CURVA DE PROGRESO

La gráfica muestra las curvas de progreso para los siguientes resultados experimentales:

Tiempo (s) Micro moles sustrato Micro moles producto

0 100 0
5 90 10
10 81 19
15 72,9 27,1
20 65,6 34,4
25 59 41
30 53,1 46,9
35 47,8 52,2
40 43 57
45 38,7 61,3
60 34,9 65,1

Curva de progreso
120

100

80
Micro moles

60
Sustrato

40 Producto

20

0
0 10 20 30 40 50 60 70
Tiempo [s]

Determine la rapidez inicial a partir de la curva de progreso (pendiente de la tangente en el

origen):

𝑑𝑃 ∆𝑃 10 − 0 10
V0 = = = =
𝑑𝑡 ∆𝑡 5−0 5

V0 = 2 𝑚𝑖𝑐𝑟𝑜 𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠/𝑠
DETERMINACIÓN DE LOS PARÁMETROS CINÉTICOS DE REACCIONES ENZIMÁTICAS

Determine los valores de Ka y Vm mediante los diferentes sistemas de linealización de la ecuación

de Michaelis a partir de los siguientes datos:

A V0 1/A 1/V0 A/V0 V0/A

0 0,0 - - - -
10 28,6 0,100 0,03497 0,3497 2,8600
20 44,4 0,050 0,02252 0,4505 2,2200
30 54,5 0,033 0,01835 0,5505 1,8167
40 61,5 0,025 0,01626 0,6504 1,5375
50 66,7 0,020 0,01499 0,7496 1,3340
60 70,6 0,0167 0,01416 0,8499 1,1767
70 73,7 0,0143 0,01357 0,9498 1,0529
80 76,2 0,0125 0,01312 1,0499 0,9525
90 78,3 0,0111 0,01277 1,1494 0,8700
100 80,0 0,0100 0,01250 1,2500 0,8000

Sistema de Henri (Michaelis)

90
80
70
60
50
40
V0

30
20
10
0
0 20 40 60 80 100 120
[A]
 Sistema de LINEWEAVER-BURK
0.04
0.035
0.03
0.025 y = 0.2498x + 0.01

1/V0
0.02 R² = 1
0.015
0.01
0.005
0
-0.06 -0.04 -0.02 0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12
1/[A]

1 Km 1 1
= +
V0 Vm A Vm

1 1
Vm = = = 100
Intersección 0,01

Pendiente 0,2498
Km = = = 24,98
Intersección 0,01

Sistema de HANES
1.4

1.2

0.8 y = 0.01x + 0.2502

[A]/V0

R² = 1
0.6

0.4

0.2

0
-40 -20 0 20 40 60 80 100 120
[A]

A 1 Km
= A+
V0 Vm Vm
 1 1
Vm = = = 100
Pendiente 0,01

Intersección 0,2502
Km = = = 25,02
Pendiente 0,01

Sistema de HOFSTEE
120

100
y = -25.007x + 100.01
80 R² = 1
V0

60

40

20

0
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5
V0/[A]

V0
V0 = −Km + Vm
A

Vm = Intersección = 100,01

Km = −Pendiente = −(−25,007) = 25,007

INHIBIDORES

Determine el tipo de inhibidor y la(s) constante(s) de inhibición a partir de los datos contenidos en
la tabla siguiente:

[I] nm
0 10 20 30
V0 μ moles / minuto
[A] mM V0 V10 V20 V30 1/[A] 1/V0 1/V10 1/V20 1/V30
0 0 0 0 0 - - - - -
1 100,0 66,7 50,0 40,0 1,000 0,0100 0,015 0,02 0,025
2 133,3 88,9 66,7 53,3 0,500 0,00750 0,0112 0,015 0,0188
3 150,0 100,0 75,0 60,0 0,330 0,00667 0,01 0,0133 0,0167
4 160,0 106,7 80,0 64,0 0,250 0,00625 0,00937 0,0125 0,0156
 5 166,7 111,1 83,3 66,7 0,200 0,00600 0,00900 0,0120 0,015
6 171,4 114,3 85,7 68,6 0,167 0,00583 0,00875 0,0117 0,0146
7 175,0 116,7 87,5 70,0 0,143 0,00571 0,00857 0,0114 0,0143
8 177,8 118,5 88,9 71,1 0,125 0,00562 0,00844 0,0112 0,0141
9 180,0 120,0 90,0 72,0 0,111 0,00556 0,00833 0,0111 0,0139
10 181,8 121,2 90,9 72,7 0,100 0,00550 0,00825 0,0110 0,0138

0.03 [0]

[10]
0.025
[20]

[30]
0.02
1/V

y = 0.005x + 0.005
R² = 1
0.015
y = 0.0075x + 0.0075
R² = 1
0.01 y = 0.01x + 0.01
R² = 1
0.005 y = 0.0125x + 0.0125
R² = 1

0
-1.5 -1 -0.5 0 0.5 1 1.5
1/[A]

 Tipo de inhibidor: No competitivo.

0.014

0.012

0.01
Pendiente

0.008 y = 0.00025x + 0.00500

R² = 1.00000
0.006

0.004

0.002

0
-30 -20 -10 0 10 20 30 40
[I]
 0.014

0.012

0.01

Intersección
0.008 y = 0.00025x + 0.00500
R² = 1.00000
0.006

0.004

0.002

0
-30 -20 -10 0 10 20 30 40
[I]

 Kis:

y = 0,00025x + 0,00500

0 = 0,00025x + 0,00500

0,00500
Kis = −x = −
0,00025

Kis = 20

 Kii:

y = 0,00025x + 0,00500

0 = 0,00025x + 0,00500

0,00500
Kii = −x = −
0,00025

Kii = 20