Este documento describe los métodos convencionales y no convencionales de identificación y diagnóstico microbiano. Los métodos convencionales se basan en características fenotípicas como morfología, bioquímica y tinción diferencial, mientras que los métodos no convencionales incluyen técnicas inmunológicas, genéticas, de ribotipado y sistemas automatizados y miniaturizados que permiten identificar microorganismos de manera más rápida. El documento también discute las ventajas y desvent
0 calificaciones0% encontró este documento útil (0 votos)
49 vistas10 páginas
Este documento describe los métodos convencionales y no convencionales de identificación y diagnóstico microbiano. Los métodos convencionales se basan en características fenotípicas como morfología, bioquímica y tinción diferencial, mientras que los métodos no convencionales incluyen técnicas inmunológicas, genéticas, de ribotipado y sistemas automatizados y miniaturizados que permiten identificar microorganismos de manera más rápida. El documento también discute las ventajas y desvent
Este documento describe los métodos convencionales y no convencionales de identificación y diagnóstico microbiano. Los métodos convencionales se basan en características fenotípicas como morfología, bioquímica y tinción diferencial, mientras que los métodos no convencionales incluyen técnicas inmunológicas, genéticas, de ribotipado y sistemas automatizados y miniaturizados que permiten identificar microorganismos de manera más rápida. El documento también discute las ventajas y desvent
Este documento describe los métodos convencionales y no convencionales de identificación y diagnóstico microbiano. Los métodos convencionales se basan en características fenotípicas como morfología, bioquímica y tinción diferencial, mientras que los métodos no convencionales incluyen técnicas inmunológicas, genéticas, de ribotipado y sistemas automatizados y miniaturizados que permiten identificar microorganismos de manera más rápida. El documento también discute las ventajas y desvent
Descargue como DOCX, PDF, TXT o lea en línea desde Scribd
Descargar como docx, pdf o txt
Está en la página 1/ 10
METODOS NO CONCENCIONALES
DE IDENTIFICACION Y DIAGNOSTICO MICROBIANO MICROBIOLOGIA GENERAL
MSC: YENIS IBEBH PASTRANA PUCHE
ELVIS ROSA VERGARA RAMOS
MARIA ANGELICA SUAREZ OROZCO
UNIVERSIDAD DE CORDOBA SEDE BERASTEGUI CONTENIDO
1.Introduccion
2.Metodos convencionales de Identificación y diagnostico microbiano.
2.1. Métodos convencionales de identificación microbiano.
2.1.1. Clasificación de Métodos convencionales de identificación microbiano.
2.2. Métodos Convencionales de diagnóstico microbiano.
2.2.1. Clasificación de Métodos Convencionales de diagnóstico microbiano.
2.3. Automatización de métodos convencionales de identificación y diagnostico microbiano.
2.4. Ventajas y Desventajas.
3.Metodos no convencionales de identificación y diagnostico microbiano.
3.1. Métodos no convencionales de identificación microbiano.
3.1.1. Métodos de identificación según el tiempo empleado.
3.1.1.1. Métodos muy rápidos.
3.1.1.2. Métodos Rápidos
3.1.1.2.1. Sistemas miniaturizados.
3.1.1.2.2. Sistemas automatizados.
3.2. Métodos no convencionales de diagnóstico microbiano.
3.3. Ventajas y Desventajas.
4.Inovacion.
5.Vocabulario.
6.Webgrafia-Bibliografia.
[NOMBRE DEL AUTOR] 2
1.INTRODUCCION
One of the fundamental tasks of the microbiology laboratory is the application of a precise methodology that allows the identification of the microorganisms involved in clinical processes associated with infections or those that are related to man. In order to identify the etiological agent responsible for the infectious process and to know the pathogenic implications.
2.METODOS CONVENCIONALES DE IDENTIFICACION Y DIAGNOSTICO MICROBIANA
2.1 METODOS CONVENCIONALES DE IDENTIFICACION MICROBIANA
Actualmente, la identificación bacteriana se realiza por medio de métodos convencionales, basados en
las características fenotípicas, puesto que su realización y coste los hace más asequibles. Los esquemas tradicionales de identificación fenotípica bacteriana se basan en las características observables de las bacterias como su morfología, desarrollo, propiedades bioquímicas y metabólicas.
De manera rutinaria los laboratorios de microbiología aplican técnicas fenotípicas que permiten lograr los objetivos expuestos. Estos métodos están consolidados en los laboratorios de microbiología, muestra algunas limitaciones que se observan de manera específica y más evidente para algún tipo de microorganismo.
Estos métodos se utilizan en diferentes áreas, por ejemplo:
En el área clínica. En la industria farmacéutica, cosmética y de alimentos. En investigación de nuevos microorganismos.
2.1.1. CLASIFICACIÓN DE LOS MÉTODOS DE IDENTIFICACIÓN MICROBIANA
Métodos basados en criterios morfológicos:
Los rasgos morfológicos (estructurales), han ayudado a los taxonomistas por muchos años a clasificar organismos.
Métodos basados en pruebas bioquímicas:
Estas pruebas se fundamentan en demostrar si el microorganismo es capaz de fermentar azúcares, la presencia de enzimas, la degradación de compuestos, la producción de compuestos coloreados, etc.
Métodos basados en tipificación con fagos:
La interacción entre un virus bacteriano (fago) y su célula bacteriana sensible es sumamente específica, ya que el proceso de adsorción se encuentra mediado por receptores específicos tanto en el virus como en la célula bacteriana.
Métodos basados en pruebas serológicas:
Implican la utilización de preparaciones de inmunoglobulinas específicas provenientes del suero o de un reactivo, y que pueden ser de gran utilidad en la identificación microbiana.
Métodos basados en tinción diferencial:
[NOMBRE DEL AUTOR] 3 Un examen microscópico de una lámina teñida por medio de gram o de una tinción diferencial es útil para obtener una información rápida sobre la calidad de un ambiente clínico.
2.2. METODOS CONVENCINALES DE DIAGNOSTICO MICROBIANO
El diagnóstico microbiológico es el conjunto de procedimientos y técnicas complementarias empleadas
para establecer la etiología del agente responsable de una enfermedad infecciosa.
2.2.1. CLASIFICACION DE LOS MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO MICROBIANO
DIRECTOS: Implica la demostración del agente, sus metabolitos o componentes antigénicos en los fluidos orgánicos. • Examen microscópico. • Crecimientos en cultivos e identificación. • Inmunofluorescencia directa (ID).
INDIRECTOS: Implica la demostración de la huella que el agente ha dejado en su contacto con el sistema inmunocompetente. • ELISA indirecta
• WESTERN BLOT (WB)
2.3. AUTOMATIZACION DE METODOS CONVENCIONALES
Reducir el gasto de material Aumentan el número de muestras a analizar, sin embargo, no disminuye el tiempo necesario para completar cada ensayo El principal factor de elección será el número habitual de muestras a procesar.
Espectrometría de masas (MALDI-TOF):
Más laboratorios están implementando esta tecnología de espectrometría que, mediante el análisis proteómico de cepas bacterianas y fúngicas, permite su identificación microbiana en pocos minutos.
2.4. VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE LOS MÉTODOS CONVENCIONALES.
Ventajas:
Sensibilidad Bajo costo Facilidad de interpretación
Desventajas: Laboriosidad Grandes cantidades de medios de cultivo Demora en la obtención de datos
[NOMBRE DEL AUTOR] 4
3. MÉTODOS NO CONVENCIONALES DE IDENTIFICACION Y DIAGNOSTICO MICROBIANO
3.1. METODOS NO CONVENCIONALES DE IDENTIFICACIO MICROBIANA
Estos métodos son destinados a la detección, recuento, caracterización y su tipificación de
microorganismos, mediante los cuales se obtienen resultados de manera sencilla, fiable y en menor tiempo que los métodos convencionales algunos de estos son de un mayor costo que los convencionales, aunque estos permiten muchas veces tener una mejor estandarización y agilidad a la hora de establecer diagnósticos más eficaces y oportunos.
3.1.1. METODOS DE IDENTIFICACION SEGÚN EL TIEMPO EMPLEADO.
3.1.1.1METODOS MUY RAPIDOS: Permiten obtener resultados incluso en menos de una hora.
INMUNOLÓGICOS: Los métodos inmunológicos o inmunoensayos son métodos analíticos basado en la reacción Antígeno- Anticuerpo (Ag-Ac), los métodos inmunológicos son ampliamente utilizados en la detección de patógenos en áreas clínicas, agrícolas y ambientales. Inmunoensayos Directos. Inmunoensayos con Reactivos Marcados o Indirectos. GENÉTICOS: son métodos de detección directa de microorganismos en muestras clínicas se da la Identifican un fragmento específico del genoma del microbio, también se da Identificación de microorganismos tras su aislamiento por métodos convencionales. Se dirigen a la detección de características celulares mucho más estables contenida en los ácidos nucleicos. Técnicas de hibridación. Técnicas de amplificación. RIBOTIPADO: El Ribotipado es un método que permite identificar y clasificar bacterias en función de los genes del RNA ribosomal, los genes del rRNA se encuentran dentro de las regiones mejor conservadas del genoma bacteriano.
3.1.1.2. METODOS RAPIDOS
Disminuyen uno o varios días frente a los protocolos tradicionales, permiten obtener resultados en 6-12 horas actúan amplificando los efectos del crecimiento activo de los microorganismos. Utilización de un equipo que realiza una o varias tareas que habitualmente realiza un profesional.
3.1.1.2.1. SISTEMAS MINIATURIZADOS:
SISTEMA API: Los sistemas miniaturizados API son métodos rápidos que permiten la identificación de microorganismos a través de la realización de diferentes pruebas bioquímicas.
[NOMBRE DEL AUTOR] 5
BBL Enterotube II: Es un sistema de identificación listo para usar que se emplea en la identificación de Enterobacteriaceae y otros bacilos gram negativos con resultado negativo a la oxidasa.
BBL Crystal: El sistema BBL Crystal para la identificación (ID) de bacterias gram-positivas (GP) es un método de identificación en miniatura que utiliza substratos convencionales, fluorogénicos y cromogénicos modificados. Se ha diseñado para la identificación de bacterias aerobias gram- positivas aisladas frecuentemente de muestras clínicas.
RapID ™ System: Son una línea completa de paneles de identificación manual rentables para un amplio espectro de microorganismos, se pueden identificar microorganismos anaerobios, bacilos gram-positivos, corineformes, entéricos, no fermentadores, estreptococos y levaduras todo en 4 horas.
3.1.1.2.2. SISTEMAS AUTOMATIZADOS
FENOTIFICAS: Resultados a partir de 4 horas, Combinan reacciones enzimáticas y
bioquímicas
• VITEK: Incluye una extensa base de datos de identificación que le permite detectar un amplio rango de microorganismos. Todas las etapas de identificación, desde las lecturas hasta los registros están automatizados, optimizando el flujo de trabajo. Como el sistema opera con tarjetas con códigos de barras podemos garantizar una trazabilidad completa y se minimiza el riesgo de errores de transcripción.
• BIOLOG: Permite la prueba e identificación de bacterias aerobias Gram-negativas y
Gram-positivas en el mismo panel de prueba. Se usa un protocolo simple de instalación de un minuto para cada muestra.
• PHOENIX: identificación de bacterias gram-positivas y gram-negativas, unos de los
mas completos
GENOTIPICAS: Secuenciación del ARN 16 S
MicroSEQ: es el componente de secuenciación del sistema de identificación
bacteriano MicroSEQ® 500 16S rDNA, que proporciona un método fácil de usar basado en secuencias de ADN para identificar la mayoría de las bacterias.
2.2 METODOS NO CONVENCIONALES DE DIAGNOSTICO
TÉCNICA ELISA: ELISA se basa en el uso de antígenos o anticuerpos marcados con una enzima, de forma que los conjugados resultantes tengan actividad tanto inmunológica como enzimática. Al estar uno de los componentes (antígeno o anticuerpo) marcado con una enzima e insolubilizado sobre un soporte
[NOMBRE DEL AUTOR] 6
(inmunoadsorbente) la reacción antígeno-anticuerpo quedará inmovilizada y, por tanto, será fácilmente revelada mediante la adición de un substrato especifico que al actuar la enzima producirá un color observable a simple vista o cuantificable mediante el uso de un espectrofotómetro o un colorímetro.
Los diferentes tipos de ELISA son los que se enumeran a continuación:
BIOLUMINISCENCIA Mide niveles de ATP lo relaciona con niveles de contaminación, la bioluminiscencia es una tecnología basada en la detección del ATP (adenosintrifosfato), molécula energética de todos los organismos vivos, este sistema indica el nivel de limpieza en toda la extensión de la superficie por medida del ATP de orígenes diversos
SEPARACIÓN INMUNOMAGNÉTICA Estas técnicas se basan en el uso de anticuerpos unidos a la superficie de unas esferas formadas por un material supe paramagnético (es decir, que sólo son magnéticas en presencia de un campo magnético) recubierto de un polímero. Los anticuerpos se unen de manera específica a un antígeno presente en la superficie de un tipo celular concreto y, mediante un simple imán, se pueden separar las células que se han unido a los anticuerpos de las demás, existen en el mercado dos sistemas de separación de células basados en el uso de esferas supe paramagnéticas unidas a anticuerpos
TÉCNICA ELFA (ENZYME LINKED FLUORESCENT ASSAY)
Unida a técnicas de inmuno-detección, inmunoconcentración y a captura específica mediante fagos La interacción entre virus bacteriano (fago) y su célula la bacteria sensible es sumamente específica, ya que el proceso de absorción se encuentra mediado por receptores específicos tanto en el virus como en la célula bacteriana, se le añade una alícuota de un fago especifico, este puede ocasionar la lisis de las bacterias. El uso de fagos específicos permite identificar y subclasificar bacterias dentro de una misma especie
2.3 VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE LOS MÉTODOS NO CONVENCINALES.
Ventajas
Rapidez procesar elevado número de muestras / tiempo facilidad de uso límites de detección bajos precisión (sensibilidad y especificidad)
[NOMBRE DEL AUTOR] 7
Desventajas
inversión inicial (equipamientos)
a veces, necesidad de confirmación. a veces, difícil traducción cuantitativa de resultados. 3. INNOVACION
Investigadores de EE.UU. desarrollan un nuevo método para la detección rápida de patógenos
en los alimentos.
La detección rápida de patógenos en los alimentos Se trata de un test formado por un sensor con un microscopio artificial capaz de detectar bacterias nocivas en ocho minutos
Un equipo de investigadores del Departamento de Ciencia y Tecnología de los Alimentos de la
Universidad de Cornell, en Nueva York, ha desarrollado un nuevo método que permite detectar la presencia de patógenos, como la EscherichiaColi, en los alimentos en tan sólo unos minutos.
Se trata de un test, denominado "Biosensor para la detención rápida del EscherichiaColi O157:H7", que está formado por un sensor con un microscopio artificial capaz de detectar éste y otros patógenos en los alimentos en sólo ocho minutos. Richard A. Durst, director del estudio y profesor de química de la CornellUniversity, asegura que su funcionamiento es similar al del test de embarazo.
Hasta ahora, la detección de bacterias nocivas para la salud en los productos era posible tras un largo proceso que solía durar unas horas. Sin embargo, ahora es posible detectarlas en sólo unos minutos. La base del nuevo test para detectar la presencia de E.coli es el liposoma, que en medicina se suele usar para transportar fármacos terapéuticos en las células enfermas. Los liposomas contienen una sustancia fluorescente y visible que, cuando se detecta el patógeno, ataca los anticuerpos.
Cuando el patógeno es detectado, el test cambia de color. El cambio es casi al instante, por lo que la detección requiere sólo de algunos minutos. Los investigadores están trabajando también en una nueva tecnología para detectar el CryptosporidiumParvum, un parásito intestinal que suele encontrarse en el agua de abastecimiento y que suele causar diarrea.
