1

ENZIMAS

Ivanise Correia da Silva Mota

icivanise700@gmail.com
 2

ENZIMAS - HISTÓRICO

Catálise biológica  início séc. XIX

 digestão da carne: estômago
 digestão do amido: saliva
Década de 50
 Louis Pasteur - concluiu que a fermentação do
açúcar em álcool pela levedura era catalisada
por “fermentos” = enzimas.
Eduard Buchner (1897)
 extratos de levedo podiam fermentar o açúcar
até álcool;
 enzimas funcionavam mesmo quando removidas
da célula viva.
 3

ENZIMAS - HISTÓRICO
James Sumner (1926)
 Isolou e cristalizou a urease;
 Cristais eram de proteínas;
 Postulou que “todas as enzimas são proteínas”.

John Northrop (década 30)

 Cristalizou a pepsina e a tripsina bovinas;

Década de 50 – séc. XX
 75 enzimas  isoladas e cristalizadas;
 Ficou evidenciado caráter proteico .
 Atualmente - Mais de 2000 enzimas são
conhecidas.
 4

Aminoácidos:
ENZIMAS
H

Definição:
 Catalisadores biológicos; R C* COOH

 Longas cadeias de pequenas moléculas

chamadas aminoácidos.
NH2
Função:
 Viabilizar a atividade das células, quebrando
moléculas ou juntando-as para formar novos
compostos.
Com exceção de um pequeno grupo de
moléculas de RNA com propriedades catalíticas,
chamadas de RIBOZIMAS, todas as enzimas são
PROTEÍNAS.
 5

ENZIMAS – PROTEÍNA

Classificação proteínas

Proteínas globulares Proteínas fibrosas

Estrutura das proteínas

Primaria Secundaria Terciária Quaternária

ENZIMAS
Proteínas com alto peso
Proteínas globulares molecular, maioria entre 15 a
1000 Kilo Daltons Unit (KD)
OBS: 1 Dalton = 1 unidade de
peso molecular (AMU)
Estrutura terciária
 6

ENZIMAS – ESTRUTURA
Estrutura Holoenzima
Enzimática

Proteína Cofator

Ribozimas
Apoenzima ou Pode ser:
Apoproteína • íon inorgânico
• molécula orgânic
RNA
Coenzima
Se covalente
Grupo Prostético
 7

ENZIMAS – CARACTERÍSTICAS GERAIS

Apresentam alto grau de especificidade;

São produtos naturais biológicos;
Reações baratas e seguras;
São altamente eficientes, acelerando a
velocidade das reações;
São econômicas, reduzindo a energia de
ativação;
Não são tóxicas;
Condições favoráveis de pH, temperatura,
polaridade do solvente e força iônica.
 8

ENZIMAS – NOMENCLATURA

Século XIX - poucas enzimas identificadas

- Adição do sufixo ”ASE” ao nome do substrato:

* gorduras (lipo - grego) – LIPASE

* amido (amylon - grego) – AMILASE

- Nomes arbitrários:
* Tripsina e pepsina – proteases
 Enzimas – nomenclatura
Existem 3 métodos para nomenclatura
enzimática:

Nome Recomendado: Mais simples; usa o sufixo

"ase" para caracterizar a enzima. Ex: Urease,
Hexoquinase, Peptidase, etc.

Nome Sistemático: Mais complexo, relata

informações precisas sobre a função metabólica da
enzima. Ex: ATP-Glicose-Fosfo-Transferase

Nome Usual : Consagrado pelo uso. Ex: Tripsina,

Pepsina, Ptialina.
Enzimas - CLASSIFICAÇÃO

Oxidoredutases: São enzimas que

catalisam reações de transferência de
elétrons, ou seja: reações de oxi-redução.
Ex.: Desidrogenases e Oxidases.

Se uma molécula se reduz, tem que haver

outra que se oxide.
Enzimas
 Transferases : Enzimas que
catalisam reações de transferência
de grupamentos funcionais como
grupos amina, fosfato, acil, carboxil,
etc. Ex.: Quinases e Transaminases
 Enzimas

 Hidrolases : Catalisam reações

de hidrólise de ligação
covalente. Ex: Peptidases.
Enzimas
 Liases: Catalisam a quebra de
ligações covalentes e a remoção de
moléculas de água, amônia e gás
carbônico. Ex.: Dehidratases e
Descarboxilases.
Enzimas
 Isomerases: Catalisam reações de
interconversão entre isômeros
ópticos ou geométricos. Ex.:
Epimerases.
Enzimas
 Ligases: Catalisam reações de
formação e novas moléculas a
partir da ligação entre duas já
existentes, às custas de
Energia(ATP).
Ex.:Sintetases.
 16

ENZIMAS – CATALISADORES
Aceleram reações químicas
Catalase
H2O2 H2O + O2
Ex: Decomposição do H2O2

Condições da Reação Energia livre de Ativação Velocidade

KJ/mol Kcal/mol Relativa

Sem catalisador 75,2 18,0 1

Platina 48,9 11,7 2,77 x 104

Enzima Catalase 23,0 5,5 6,51 x 108

 17

ENZIMAS – CATALISADORES
Não são consumidos na reação

Catalase
H2O2 H2O + O2

E+S E+P
 18

ENZIMAS – CATALISADORES
Não alteram o estado de equilíbrio
•Abaixam a energia de ativação;
•Keq não é afetado pela enzima.
Não apresenta efeito termodinâmico global
G não é afetada pela enzima.
Energia

Energia de ativação sem enzima

Energia de ativação com
Diferença entre S enzima
a energia livre P
de S e P

Caminho da Reação
 19

ENZIMAS
COMPONENTES DA REAÇÃO

E+S ES P+E

Substrato se liga ao
SÍTIO ATIVO
da enzima
 20

ENZIMAS – SÍTIO ATIVO

Região da molécula enzimática que participa
da reação com o substrato.
Pode possuir componentes não protéicos:cofatores.
Possui aminoácidos auxiliares e de contato.

Ativador:Íons inorgânicos
que condicionam a ação
Porção protéica catalítica das enzimas. Fe²+
Cofator
APOENZIMA Coenzima: molécula
orgânica complexa.NAD+

HOLOENZIMA
Grupamento
prostético
 21

ENZIMAS – COFATOR
 Algumas enzimas que contêm ou necessitam
de elementos inorgânicos como cofatores
ENZIMA COFATOR
PEROXIDASE Fe+2 ou Fe+3

CATALASE

CITOCROMO OXIDASE Cu+2

ÁLCOOL DESIDROGENASE Zn+2

HEXOQUINASE Mg+2

UREASE Ni+2
 22

ENZIMAS – COENZIMAS
 Maioria deriva de vitaminas hidrossolúveis
 Classificam-se: - transportadoras de hidrogênio
- transportadoras de
grupos químicos

 Transportadoras de hidrogênio
Coenzima Abreviatura Reação Origem
catalisada
Nicotinamida adenina NAD+ Oxi-redução Niacina ou
dinucleotídio Vitamina B3
Nicotinamida adenina NADP+ Oxi-redução Niacina ou
dinucleotídio fosfato Vitamina B3
Flavina adenina FAD Oxi-redução Riboflavina ou
dinucleotídio Vitamina B2
 23

ENZIMAS – COENZIMAS
 Transportadoras de grupos químicos
Coenzima Abrev. Reação catalisada Origem
Coenzima A CoA-SH Transferência de Pantotenato ou
grupo acil Vitamina B5
Biotina Transferência de Biotina ou
CO2 Vitamina H
Piridoxal fosfato PyF Transferência de Piridoxina ou
grupo amino Vitamina B6
Metilcobalamina Transferência de Cobalamina ou
unidades de carbono Vitamina B12
Tetrahidrofolato THF Transferência de Ácido fólico
unidades de carbono
Tiamina TPP Transferência de Tiamina ou
pirofosfato grupo aldeído Vitamina B1
 24

ENZIMAS
LIGAÇÃO ENZIMA - SUBSTRATO
Emil Fischer (1894): alto grau de especificidade das
enzimas originou  Chave-Fechadura , que considera
que a enzima possui sitio ativo complementar ao
substrato.
 25

ENZIMAS
LIGAÇÃO ENZIMA - SUBSTRATO

Koshland (1958): Encaixe Induzido , enzima e o o

substrato sofrem conformação para o encaixe. O
substrato é distorcido para conformação exata do
estado de transição.
 26

ENZIMAS
ATIVIDADE ENZIMÁTICA

Fatores que alteram a velocidade de reações

enzimáticas:
- pH;
- temperatura;
- concentração das enzimas;
- concentração dos substratos;
- presença de inibidores.
 27

ENZIMAS
INIBIÇÃO ENZIMÁTICA

 Qualquer substância que reduz a velocidade de uma

reação enzimática.

INIBIDORES

REVERSÍVEIS IRREVERSÍVEIS

COMPETITIVOS NÃO COMPETITIVOS INCOMPETITIVOS

 28

ENZIMAS
INIBIÇÃO COMPETITIVA
 Inibidor competitivo concorre com o S pelo sitio ativo da E
livre.
 I  análogo não metabolizável, derivado de um S
verdadeiro, S substituto da E ou um P da reação.
I compostos com estrutura
molecular lembra S

afinidade da enzima pelo

substrato

[substrato] necessária para

obter a mesma [ES]

Km aparente
da enzima
 29

ENZIMAS
INIBIÇÃO NÃO-COMPETITIVA
 Inibidor não-competitivo se liga reversivelmente,
aleatória e independentemente em um sítio que lhe é
próprio.
I não tem semelhança
estrutural com o S

[substrato] não diminui a

inibição

Km da enzima NÃO se altera

Vmax na presença do
inibidor
 30

ENZIMAS
INIBIÇÃO INCOMPETITIVA
 Inibidor incompetitivo se liga reversivelmente, em
um sítio próprio, ao complexo ES.

I não tem semelhança

estrutural com o S

I favorece a formação do ES

Km e Vmax da enzima
 31

ENZIMAS
INIBIÇÃO IRREVERSÍVEL

 I se combina com um grupo funcional, na molécula da

E, que é essencial para sua atividade.
 Podem promover a destruição do grupo funcional
 Forma-se uma ligação COVALENTE entre o I e a E.
 Vmax   parte da E é completamente removida do
sistema e Km permanece a mesma.
K1 K2
E+S ES E+P
+
I

EI
 32

ENZIMAS
ENZIMAS REGULATÓRIAS
 Enzimas alostéricas
Funcionam através da ligação não-covalente e reversível
de um metabólito regulador chamado modulador;
Moduladores podem ser inibidores ou ativadores;
São maiores e mais complexas, possuem duas ou mais
cadeias polipeptídicas.

 Enzimas reguladas pela modificação covalente

reversível
Grupos químicos são ligados covalentemente e
removidos da enzima reguladora por enzimas ≠, podem
ser: fosfato, adenosina monofosfato, grupos metil, etc.
33
 34

Questões
 O que corresponde atividade catalisadora?
 Quais são os elementos que associados às
enzimas ajudam no processo de catálise?
 O que vem a ser holoenzima e apoenzima?
 Porque diz-se que a ação enzimática diminui o
efeito de ativação orgânica?
 Registre o nome de uma doença com
deficiência enzimática e comente sobre ela.
OBS.: Entregar estas respostas de forma manuscrita individual na
aula subsequente à exposição.