Imunocromatografia

Popularmente conhecido como teste rápido. É um tipo de teste que identifica doenças infecciosas, hormônios e outros
analitos, por associação específica a anticorpos com partículas coloridas conjugadas. Geralmente considera a presença de
antígenos na amostra.
Como funciona o teste de imunocromatografia?
O primeiro passo para a realização de um teste
imunocromatográfico é a coleta da amostra, que pode ser
de sangue, saliva, soro, plasma, secreção da nasofaringe,
urina, etc..
Essa amostra é depositada no local indicado do exame
(uma membrana de nitrocelulose no formato de fita,
impregnada em cada trecho com antígenos específicos,
reage com a amostra coletada para o exame) junto com Imunocromatografia de dupla migração
uma solução-tampão (uma solução aquosa capaz de A imunocromatografia de dupla migração é semelhante à
resistir a mudanças de pH) e aguardar o tempo de reação. anterior, mas a realização do exame possui uma diferença.
A amostra e a solução-tampão são colocadas no mesmo
O resultado é demonstrado através do surgimento de local (área 1) mas um segundo tampão que libera as
marcadores coloridos na membrana de nitrocelulose ou partículas conjugadas é aplicado em outra área e migra
nylon que possui áreas reagentes e outras bloqueadas com separadamente até a janela de leitura do teste.
proteína inerte. O analito reage nos locais correspondentes,
formando um padrão que deve ser lido e interpretado pelo
profissional da saúde, ou de acordo com as instruções do
fabricante.

Atualmente existem quatro principais tipos de testes

imunocromatográficos disponíveis no Brasil:

 Imunocromatografia de fluxo lateral

 Imunocromatografia de dupla migração
 Teste por aglutinação
Testes por imunoconcentração
 Teste por fase sólida
Neste tipo de exame,
o resultado é obtido
Imunocromatografia de fluxo lateral
por meio de uma
O mostrador desse tipo de exame possui dois marcadores: reação que apresenta
controle (C) e teste (T). A interpretação do resultado leva a concentração de
em consideração o aparecimento de linhas nos anticorpos, que irão se
marcadores C e T, indicando se houve ou não reação. ligar uns aos outros,
formando um
Nesse caso, a amostra e a solução-tampão são colocadas complexo. Novamente,
no mesmo lugar, uma sobre a outra. Dali, os anticorpos temos os mostradores
fluem lateralmente pela membrana com a solução controle (C) e teste
reagente, interagindo com os marcadores C e T. Na área (T), que aqui são representados por pontos. O
T, eles ligam-se ao analito investigado. Na área C, são aparecimento dos pontos nas áreas específicas indica se
capturados por anticorpos anti-imunoglobulina. houve ou não reação.

Testes rápidos por aglutinação

Esta é uma testagem mais simples, apresenta uma reação
que pode ser observada a olho nu. As amostras são
colocadas em suspensão junto com antígenos, dispostos
em uma substância que pode ser gelatina ou látex. Após Inválido: Um teste de imunocromatografia apresenta
30 a 90 minutos, caso os anticorpos reajam aos antígenos, resultado inválido quando nenhuma reação é detectada: A
eles irão se aglutinar, formando pequenas partículas linha controle (C) sempre precisa apresentar reação e ficar
agrupadas que são visíveis. visível. Caso ela não apareça, recomenda-se a execução
Como nem sempre os resultados são de fácil visualização, de um novo teste.
amostras fracamente reagentes e amostras não reagentes
são muito parecidas, o teste de aglutinação é de mais difícil Exame de HIV:
interpretação, o que pode comprometer a assertividade
do diagnóstico. HIV: O exame para o HIV é feito com o objetivo de
detectar a presença do vírus HIV no organismo e deve ser
Ex: PCR látex feito pelo menos 30 dias após a exposição a situações de
risco, como relações sexuais desprotegidas ou contato
com sangue ou secreções de pessoas portadoras do vírus
HIV.
O teste de HIV é simples e é feito principalmente por meio
da análise de uma amostra de sangue, mas também pode
Testes rápidos por fase sólida ser utilizada a saliva para verificar a presença do vírus no
Os testes por fase sólida organismo. Todos os testes de HIV pesquisam os dois tipos
utilizam uma metodologia de vírus existentes, o HIV 1 e o HIV 2.
conhecida como ELISA . O teste para o HIV deve ser realizado no mínimo 1 mês
Neste tipo de teste, é após o comportamento de risco, pois a janela imunológica,
utilizado um pente, com que corresponde ao tempo entre o contato com o vírus
12 dentes que carregam e a possibilidade de detecção do marcador da infecção, é
anticorpos, anti de 30 dias, podendo haver a liberação de um resultado
imunoglobulina humana e o antígeno da doença. Cada falso negativo caso o exame seja realizado antes dos 30
dente do pente é colocado em contato com a amostra dias.
extraída do paciente, para que seja observada uma Como entender o resultado?
possível reação, fruto do contato das imunoglobulinas Para entender o resultado do teste do HIV, é importante
(anticorpos) com as anti-imunoglobulinas. verificar se é reagente, não reagente ou indeterminado
Feito isso, o dente passa por um segundo recipiente, onde além dos valores indicados, pois normalmente quanto maior
entra em contato com um conjugado. Por fim, em um o valor, mais avançada é a infecção.
terceiro recipiente, que contém o substrato (cromógeno
+ peróxido de hidrogênio), ocorre a reação visível. A O exame de sangue para o HIV é feito com o objetivo de
presença de anticorpos – indicando que houve contato identificar a presença do vírus e a sua concentração no
com o vírus – será revelada pela formação de círculos sangue, dando informações sobre o estágio da infecção.
coloridos.
Resultados possíveis na imunocromatografia O teste de HIV pode ser feito por meio de vários métodos
Um teste imunocromatográfico pode ter 3 resultados laboratoriais de diagnóstico, sendo o mais utilizado o
possíveis: método de ELISA. Os possíveis resultados são:
Positivo / Reagente: o mostrador exibe duas linhas Reagente: Significa que a pessoa esteve em contato e se
visíveis, uma na região controle (C) e outra na região teste contaminou com o vírus da AIDS;
(T). A intensidade de cor da linha teste (T) pode variar de Não reagente: Significa que a pessoa não está
acordo com a concentração de antígeno detectada na contaminada com o vírus da AIDS;
amostra, mas se a linha é visível, em qualquer intensidade, Indeterminado: É preciso repetir o teste porque a
indica reação, ou seja, presença do analito e resultado amostra não foi clara o suficiente. Algumas situações que
positivo. levam a este tipo de resultado são a gravidez e vacinação
recente.
Negativo / Não reagente: Quando temos resultado não Em caso de resultado positivo para HIV o próprio
reagente, identifica-se apenas uma linha visível no laboratório utiliza outros métodos para confirmar a
mostrador, na região controle (C). O marcador teste (T) presença do vírus no organismo, como o Western Blot,
não sofre alteração, indicando ausência do analito.
 Immunoblotting, Imunofluorescência indireta para o HIV-1.  Se os resultados do HBsAg e o Anti-HBc apresentam
Assim, o resultado positivo é mesmo confiável. resultados negativos o resultado indica que o indivíduo
não está infectado.
Positivo: Indica que a pessoa tem o vírus HIV mas deve
realizar o exame de sangue ELISA para confirmar o
Exame de Beta HCG:
resultado;
Negativo: Indica que a pessoa não está contaminada
com o vírus HIV. Beta HCG: O BHCG quantitativo é um exame de sangue
capaz de detectar a quantidade do hormônio HCG no
Exame de HbsAg: sangue e se há indícios de gravidez. Além disso, o exame
O HBsAg é a substância presente na superfície do vírus também pode indicar de quanto tempo é a gestação e se
da hepatite B que pode ser detectada em exame de a gravidez está indo conforme o esperado.
sangue de pessoa infectada.
O HCG é um hormônio que se eleva bastante durante a
Assim, o exame HBsAg positivo indica infecção pelo vírus gestação porém não é exclusivo da gravidez. Se você não
da hepatite B. Se persistir alterado por 6 meses, o indivíduo suspeita de gravidez ou em homens a elevação do HCG
é considerado portador de hepatite B crônica. deve ser avaliada por um especialista.
Os dois primeiros marcadores utilizados na triagem para o
diagnóstico da hepatite B são HBsAg e o anti-HBc total. O Como entender o resultado?
antígeno HBsAg surge logo após acontecer a infecção, BhCG abaixo de 5 mIU/ml: resultado negativo, não há
entre 30 e 45 dias. Pode permanecer detectável por até indício de gravidez.
120 dias e se encontra presente nas infecções agudas e
crônicas. O antícorpo anti-HBc indica que o indivíduo teve BhCG entre 5 e 25 mIU/ml: resultado indefinido. É
contato com o vírus e o resultado positivo vai permanecer
por toda a vida, estejam curados ou continuem infectados recomendado repetir o exame após três dias para ter
certeza sobre a gestação.
de forma crônica.
BhCG acima de 25 mIU/ml: resultado positivo, indica
Como entender o resultado?
gravidez.
 Se o resultado do HBsAg é positivo e o Anti-
HBc é negativo, o indivíduo foi recentemente infectado
(fase aguda), assim, como pode se tratar de um
resultado falso positivo, motivo pelo qual se recomenda
repetir os dois exames após 15 dias.

 HBsAg e Anti-HBc - positivos = indicação de uma

infecção aguda (recente) ou já a doença estabelecida na
forma crônica (doença existente por mais de seis meses).
O médico vai solicitar um exame chamado ANTI-HBc
IgM para diferenciar o estagio da infecção.

 HBsAg e negativo e Anti-HBc positivo = indicação de

infectação recente e se encontra na chamada janela
imunológica (primeiros dias após o contagio quando ainda
não se apresentam anticorpos detectáveis) ou, também,
pode ser um resultado falso positivo, ou se tratar de um
paciente que curou a doença espontaneamente. O
médico vai solicitar um exame chamado ANTI-HBs para
diferenciar o estado em que se encontra o paciente.