Cours 7 Transgenese Final

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Cours 7

Transgénèse
Techniques de la transgénèse

• Micro-injection (pronucléus male )


• Injection intra-cytoplasmique de spermatozoïdes (ICSI)
• Transfert de Cellules souches embryonnaires (ES)
• Transfert de noyaux de cellules somatiques (TNCS)

,,,etc.
Micro-injection
(pronucléus male )

La micro-injection est la technique la plus populaire pour créer des animaux transgéniques.
Dans cette technique, l'ADN recombinant (transgène) est inséré dans le pronucléus mâle. Tout
d'abord, des ovules sont prélevés a partir des femelles en superovulation, puis fécondés in vitro.
L'ovule fraîchement fécondé est maintenu stable par un dispositif d'aspiration , et une solution
contenant 200 à 300 copies de l'ADN recombinant est injectée à l'aide d'une micropipette.

L'ADN recombinant est injecté dans le pronucléus mâle car il est plus
grand que le pronucléus femelle

Source : (Nishu et al , 2020)


Micro-injection
(pronucléus male )

(1 ère technique)
Intracytoplasmic sperm injection (ICSI)
L'injection intracytoplasmique de spermatozoïdes (ICSI)

L'injection intracytoplasmique de spermatozoïdes (ICSI) présente une plus grande efficacité de


transfert d'ADN étranger dans le génome de l'hôte que l'injection pronucléaire.
Dans cette méthode, les spermatozoïdes animaux sont démembrané et incubés avec de l'ADN
transgénique . le complexe est injecté dans des ovocytes matures en métaphase II , ce qui permet au
transgène d'être incorporé dans le génome embryonnaire via le mécanisme de réparation de
l'ADN.

Source : (Volobueva et al., 2019)


Représentation Schématique de la technique (ICSI)

Source: (Ilaria Sciamanna and Corrado Spadafora ,2012)


Embryonic stem (ES) cells
Les cellules souches embryonnaires (ES)

Les cellules souches embryonnaires (ES) peuvent également être utilisées pour la transgénèse.
L'ADN exogène est introduit dans les cellules souches, après des étapes de propagation et de
sélection des cellules. Ensuite, les cellules ES génétiquement modifiées sont introduites dans
l'embryon, par exemple en les injectant dans un blastocyste .
Ces méthodes ont été utilisées pour créer des modèles de souris

Source : (Volobueva et al., 2019)


Somatic cell nuclear transfer (SCNT)
Le transfert de noyaux de cellules somatiques (TNCS)

Le transfert de noyaux de cellules somatiques (TNCS) demeure la méthode la plus populaire


pour la production de animaux transgéniques.
Le TNCS implique la génération de cellules somatiques modifiées (généralement des fibroblastes),
qui sont ensuite fusionnées avec l'ovocyte énuclé pour relancer le développement de l'embryon.
Les embryons génétiquement modifiés sont ensuite transférés dans les oviductes des animaux
receveurs.

Source : (Volobueva et al., 2019)


Exemple :
Microinjection et Transfert de cellules
souches embryonnaires
Molecular tools for gene editing
Les outils moléculaires pour l'Edition du gène

Les recombinases, les nucléases et les protéines accessoires sont


des outils naturels ou créés artificiellement pour l'édition de gènes,

Source : (Volobueva et al., 2019)


Molecular tools for gene editing
Les outils moléculaires pour l'Edition du gène

Source : (Volobueva et al., 2019)


Exemples d’animaux
Transgeniques Produits
Mammifères

Aviens

Amphibiens

Poissons

Invertébrés

Source: Miguel et al ,2009


« animal transgenesis :an overview »
Applications of transgenic Animals Animaux transgéniques comme model pour
Les applications des animaux transgéniques étudier les maladies (disease models)
Ex:
- Oncomouse
- AIDS mouse
- Alzheimer’s mouse
- ANDi (monkey)
- Parkinson’s fly
- Doogie (the smart mouse)
- Supermouse
- Youth mouse
- Influenza-resistant mouse

animaux transgéniques comme des


xénotransplanteurs (xenotransplanters)

Animaux transgéniques comme source de


nourriture (Food source),

,,,etc. Animaux transgéniques pour la production de


médicaments , production industrielle,
Source :(Nishu et al., 2020)
Applications of transgenic Animals
Les applications des animaux transgéniques

Poisson génétiquement modifié !

fluorescence?

GloFish®
Transgénèse Animale Transgénèse Végétale
Transgénèse végétale
NEXT
Mlle ATTAOUI ,FZ
Diplômée de l'école supérieure en sciences biologiques d’ORAN
Doctorante à l’UHBC , biotechnologie microbienne
Email :fzahrzabio22@gmail.com

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