika ada telur yang mati. Telur yang mati kemudian dimasukkan kedalam lemari es sebelum dilakukan pemanenan. PEMANENAN VIRUS PADA CAM
Telur dikeluarkan dari almari pendingin, lalu kulit telur digunting melingkar secara horizontal. Embrio dikeluarkan dari cangkang telur dan ditampung pada cawan petri steril Ambil selaput CAM yang menempel pada cangkang telur danditempatkan pada cawan petri lain yang telah diisi PBS. CAM dicuci dengan PBS, digoyang-goyangkan sampai bersih dan diamati adanya bentuk pox pada CAM, Bagian CAM yang terinfeksi (bentuk pox) kemudian dipotong dan disimpan untuk bahan uji. FAKTOR-FAKTOR YANG MENENTUKAN KEBERHASILAN INOKULASI PADA EMBRIO AYAM Faktor-faktor yang menentukan keberhasilan inokulasi pada embrio ayam menurut (Williamson et al., 1953) adalah sebagai berikut ; 1. Rute inokulasi 2. Strain virus 3. Titer virus 4. Tahap perkembangan embrio KESIMPULAN Inokulasi adalah tindakan menanamkan patogen atau mikroba atau virus lain ke dalam seseorang atau organisme lain. Inokulasi melalui membrane korioalantois dilakukan untuk mengisolasi virus -virus yang bersifat epiteliotrofik, misalnya: virus Marek, Gumboro, Distemper, Pox, Variola, Vaccinia Biasanya pertumbuhan virus bersifat lambat yang ditandai dengan pembentukan pox pada CAM. VIDEO PEMERIKSAAN https://youtu.be/etF6YUE65dE?si=i7WkWVUUnggYo7Tb https://youtu.be/330DKCuNm4Q?si=VhZSfpEO87f5qLBn https://youtu.be/Opt6_pxDQDE?si=2WSjRPPt1Dz8YlPS TERIMA KASIH! Kelompok 3 APAKAH ADA PERTANYAAN ??
