FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE DEL EXTRACTO ETANÓLICO

DE LA RAÍZ Y EL FRUTO DE Euterpe precatoria MART.
“HUASAÍ” PROCEDENTE DE LA PROVINCIA MAYNAS Y
CHANCHAMAYO

Tesis para optar el título de profesional de Químico Farmacéutico

Presentado por:

Br. Garamendi Alacote Carmen Rosa

Br. Hernández Cerna María Elizabeth

Asesora:
Mg. Peña Suasnabar Carmen Gladys

Co-asesora:
Q.F. Ramos Llica Eva

Lima – Perú
2019
 DEDICATORIA

A Dios por el don de la vida.

A mi hija Maily por ser el mejor de los regalos.
A mis padres, Ignacia y Aquiles por su respaldo.
A mis hermanos Ornelia y Javier por su confianza en mí.

Br. Garamendi Alacote Carmen Rosa

A Dios por la salud y cuidado infinito en todo momento de mi

vida.
A mis padres Wilder y Crecencia por ser las bases
fundamentales que me ayudaron a llegar hasta aquí.
A mis hermanos Miguel, Eduar y Manuel por su apoyo
ofrecido. Siendo ejemplo de lucha para alcanzar mis logros.

Ser retado es bueno. El desafío de la vida puede ser el mejor

terapeuta_ Gall Sheehy.

Br. Hernández Cerna María Elizabeth

ii
 AGRADECIMIENTO

A nuestra universidad Norbert Wiener por prepararnos académicamente

como futuros Químicos Farmacéuticos y concretar nuestro desarrollo
profesional con perseverancia y compromiso.

A nuestra asesora Mg. Q.F. Carmen Gladys Peña Suasnabar por su

instrucción, guía y el tiempo dedicado para la ejecución de la investigación.

A nuestra Co-asesora Q.F. Eva Ramos Llica de la Facultad de Farmacia y

Bioquímica de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos por su apoyo
en brindarnos su amplio conocimiento y experiencia en el desarrollo de la
investigación.

A Lic. Pedro Saenz Rivera por su participación en el análisis estadístico y

Paul Huamaní Tarazona por su apoyo brindado.

A quien fue nuestra docente Q.F. Bertha Jurado Teixeira (Q.E.P.D.) por su
capacidad que nos brindó e infundir con amor en el principio de la
investigación.

Br. Garamendi Alacote Carmen Rosa

Br. Hernández Cerna María Elizabeth

iii
 ÍNDICE GENERAL

pág.

ÍNDICE GENERAL IV
ÍNDICE DE TABLAS V
ÍNDICE DE FIGURAS VII
ÍNDICE DE ANEXOS X
RESUMEN XI
ABSTRACT XII
I. INTRODUCCIÓN 1
- Situación problemática 2
- Marco teórico referencial 3
- Estudios antecedentes 12
- Importancia y justificación de la investigación 18
- Objetivo del estudio 19
- Hipótesis de investigación 19
II. MATERIALES Y MÉTODOS 20
2.1 Enfoque y diseño 20
2.2 Población, muestra y muestreo 23
2.3 Variable(s) de estudio 24
2.4 Técnicas e instrumentos de recolección de datos 24
2.5 Proceso de recolección de datos 26
2.6 Métodos de Análisis estadístico 37
2.7 Aspectos bioéticos 38
III. RESULTADOS 39
IV. DISCUSIÓN 75
4.1 Discusión 75
4.2 Conclusiones 79
4.3. Recomendaciones 80
CITAS Y REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 81
ANEXOS 90

iv
 ÍNDICE DE TABLAS

pág.

Tabla 1. Factores climáticos de la provincia Maynas 7

Tabla 2. Factores climáticos de la provincia Chanchamayo 7

Tabla 3. Clases de polifenoles 9

Tabla 4. Técnicas e instrumentos de recolección de datos de la investigación 25

Tabla 5. Procedimiento para la determinación de la actividad antioxidante del

extracto etanólico de “huasaí” 36

Tabla 6. Resultado de características físicas de la raíz y el mesocarpio del

fruto de Euterpe precatoria Mart. "huasaí" de ambas provincias 39

Tabla 7. Resultado del rendimiento de la raíz, epicarpio y mesocarpio del

fruto de Euterpe precatoria Mart. "huasaí" de ambas provincias 43

Tabla 8. Solubilidad del extracto etanólico de la raíz, epicarpio y mesocarpio

del fruto de Euterpe precatoria Mart. "huasaí" 44

Tabla 9. Resultado del análisis fitoquímico de Euterpe precatoria Mart.

“huasaí” 45

Tabla 10. Absorbancia del estándar de ácido gálico a 765 nm 49

Tabla 11. Resultado de absorbancias de FT en los extractos etanólicos por

muestra de Euterpe precatoria Mart. “huasaí” de ambas provincias 52

Tabla 12. Resultado de FT de los extractos etanólicos de Euterpe precatoria

Mart “huasaí” expresados en mg Eq. de AG/g 53

Tabla 13. FT expresados en porcentaje de Euterpe precatoria Mart. “huasaí”

mediante el Método Folin-Ciocalteu 53

Tabla 14. Resultado de IC50 µg/mL del estándar Trolox 56

Tabla 15. Resultado de IC50 µg/mL de la raíz de "huasaí" de la provincia

Maynas 56

Tabla 16. Resultado de IC50 µg/mL de la raíz de "huasaí" de la provincia

Chanchamayo 57

v
Tabla 17. Resultado de IC50 µg/mL del epicarpio de "huasaí" de la provincia
Maynas 57

Tabla 18. Resultado de IC50 µg/mL del epicarpio de "huasaí" de la provincia

Chanchamayo 58

Tabla 19. Resultado de IC50 µg/mL del mesocarpio del fruto de “huasaí” de la
provincia Maynas 58

Tabla 20. Resultado de IC50 µg/mL del mesocarpio del fruto de "huasaí" de la
provincia de Chanchamayo 59

Tabla 21. Comparación de IC50 µg/mL del estándar Trolox con muestras de
Euterpe precatoria Mart. “huasaí” de ambas provincias 59

Tabla 22. Resultado de la actividad antioxidante expresados en TEAC de

cada muestra de ambas provincias 64

vi
 ÍNDICE DE FIGURAS

pág.

Figura 1. Estructura química del ácido gálico 30

Figura 2. Reacción entre el ácido gálico y el reactivo de Folin-Ciocalteu 30

Figura 3. Estructura química del estándar Trolox 33

Figura 4. Reacción química entre el radical DPPH y la especie antioxidante 34

Figura 5. Muestras de estudio de "huasaí" de Maynas 40

Figura 6. Fruto y mesocarpio del fruto de “huasaí”. (a) Maynas (b)

Chanchamayo 41

Figura 7. Muestras de estudio “huasaí”. (a) Epicarpio de Maynas (b)

Epicarpio de Chanchamayo (c) Raíz de Maynas (d) Raíz de
Chanchamayo 42

Figura 8. Curva de calibración de ácido gálico 50

Figura 9. Porcentaje de Inhibición vs. Concentración estándar Trolox 54

Figura 10. Datos del análisis de regresión lineal. Gráfico del porcentaje de
Inhibición vs. Concentración de los extractos etanólicos de
“huasaí” de Maynas y Chanchamayo 55

Figura 11. Comparación de IC50 µg/mL de Trolox frente a la raíz, epicarpio y

mesocarpio del fruto de “huasaí” de ambas provincias 60

Figura 12. Comparación de IC50 µg/mL de Trolox frente a la raíz de “huasaí”

de ambas provincias 61

Figura 13. Comparación de IC50 µg/mL de Trolox frente al epicarpio de

“huasaí” de ambas provincias 62

Figura 14. Comparación de IC50 µg/mL de Trolox frente al mesocarpio del

fruto de “huasaí” de ambas provincias 63

Figura 15. Estadísticas descriptivas de la concentración de FT de “huasai” de

ambas provincias 65

vii
Figura 16. Prueba ANOVA de concentraciones de FT de las muestras de
“huasaí” de ambas provincias 66

Figura 17. Comparaciones múltiples de Tukey de FT de “huasaí” de ambas

provincias 67

Figura 18. Estadísticas descriptivas de los valores de IC50 µg/mL de la

actividad antioxidante de “huasaí” de ambas provincias 68

Figura 19. Prueba ANOVA de los valores de IC50 µg/mL de la actividad

antioxidante de “huasaí” de ambas provincias 69

Figura 20. Comparaciones múltiples de Tukey de la palmera de “huasaí” 70

Figura 21. Prueba T de Student. Comparación por pares 71

Figura 22. Resultados TEAC expresados en µmol TE/g de muestra de

“huasaí” para cada provincia 72

Figura 23. Prueba ANOVA. Valores TEAC de “huasaí” Entre grupos de

ambas provincias 73

Figura 24. Comparaciones de Tukey 74

Figura 25. Procedimiento previo al secado para todas las muestras de

“huasaí” extendidas dentro de bolsas de papel kraft de ambas
provincias 99

Figura 26. Proceso de obtención del extracto etanólico de raíz, epicarpio y

mesocarpio del fruto de “huasaí” de ambas provincias 100

Figura 27. Medición de absorbancias por el espectrofotómetro UV/visible 101

Figura 28. Reacción del radical DPPH con un cambio de coloración de color
morado (oxidado) a color amarillo (reducido) de la raíz de. “huasaí”
de ambas provincias 102

Figura 29. Reacción del radical DPPH del epicarpio de “huasaí” de ambas
provincias 103

Figura 30. Reacción del radical DPPH del mesocarpio del fruto "huasaí" de
ambas provincias 104

Figura 31. Estructura de palmeras 105

viii
Figura 32. Estructura de las partes de Euterpe precatoria Mart. “huasaí” 106

Figura 33. El palmito, parte comestible 107

Figura 34. Exportación de palmitos del Perú 2017-2018 Agrodataperú. 108

Figura 35. Exportación de palmitos preparados 109

Figura 36. Empresas de exportación de palmito 110

Figura 37. Obtención del extracto etanólico seco de raíz, epicarpio y

mesocarpio del fruto de "huasaí" de ambas provincias 111

Figura 38. Procedimiento del método de Folin - Ciocalteu 112

Figura 39. Procedimiento del método DPPH 113

ix
 ÍNDICE DE ANEXOS

pág.

Anexo A. Operacionalización de Variables 93

Anexo B. Instrumento y recolección de datos 95

Anexo C. Evidencia de trabajo de campo 97

Anexo D. Imágenes relacionado a la investigación 99

Anexo E. Flujograma del proceso de investigación 107

x
 RESUMEN

Las enfermedades crónicas provocan a nivel mundial la muerte a millones

de personas cada año, incorporar frutas y verduras a la dieta diaria puede reducir
el riesgo de contraer algunas de estas enfermedades. Euterpe precatoria Mart.
palmera conocida como “huasaí”, en el proceso de extracción de palmitos
produce la muerte de la palmera de los cuales se originan subproductos
agroindustriales que deben ser aprovechados como una alternativa de uso de la
raíz. Objetivo: Comparar la actividad antioxidante del extracto etanólico de la raíz
y el fruto de Euterpe precatoria Mart. “huasaí” procedente de la provincia de
Maynas respecto a la especie oriunda de Chanchamayo. Metodología: El diseño
de investigación fue cuasi-experimental con enfoque cuantitativo, comparativo y
prospectivo; se determinó el contenido de Fenoles Totales por el método Folin-
Ciocalteu (49) y la actividad antioxidante por el método 2,2-difenil-1-picril-hidrazilo
(DPPH) (51). Resultado: El mayor porcentaje de Fenoles Totales presentó la raíz
15, 5 % de “huasaí” de Chanchamayo. En la actividad antioxidante se utilizaron
las regresiones lineales para obtener los valores de Concentración Inhibitoria
media (IC50). La raíz, epicarpio y mesocarpio del fruto de “huasaí” de la provincia
de Chanchamayo obtuvieron un IC50 de 3,28 µg/mL; 408,05 µg/mL y 3665,77
µg/mL respectivamente, mientras para la raíz, epicarpio y mesocarpio del fruto de
“huasaí” de la provincia de Maynas obtuvieron un IC50 de 3,86 µg/mL; 878,63
µg/mL y 5096,20 µg/mL respectivamente. El contenido de Fenoles Totales y las
mediciones de la actividad antioxidante fueron obtenidos y contrastadas mediante
el análisis de varianza, test de Tukey (p<0,05) y T de student, se hallaron
diferencias significativas al 5 % entre los grupos de las dos provincias y para las
tres muestras de raíz, epicarpio y mesocarpio del fruto de “huasaí”. Conclusión:
El extracto etanólico de la raíz, epicarpio y mesocarpio del fruto procedente de
Chanchamayo obtuvieron mayor contenido de Fenoles Totales y actividad
antioxidante que el extracto etanólico de la raíz, epicarpio y mesocarpio del fruto
de Maynas.

Palabras clave: Euterpe, antioxidante, radicales libres, estrés oxidativo.

xi
 ABSTRACT

Chronic diseases worldwide cause death to millions of people every year,

incorporating fruits and vegetables into the daily diet can reduce the risk of some
of these diseases. Euterpe precatoria Mart. Palm tree known as “huasaí”, in the
process of extraction of palm hearts it causes the death of the palm tree from
which agro-industrial by-products are originated that must be exploited as an
alternative to use the root. Objective: To compare the antioxidant activity of the
ethanolic extract of the root and the fruit of Euterpe precatoria Mart. “huasaí” from
the province of Maynas regarding the native species of Chanchamayo.
Methodology: The research design was quasi-experimental with a quantitative,
comparative and prospective approach; the Total Phenol content was determined
by the Folin-Ciocalteu method (49) and the antioxidant activity by the 2, 2-
diphenyl-1-picril-hydrazyl (DPPH) method (51). Result: The highest percentage of
Total Phenol presented the root 15, 5% of “huasaí” of Chanchamayo. In the
antioxidant activity, linear regressions were used to obtain the values of Mean
Inhibitory Concentration (IC50). The root, epicarp and mesocarp of the fruit of
“huasaí” of the province of Chanchamayo obtained an IC50 of 3.28 µg / mL; 408.05
µg / mL and 3665.77 µg / mL respectively, while for the root, epicarp and
mesocarp of the “huasaí” fruit from the province of Maynas they obtained an IC 50
of 3.86 µg / mL; 878.63 µg / mL and 5096.20 µg / mL respectively. The content of
Total Phenol and the measurements of the antioxidant activity were obtained and
contrasted by means of the analysis of variance, Tukey test (p <0.05) and student
T, significant differences were found at 5% between the groups of both provinces
and for the three samples of root, epicarp and mesocarp of the fruit of Euterpe
precatoria Mart. “huasaí”. Conclusion: The ethanolic extract of the root, epicarp
and mesocarp of the fruit from Chanchamayo obtained a higher content of Total
Phenol and antioxidant activity than the ethanolic extract of the root, epicarp and
mesocarp of Maynas fruit.

Keywords: Euterpe, Antioxidant, free radicals, oxidative stress.

xii
 I. INTRODUCCIÓN

Pintaud J. afirma “En la Amazonía se encuentra el 70 % de los géneros

de palmeras de América del sur” (1).

Goulding M. menciona que “Tres especies del género Euterpe son

comunes y se encuentran dispersos a través del Amazonas: Euterpe oleracea, E.
precatoria y E. catinga” (2).

Euterpe precatoria Mart. “huasaí” es una palma la cual su fruto lleva igual
denominación, esta especie es silvestre y habita en bosques con inundación
constante, en áreas pantanosas y al borde de ríos con altitudes de hasta 2000
m.s.n.m. (3).

Mass H. indica que “En el Perú Euterpe precatoria Mart. se encuentra en

los departamentos de Loreto, Ucayali, San Martín, Amazonas, Madre de Dios,
Junín, Pasco, Cusco” (4).

El fruto “huasaí” tiene propiedad antioxidante, se consume al estado

fresco en jugo, compota y helado (2). En investigaciones realizadas la actividad
antioxidante y el contenido de polifenoles del mesocarpio del fruto de Euterpe
precatoria Mart. es sobresaliente al mesocarpio del fruto de Euterpe oleracea
Mart. “acaí” (5).

El estrés oxidativo es vinculada con la producción de radicales libres (RL)

dañinas en la evolución de diversas patologías y principio del cáncer por acción
de especies reactivas responsables de alteraciones celulares mediante su acción
sobre proteínas, lípidos y ADN (6) por ello Euterpe precatoria Mart. “huasaí”
proporciona beneficios al ser humano cuyo interés en su tratamiento se
establecería en la ingesta de fuentes naturales de antioxidantes abundante en
compuestos fenólicos.

1
- Situación problemática

Según el informe publicado por la Organización Mundial de la Salud

(OMS) 2018, indica que las enfermedades crónicas a nivel mundial producen la
muerte a 41 millones de personas cada año. Las enfermedades cardiovasculares
constituyen 17,9 millones, cáncer 9,0 millones, enfermedades respiratorias 3,9
millones y la diabetes 1,6 millones. Los factores de riesgo entre ellos son: dieta
inadecuada, inactividad física, exposición al humo del tabaco y el uso nocivo del
alcohol favorecen el desarrollo de las enfermedades crónicas (7).

Euterpe precatoria Mart. “huasaí” generalmente es aprovechada para la

extracción de palmito que es parte comestible, el fruto tiene propiedad
antioxidante y se halla durante casi todo el año, se puede aprovechar al máximo
en los periodos altos de producción” (8).

Actualmente AGRODATAPERU en el 2018 la industria de palmitos

exportó 2 563,743 Kg, de los cuales se producen residuos agroindustriales que
deben ser aprovechados (9).

Por ello, se manifiesta el interés de comparar la actividad antioxidante del

extracto etanólico de la raíz y el fruto de Euterpe precatoria Mart. “huasaí”
oriundas de las provincias de Maynas y Chanchamayo, con la finalidad de
contribuir el aprovechamiento sostenible de una misma especie con mayor
concentración en antioxidantes. Por lo manifestado planteamos la siguiente
interrogante de investigación.

Formulación de problema

¿El extracto etanólico de la raíz, epicarpio y mesocarpio del fruto de Euterpe

precatoria Mart. “huasaí” procedente de las provincias Maynas y Chanchamayo
que generan como residuos agroindustriales tendrán diferentes concentraciones
de metabolitos secundarios con actividad antioxidante?

2
Limitaciones

 Difícil acceso en la recolección de la muestra vegetal en ambas provincias.

 Déficit en la separación del epicarpio y mesocarpio del fruto por ser muy
fibrosa e insuficiente proporción.
 Reducción del tamaño de la raíz.

- Marco teórico referencial

Generalidades de la Familia Arecaceae

Mostacero L. menciona “Esta familia tiene 205 géneros y

aproximadamente 2500 especies. En el Perú hay 33 géneros y 145 especies de
las cuales 19 son endémicas. Son plantas monoicas o dioicas, trepadoras,
arbóreas con tallo cilíndrico grueso o delgado, sus extremidades de las hojas
están transformada en un órgano para trepar, flores que abren una sola vez y
muere, su inflorescencia es simple o compuesta” (10).

Euterpe precatoria Mart. “huasaí”

Palma de un solo tallo que se desarrolla en bosques húmedos, tropicales y en

pantanos. Las partes utilizadas son: Fruto, semilla, palmito, aceite, hoja y raíz (3).

Taxonomía

Conforme al Sistema Integrado de Clasificación de las Angiospermas de Arthur

Cronquist., Euterpe precatoria Mart. “huasaí” establece las siguientes categorías
taxonómicas.

3
 REINO : Plantae
DIVISIÓN : Magnoliophyta
CLASE : Liliopsida
SUBCLASE : Arecidae
ORDEN : Arecales
FAMILIA : Arecaceae
GÉNERO : Euterpe
ESPECIE : Euterpe precatoria Mart.

Fuente: José Ricardo Campos De La Cruz. Biólogo Colegiado - N° 3796-

Resolución Directoral N° MINAGRI- DGFFS- DGEFFS.

Nombres comunes

Euterpe precatoria Mart. “huasaí” adquiere múltiples nombres de acuerdo a su

ubicación.

 Perú: chonta, huasaí.

 Bolivia: Asaí
 Colombia: asahí
 Brasil: Açaí da terra firme (2)
 Venezuela: manaca (11).

Descripción botánica

 Raíz: Presentan raíces visibles en la base, abastecidas con neumatóforos que

favorecen el intercambio gaseoso en el momento que las palmas permanecen
inundadas (2). Presenta color rojo brillante cuando son jóvenes, unidas de por
medio, alcanza 40 cm de largo, 1 - 2 cm de grosor, con ausencia de hijuelos
(3).

 Tallo: Solitario, delgado, liso, alcanza 20 m de altura y 25 cm de diámetro,

color gris, con huellas foliares y en medio de nudos (3).
4
 Hoja: Color verde, horizontal y curvada, llega a medir 80 cm con raquis de 2 - 3
m de largo, con foliolos rectos, normalmente en un único plano a cada lado del
raquis y con varios nervios laterales (3).

 Flor: Color violeta pálido, monoicas y en racimos (11).

 Fruto: Baya esférica de 1 - 1,5 cm de espesor, epicarpio color negro-púrpura

en estado maduro y verdoso en estado inmaduro (3).

 Semilla: Abarca casi todo el espacio que ocupa el fruto, es esferoidal y en su

alrededor presenta elevado contenido de fibras finas, necesita de 75 - 80 días
para germinar (3).

Distribución geográfica

Hernández M. menciona “Se distribuye en Centroamérica: Guatemala,

Honduras, Nicaragua, Costa Rica y Panamá. En Suramérica: Colombia,
Venezuela, Trinidad y las Guayanas, Ecuador, Perú, Brasil y Bolivia. Excluida de
los bosques tipo várzea que crecen en las llanuras de inundación” (3).

Gouldin M. manifiesta que “Habita en los humedales de la Amazonía

central en estado solitario o formando mánchales y en márgenes de ríos” (2).

Floración y fructificación

Coimbra J. manifiesta: “Florece en época seca, y los frutos maduran en la

época de lluvias” (12).

Cosecha y productividad

Loyola R. indica “La cosecha es anual, principalmente en los meses de

setiembre y diciembre” (13).

Brañas M. menciona “Se estima que una palma podrá ser cosechada a
partir de los 5 ó 7 años de haber sido sembrada” (8).

5
 En el año 2014 la producción media se evaluó en 2,2 toneladas por
hectárea por año, con un promedio de 188 palmas productivas por hectárea en
una época de fructificación de una palmera de “huasaí” que puede producir entre
5500 a 8500 frutos (14).

Beneficios y usos

Beneficios

 Retrasa el proceso de degeneración de la epidermis por envejecimiento.

 Puede prevenir patologías degenerativas.
 Evita enfermedades cardíacas (15).

Usos tradicionales

 Medicinal: Shanley P. menciona “El jugo obtenido al prensar las raíces y hojas
nuevas se usa para curar mordeduras de serpientes y para tratamientos contra
la anemia. En Perú, la raíz se usa para curar enfermedades en el hígado y
renales” (16).

 Alimenticio: El mesocarpio del fruto maduro se consume crudo y cocido, el

palmito fresco o en ensalada. El proceso de extracción destructiva de palmitos
produce la muerte de las palmeras (16).

 Cosméticos: Shanley P. comenta “El aceite en Perú, algunos indígenas usan el

aceite como producto de belleza para el cabello” (16).

 Bisutería: Pendientes y gargantillas confeccionados con semillas de “huasaí”

(17).

 Construcción: El tallo de la palmera se utiliza a manera de cercos y pisos (17).

6
Factores que influyen en el desarrollo de las plantas

En la producción de plantas medicinales la mayor productividad de

materia vegetal y el alto contenido de principio activo va a depender de factores
internos de la especie vegetal relacionados con el adecuado crecimiento de la
especie, cosecha y las condiciones climáticas, puesto que las plantas están en
firme interacción con el medio que las rodea; el clima contribuye en una época
establecida en la producción de sus metabolitos secundarios, determinadas
condiciones de temperatura, participan en la germinación, crecimiento y desarrollo
en las especies vegetales; la luz beneficia el crecimiento de los tejidos jóvenes
fase en la cual acontece el almacenamiento de los principios activos (18).

En nuestra investigación de una misma especie silvestre procedente de

dos lugares geográficos de la Amazonía peruana intervienen:

Tabla 1. Factores climáticos de la provincia Maynas

Factores Provincia Maynas

Clima Tropical lluvioso (cálido y húmedo),
Temperatura Temperaturas que van desde los 20 °C a 36 °C
Altitud 106 m.s.n.m.
Temporada de Noviembre - mayo, con la red fluvial en su punto
lluvia más alto en mayo y su nivel más bajo en octubre.

Fuente: PAPSC - Municipalidad provincial de Maynas. 2019 (19, 20).

Tabla 2. Factores climáticos de la provincia Chanchamayo

Factores Provincia Chanchamayo

Clima Cálido y húmedo
Temperatura 18 °C a 30 °C
Altitud 751 m.s.n.m.
Temporada de lluvia Abundantes de noviembre - mayo

Fuente: Municipalidad provincial de Chanchamayo (21,22).

7
Antioxidantes

Rivas-Morales C, confirma que: “Son compuestos que pueden inhibir o retardar la

oxidación de otras moléculas inhabilitando la iniciación y/o propagación de las
reacciones en cadena de los radicales libres” (23).

Franco D, distinguió dos tipos de antioxidantes: “Los sintéticos creados a

partir de procesos químicos siendo el Propil galato más utilizado, y los naturales
que son ciertos productos naturales presentes en frutas y verduras, entre ellos
destacan los polifenoles (tocoferoles, flavonoides y ácidos fenólicos),
carotenoides, etc” (24).

Clasificación de antioxidantes

Feduchi C, clasifica a los antioxidantes “en tres grupos, dependiendo como actúan
químicamente. Antioxidantes primarios: Impiden la formación de nuevas especies
reactivas produciendo moléculas menos nocivas. Pertenecen a este grupo:
superóxido dismutasa, glutatión peroxidasa, catalasa y proteínas ligadores de
metales (ferritina y ceruloplasmina). Antioxidantes secundarios: Se hallan las
moléculas que intervienen cuando hay superproducción de RL, evitando así las
reacciones de cadena, están incluidas en este grupo: glutatión, vitamina C,
vitamina E, bilirrubina, ácido úrico y albúmina. Antioxidantes terciarios: Restaura
las biomoléculas dañadas por los RL, entre ellos destacan las enzimas
reparadoras de ADN, la metionina sulfóxido reductasa y la fosfolipasa A2 que
escinde los fosfolípidos oxidados de la membrana” (25).

Polifenoles

Son compuestos fitoquímicos secundarios que se encuentran en la mayoría de

comestibles de origen vegetal con actividad antioxidante. Es representada por la
existencia de uno o diversos anillos bencénicos correspondiendo como grupo
funcional uno o más grupos hidroxilo (26).

8
Tabla 3. Clases de polifenoles

Clase de
Ejemplos Fuentes
polifenoles

Cianidina, delfinidina,
malvidina, pelargonidina, Vino tinto, algunas variedades de cereales,
Antocianinas
peonidina,petunidina y sus berenjenas, frijoles, rábanos
glcósidos

Catequina, epicatequina,
Flavanoles galocatequina, Té verde
epigalocatequina

Hesperetina, hesperidina,
Pomelo, naranja, limón, jitomate y algunas
Flavanonas homoeriodictiol,
plantas aromáticas (menta)
naringenina, naringina

Apigenina, luteolina,
Flavonas tangeretina, nobiletina, Perejil, ajo, mijo, trigo, piel de cítricos
sinensetina

Kaempferol, miricetina, Cebolla, col rizada, puerros, brócoli, arándano,

Flavonoles
quercetina y su glicósidos vino tinto y té

9
 Daidzeína genisteína
Isoflavonas Soya, cacahuate, leguminosas
gliciteína
Ácido gálico, ácido
Ácidos Té trigo , frutas rojas (frambuesa, grosella,
hidroxibenzoico, ácido
hidroxibenzoicos fresa)
vanílico
Ácido cafeico, ácido
Ácidos Kiwis, arándanos, manzana, trigo, arroz,
felúrico, ácido cumarico,
hidroxicinámicos avena
ácido sinápico
Semilla de lino, semilla de sésamo, cereales
Lignanos Pinoresinol, podofilotoxina
(centeno trigo, avena, cebada), brócoli, col
Estilbenos Resveratrol Vino
Taninos
Procianidinas Té, vinos, chocolate
(proantocianidinas)

Modificado de Ortensia IP et al.,2014

Fuente: Gonzales F. (26).

10
Clasificación de polifenoles

Se clasifica en dos grupos:

a. Flavonoides
Estructura básica que se determina por dos anillos bencénicos asociados
por un heterociclo mediante el anillo “C” (26).

Choque G afirma “Poseen efectos terapéuticos en enfermedades

cardiovasculares, aterosclerosis y el cáncer. Sus propiedades anti-radicales
libres conducen a especies altamente reactivas como el radical hidroxilo”
(27).
Asimismo, otras investigaciones se han descubierto actividad
antiinflamatoria e hipoglucemiante (28).

b. No flavonoides

Gonzales F. menciona “Consisten en un grupo heterogéneo de moléculas,

que van desde ácidos benzoicos C6-C1, hidroxicinamatos C6- C3 a
estructuras más complejas como los estilbenos, lignanos, taninos,
galotaninos y elagitaninos” (26).

Radicales libres (RL)

Rivas-Morales C, manifiesta que “Los radicales libres son fragmentos
moleculares de forma independiente que presenta uno o más electrones
desapareados en su estructura, se les conoce como especies reactivas del
oxígeno (ROS) y especies reactivas del nitrógeno (RNS). Su reactividad es muy
alta que es capaz de atacar a casi cualquier molécula que se encuentre más
cercana de su lugar de formación” (23).

Giaquinta A, manifiesta “Los radicales libres realizan un proceso normal

durante el metabolismo celular y no siempre son dañinos, algunas de sus
funciones en el organismo a nivel inmunitario es eliminar virus, bacterias y células
defectuosas” (29).

Los problemas residen en las altas concentraciones por tiempos extensos

de RL, la superabundancia suele ser originado por factores externos: exposición a
contaminación, estrés, exposición a radiación, exposición exagerada al sol,
nutrición deficiente; fomentan mayor obtención de RL que ocasionan deterioro a

11
nivel celular (30). Debido a ello se debe incorporar a la dieta fuentes de
antioxidantes por ejemplo frutos frescos y secos, verduras, condimentos,
leguminosas, entre otros (31).

Estrés oxidativo

Repetto M. mencionó “el estrés oxidativo es causado por un desequilibrio entre el

aumento de la producción de moléculas oxidantes y/o una disminución a la
presencia de antioxidantes en las células, este desajuste en el equilibrio puede
producir daño a macromoléculas biológicas” (32).

Si el desequilibrio persiste constantemente se activa el proceso de

envejecimiento y estimula distintas enfermedades crónicas degenerativas. Las
enfermedades vinculadas con el estrés oxidativo conllevan: cáncer, patologías del
corazón, patologías del riñón, trastornos oculares, asma, asimismo patologías
metabólicas: diabetes (33).

- Estudios antecedentes

Antecedentes Internacionales

Martins R, (2018) en su estudio “Acaí (Euterpe oleracea Mart.) Seed

extract induces cell cycle arrest and apoptosis in human lung carcinoma
cells”. Objetivo: Evaluar los efectos e impactos citotóxicos en el ciclo celular y la
apoptosis del extracto de semilla de açai (ASE) en la línea celular de carcinoma
de pulmón humano (A 549). Método: Método DPPH, Capacidad Antioxidante
Equivalente al Trolox (TEAC), Capacidad de Reducción Férrica (FRAP) y la
Capacidad de Absorción de Radicales de Oxígeno (ORAC). La viabilidad celular
del carcinoma de pulmón humano (A549) se controló mediante el método de
ensayo MTT y los efectos sobre el ciclo celular y la apoptosis se midieron
mediante citometría de flujo. Resultado: Los resultados indican una alta actividad
antioxidante en ASE y altos valores de compuestos fenólicos totales (37,08 ± 8,56
g de ácido gálico AG/100 g). En ASE (100 µg/mL) obtuvo una potente reducción
en el radical DPPH (92,05 ± 2,5 %) y en el método ABTS (566,01 ± 43,24 μM
TEAC/μg). A través de los métodos de FRAP y ORAC, los resultados obtenidos

12
respectivamente fueron 8,98 ± 0,35 mmol Fe2+ Eq/g de extracto y 16679,17 ±
4879,81 µM TE. Estos frutos fueron recolectados de la Bahía del Amazonas
(Brasil). Conclusión: Indicaron que el consumo de ASE podría disminuir la
proliferación de células de cáncer de pulmón humano, un resultado
potencialmente mediado por la actividad antioxidante, la modulación del ciclo
celular y la tasa de apoptosis (34).

Garzón G. (2017) en su investigación “Composition and antioxidant

activity of açai (Euterpe oleracea Mart.) from Colombia” Objetivo: Determinar
el contenido fenólico total y la actividad antioxidante. Método: El análisis de
polifenoles totales se realizó por el método Folin-Ciocalteu y la actividad
antioxidante mediante el método Ácido 2,2´-azino-bis-(3-etilbenzotiazolina)-6-
sulfónico (ABTS) y DPPH. Resultado: El contenido de polifenoles totales fue de
6,07 ± 2,17 mg Eq. AG/g de muestra fresca. La actividad antioxidante por ABTS
fue de 3,1 ± 1,3 μmol TE/100 g y por DPPH fue 2693,1 ± 332,8 μmol TE/100 g.
Conclusión: El açaí de procedencia colombiana presenta polifenoles,
antocianinas y tiene actividad antioxidante (35).

Según Brunschwig C. (2016) en su estudio “Chemical Composition and

Antioxidant Activity of Euterpe oleracea Roots and Leaflets”. Objetivo:
Investigar la actividad antioxidante del extracto de raíz y foliolo de Euterpe
oleracea y caracterizar sus fitoquímicos. Método: Método Folin-Ciocalteu para
cuantificación de fenoles y método DPPH, ORAC, FRAP para la actividad
antioxidante. Resultado: El valor más alto se encontró para el extracto de
acetona de foliolos de Euterpe oleracea con 84 µg Eq. AG/mg de muestra. En
el método de DPPH, los valores del extracto de hoja de Euterpe oleracea
oscilaron entre 480 y 990 µmol Trolox Eq./g de muestra. En el método FRAP,
todos los valores para extractos de las hojas variaron de 1000 a 1400 µmol de Fe
(II) Eq/g. El ensayo ORAC, dio valores de 1600 a 2200 µmol TE/g, para extractos
de raíces. Conclusión: Los extractos de raíz y de hoja de Euterpe oleracea
fueron activos en los métodos químicos de antioxidantes DPPH, FRAP y ORAC.
Este estudio muestra que las raíces y hojas de Euterpe oleracea, que actualmente
son subproductos de la industria del palmito podrían, junto con los frutos

13
valorizarse como una nueva fuente no citotóxica de antioxidantes que contienen
ácidos hidroxicinámicos y flavonoides (36).

Oliveira P. et al., (2015) publicó “Acaí (Euterpe oleracea Mart.) pulp

dietary intake improves cellular antioxidant enzymes and biomarkers of
serum in healthy women”. Objetivo: Evaluar el efecto de la ingesta de pulpa de
acaí (Euterpe oleracea Martius) en la prevención del daño oxidativo mediante la
medición de la actividad antioxidante y biomarcador de la oxidación de proteínas
en mujeres. Método: Se realizó por el método Folin-Ciocalteu para la
cuantificación de fenoles totales y DPPH para actividad antioxidante, su estudio
de intervención nutricional estaba conformado por 35 mujeres sanas y se les
pidieron consumir 200 g/diarios de pulpa de acaí durante 4 semanas. Resultado:
La pulpa de acaí recolectadas en Brasil fue 131 mg Eq. AG/ 100 g, lo cual
permitió establecer una relación con la actividad antioxidante con valores de la
pulpa de un IC50 de 512 mg/mL, mientras que el IC50 del antioxidante estándar
Trolox (6-hidroxi-2, 5, 7, 8-tetrametilcromo-2-ácido carboxílico) era de 214 mg/mL.
La ingesta de acaí redujo la producción de RL. Conclusión: El consumo de acaí
en la dieta modula el estado antioxidante / prooxidante de las mujeres sanas (37).

Kang J. et al. (2012) en su estudio “Bioactivities of açaí (Euterpe

precatoria Mart.) fruit pulp, superior antioxidant and anti-inflammatory
properties to Euterpe oleracea Mart.” cuyo objetivo fue evaluar la capacidad
antioxidante mediante métodos químicos y la actividad antiinflamatoria en el
mesocarpio del fruto de Euterpe precatoria Mart. Método: Se aplicó el método
Folin-Ciocalteu para la determinación de polifenoles totales, el método ORAC y
DPPH para la actividad antioxidante y el método Fosfatasa alcalina embrionaria
secretada (SEAP) para la actividad antiinflamatoria. Para fines comparativos, se
incluyó el mesocarpio del fruto de Euterpe oleracea. Resultado: Los valores
obtenidos en polifenoles totales fueron 73,0 ± 4,8 mg Eq. AG/ g para Euterpe
precatoria Mart. y 31,2 ± 2,6 mg Eq. AG/g para Euterpe oleracea Mart. Por el
método ORAC los resultados fueron 1828,4 µmol TE/g para Euterpe precatoria y
1014,0 µmol TE/g de Euterpe oleracea. Por el método DPPH obtuvieron 320,3 ±
23,8 (µmol TE/g) para Euterpe precatoria y 133,4 ± 11,2 (µmol TE/g) para Euterpe

14
oleracea en el mesocarpio del fruto recolectados en Bolivia. Conclusión: La
actividad antioxidante y antiinflamatoria de la especie Euterpe precatoria Mart. se
evaluaron por varios métodos químicos y al comparar los datos con
Euterpe oleracea Mart., concluyeron que la actividad antioxidante del mesocarpio
de la fruta Euterpe precatoria Mart. fue sobresaliente al mesocarpio de la fruta
Euterpe oleracea Mart. en todos los métodos informados en este estudio (5)

Antecedentes Nacionales

Ortega E. (2015) et al., publicaron: “Caracterización fisicoquímica y

evaluación de la actividad antioxidante del aceite de Euterpe precatoria Mart.
obtenido por diferentes métodos de extracción” Objetivo: Evaluar el
rendimiento en aceite a través de diferentes métodos de extracción, caracterizar
el aceite a nivel fisicoquímico y evaluar la actividad antioxidante. Método: Se
emplearon los métodos de extracción enzimática-prensado, extracción prensado
en frío y extracción por solventes; para la evaluación de la inhibición de RL se
empleó el método de DPPH. Resultado: Las características físicas de los frutos de
“huasaí” señalan 1,32 cm de largo, 1,42 cm de diámetro y 1,79 g de peso. El
aceite encontrado por extracción enzimática-prensado obtuvo un IC50 de 6,97
mg/mL, pre tratamiento enzimático fue un IC 50 de 3,61 mg/mL, y la extracción por
solventes obtuvo un IC50 de 1,82 mg/mL; sin embargo, los extractos no tuvieron
mayor actividad antioxidante que el Trolox (IC50 0,00 mg/mL). Conclusión: Las
características fisicoquímicas del aceite son similares en las muestras obtenidas
por prensado y extracción con pretratamiento enzimático-prensado y el aceite
obtenido por extracción por solventes reportó una menor calidad. La capacidad
antioxidante más alta (IC50 1,82 mg/mL) y la mayor proporción de compuestos
fenólicos totales (11010,5 mg Eq. AG/100g) se obtuvo en el aceite extraído por
solventes (38).

Según Sotero V. et al., (2013) desarrollaron una investigación titulada

“Caracterización química y evaluación antioxidante de frutos y raíces de
Euterpe oleracea y Euterpe precatoria”, cuyo objetivo fue evaluar la actividad
antioxidante y determinar la composición química de dos especies del género
Euterpe: Euterpe precatoria y Euterpe oleracea. Método: Se aplicó el método

15
DPPH para la actividad antioxidante. Resultado: El fruto y raíz de Euterpe
precatoria fueron colectados del Jardín de Frutales nativos del “Centro de
Investigaciones Allpahuayo”, presentaron triterpenos, esteroides, azúcares
reductores, fenoles, taninos y flavonoides. En el fruto como en la raíz de Euterpe
oleracea se hallaron cumarinas, fenoles, taninos y flavonoides. La actividad
antioxidante del fruto íntegro obtuvo un IC50 de 10,04 mg/mL en Euterpe oleracea
en tanto Euterpe precatoria Mart. obtuvo un IC50 de 1,35 mg/mL y de la raíz
resultó un IC50 de 0,54 mg/mL en ambas especies. Conclusión: Los frutos de
Euterpe precatoria y Euterpe oleracea colectados en Iquitos presentan una
excelente actividad antioxidante. De acuerdo al análisis fitoquímico del género
Euterpe, presentan triterpenos, esteroides, azúcares reductores, fenoles, taninos
y flavonoides en fruto y raíz de Euterpe precatoria. Cumarinas, fenoles, taninos y
flavonoides en fruto y raíz de Euterpe oleracea (39).

Según Sotero V. et al., (2011) publicaron “Evaluación de la actividad

antioxidante de seis frutales amazónicos: anona, castaña, chope, huasaí,
huito y uvilla”. Objetivo: Evaluar la capacidad antioxidante de los frutos de
anona, castaña, chopé, huasaí, huito y uvilla. Método: Se evaluó la actividad
antioxidante por el método DPPH y para la determinación de polifenoles se realizó
utilizando el reactivo de Folin-Ciocalteu. Resultado: El epicarpio de chopé exhibe
superior actividad antioxidante con IC50 de 6,02 µg/mL y la inferior actividad
antioxidante fue el fruto entero de “huasaí” con 1347,94 µg/mL, mientras la
máxima concentración de compuestos fenólicos se localiza en el mesocarpio del
huito con 137,15 mg/100g, en el fruto completo de “huasaí” con 56,799 mg/100g y
en la semilla de uvilla con 66,40 mg/100g. Conclusión: El epicarpio de chopé
tuvo mayor actividad antioxidante y el mesocarpio de huito tuvo mayor
concentración de compuestos fenólicos (40).

Según Cuzcano J, (2014) realizó un estudio “Evaluación bromatológica

y de antioxidantes fenólicos presentes en la pulpa de Euterpe precatoria
Mart. y Euterpe oleracea Mart. (huasaí)”. Objetivo: Evaluar la composición
bromatológica y antioxidantes fenólicos presentes en la pulpa integral
(mesocarpio y epicarpio) del fruto de las dos especies de “huasaí” de la amazonia

16
peruana. Método: Los polifenoles totales fueron determinados por métodos
espectrofotométricos desarrollado por Folin-Ciocalteau y para la capacidad
antioxidante utilizó el método DPPH. Resultado: Los resultados expresados en
base seca indicaron que el acaí de las 2 cosechas tienen un mayor contenido de
lípidos (49,4 % y 33,1 %), proteínas (13,8 % y 9,3 %), cenizas (5,2 % y 2,2 %) y
fibra dietética total (30,9 % y 20,0 %), polifenoles 5,02 y 2,20 g/100 g y la
capacidad antioxidante fue de 88 % y 87,8 % respectivamente. Conclusión: El
“huasaí” recolectado en Venezuela tiene un alto valor nutricional y contiene
compuestos antioxidantes que sugieren la necesidad de industrializarlo para
aprovechar al máximo sus propiedades (41).

Según Heredia C, (2014) realizó un estudio titulado “Evaluación de la

calidad nutricional y sensorial en tres formulaciones para obtener bebida
nutracéutica a partir de huasaí (Euterpe oleracea Mart.)”. Objetivo:
Evaluación de la calidad nutricional y sensorial en tres formulaciones para obtener
bebida nutracéutica a partir de huasaí (Euterpe oleracea Mart.). Método: El
método oficial Official Methods of Analysis (AOAC) para el análisis proximal, para
los compuestos nutracéuticos determinaron por métodos espectrofotométricos y
para la capacidad antioxidante usaron el método ORAC. Resultado:
Caracterización física, nutricional y componentes nutracéuticos del fruto fueron:
proteína 4 %, grasa 6 %, cenizas 1,4 % y fibra 20 %; fenoles 275,4 mg Eq.
AG/100g, flavonoles 5,57mg, quercitina Equiv./100g. La bebida contiene
antioxidantes: Fenólicos totales de 85,40 a 31,80 mg Eq. AG/100g, Antocianinas
de 20,56 a 7,65 mg.Cianidina-3-glucosido Equiv./100g, Flavonoles totales de 5,6 a
4,7 mg de quercetina Equiv./100g y para la Capacidad de antioxidantes de 78,3 a
27,5 medidos en valores de ORAC (mmol Trolox Equiv./100g). Los frutos fueron
recolectados en el Instituto de Investigación de la Amazonia Peruana (IIAP)
Conclusión: La bebida nutracéutica de “huasaí” (Euterpe oleracea Mart.), con
mayor nivel de preferencia sensorial en cuanto al sabor, color, olor y consistencia
es la bebida con la formulación F2 = 1:1,5; una parte de pulpa de “huasaí”, con
1,5 parte de agua (42).

17
- Importancia y justificación de la investigación

La importancia de este trabajo es comparar la actividad antioxidante del

extracto etanólico de la raíz y el fruto de Euterpe precatoria Mart. “huasaí” de
las provincias Maynas y Chanchamayo. La determinación de este conocimiento
permitirá aprovechar los subproductos que se generan en las industrias
nacionales de palmitos y contribuirá una alternativa de lograr ventajas
competitivas con productos de mayor valor agregado, de esta manera
coadyuvar la mejoría en salud y calidad de vida de las personas, disminuyendo
el riesgo de padecer algunas enfermedades no transmisibles.

 Aprovechar los residuos que se generan en las industrias nacionales de

palmitos.
 Contar con un recurso natural alterno como fuente de antioxidante
disminuyendo el riesgo de padecer enfermedades causadas por radicales
libres.
 Permitirá una alternativa de uso de la raíz generando nuevos productos con
valor agregado.

El presente trabajo de investigación es justificado por los siguientes valores:

Valor teórico

Esta investigación se realiza con el propósito de aportar al conocimiento

existente sobre actividad antioxidante de la raíz y el fruto de Euterpe
precatoria Mart. “huasaí”, con el método de Folin-Ciocalteu y DPPH
cuyos resultados podrán sistematizarse en una propuesta en empresas
agroindustriales y aprovechar los residuos que se generan en las industrias
nacionales de palmitos, permitirá una alternativa de uso de la raíz generando
nuevos productos con valor agregado, para ser incorporado como
conocimiento a las ciencias de la salud, y mejorar la condición de vida de las
personas.

18
 Valor práctico

Esta investigación se realiza porque existe la necesidad de disminuir el riesgo

de padecer enfermedades degenerativas causadas por radicales libres,
Euterpe precatoria Mart. “huasaí” como fuente natural de antioxidante de la
provincia con mayor actividad antioxidante. Otras investigaciones se han
enfocado en el análisis del fruto íntegro.

Valor metodológico

Se aplicó técnicas de investigación cualitativa y cuantitativa orientado al

análisis en relación a la actividad antioxidante del extracto etanólico de la raíz
y el fruto de Euterpe precatoria Mart. “huasaí” de Maynas y Chanchamayo,
una vez determinado en ambas variables los resultados obtenidos podrán ser
utilizados en otros trabajos de investigación.

- Objetivo del estudio

Comparar la actividad antioxidante del extracto etanólico de la raíz y el fruto de

Euterpe precatoria Mart. “huasaí” procedente de la provincia de Maynas
respecto a la especie oriunda de Chanchamayo.

- Hipótesis de investigación

La actividad antioxidante de extracto etanólico de la raíz, epicarpio y

mesocarpio del fruto de Euterpe precatoria Mart. “huasaí” procedente de la
provincia de Maynas es diferente al Euterpe precatoria Mart. “huasaí” de la
provincia Chanchamayo.

19
 II. MATERIALES Y MÉTODOS

La presente investigación se realizó la obtención del extracto etanólico, se evaluó

la solubilidad, el análisis fitoquímico y se determinó la cuantificación de fenoles
totales (FT) mediante los métodos Folin-Ciocalteu y la actividad antioxidante por
DPPH de la raíz, epicarpio y mesocarpio del fruto de Euterpe precatoria Mart.
“huasaí” procedentes de Maynas y Chanchamayo.

2.1 Enfoque y diseño

El enfoque fue cuantitativo, comparativo y prospectivo.

 Cuantitativa: Usa la recolección de datos para probar hipótesis, con

pruebas estandarizadas, aparatos de precisión y registros de datos
estadísticos (43).

 Comparativo: Estudio donde presenta dos o más poblaciones y es

necesario contrastar algunas variables para comprobar una hipótesis (43).

 Prospectivo: Las muestras de “huasaí” de cada provincia se recogieron

luego del planteamiento del problema. En este tipo de estudio se plantea
las posibles causas y se intenta definir los posibles efectos (43).

El diseño fue cuasi-experimental, el cual forma parte de los diseños

experimentales, también manipulan deliberadamente, al menos, una variable
independiente para observar su efecto y conexión con una o más variables
dependientes. En los diseños cuasi-experimentales los sujetos no se asignan
al azar a los grupos ni se emparejan, sino que dichos grupos ya están
formados antes del experimento (43).

- Materiales
 Baguetas
 Fiolas
 Viales
 Goteros
20
  Mechero
 Papel kraft
 Frascos de vidrio ámbar 1 L
 Embudos de vidrio
 Papel aluminio
 Gradilla de metal
 Tubos falcon
 Tubos de ensayo
 Papel filtro Whatman N°40
 Beackers
 Micropipetas

- Reactivos

 Molish N° CAS: 90-15-3

 Antrona N° CAS: 90-44-8

 Gelatina al 1 % N° CAS: 9000-70-8

 Ninhidrina N° CAS: 485-47-2

 Yoduro de potasio N° CAS: 7681-11-0

 Oxido de mercurio N° CAS: 21908-53-2

 Dragendorff N° CAS: 39775-75-2

 Magnesio metálico N° CAS: 7439-95-4

 Ácido clorhídrico N° CAS : 7647-01-0

 Borntranger N° CAS: 39775-75-2

 Hidróxido de sodio N° CAS: 1310-73-2

 Vainillina N° CAS: 121-33-5

 Hidroxilamina N° CAS: 7803-49-8

 Tricloruro férrico 1 % N° CAS: 7705-08-0

 Ácido sulfúrico 95-97 % N° CAS: 7664-93-9

21
  Cloroformo Nº CAS: 67-66 - 3

 Anhídrido acético Nº CAS: 108-24-7

 Ácido sulfúrico Nº CAS: 7664-93 - 9

 Trolox N° CAS: 53188-07-1

 Carbonato de sodio 7,5 % N° CAS: 497-19-8

 Ácido Gálico N° CAS: 149-91-7

 DPPH N° CAS: 1898-66-4

 Folin-Ciocalteu 10 % (Merck-Alemania)

- Solventes

 Acetona N° CAS: 67-64-1

 Cloroformo N° CAS: 67-66-3

 Acetato de etilo N° CAS: 141-78-6

 n-Hexano N° CAS: 110-54-3

 Benceno N° CAS: 71-43-2

 Etanol N° CAS : 64-17-5

 Agua destilada
-
- Equipos

 Espectrofotómetro Genesys 10 S UV- VIS.

 Balanza analítica serie 56377 Soehnle

 Estufa serie 51-11-004865 Memmert
 Baño maría Memmert-Cimatec
 Vórtex Velp Scientífica
 Campana extractora Serie 51- KTPERÚ
11-004877

22
2.2 Población, muestra y muestreo

Población
Nuestra población en términos estadísticos se considera infinita (por ser
desconocida) y está constituida por la raíz y el fruto de Euterpe precatoria
Mart. “huasaí” procedente de la provincia de Maynas (Dpto. Loreto); la raíz y
el fruto de Euterpe precatoria Mart. “huasaí” procedente de la provincia de
Chanchamayo (Dpto. de Junín).

Muestra
La colecta de la muestra vegetal fue de 4 kg de raíz y 8 Kg del fruto íntegro
de “huasaí” de cada provincia, de los cuales 1 Kg de raíz y fruto se han
separado como contra muestra y se trabajó a partir de 2 kg en raíces y 6 Kg
de frutos, de los cuales se separa el epicarpio del mesocarpio y de la semilla
del fruto.

Muestras representativas de 30 frutos de 2 kg de muestras fueron utilizadas

para medir la longitud de fruto (cm), diámetro de fruto (cm), peso de fruto (g).

Muestreo
Se empleó un método pseudoaleatorio, toda vez que no se disponía de un
marco conceptual para un sorteo puramente aleatorio.

Criterios de inclusión
La raíz y el fruto de Euterpe precatoria Mart. “huasaí” en estado fresco y
maduro.

Criterios de exclusión
Fruto, tallo y hoja de Euterpe precatoria Mart. “huasaí” inmaduro, verde y
pintón.

23
2.3 Variable(s) de estudio

- Variable dependiente
Actividad antioxidante del extracto etanólico de la raíz y el fruto de Euterpe
precatoria Mart. “huasaí”.

- Variable Independiente
Provincias (lugar de procedencia Maynas y Chanchamayo).

- Variable Interviniente
Partes de la palmera (raíz, epicarpio, mesocarpio del fruto).

2.4 Técnicas e instrumentos de recolección de datos

24
Tabla 4. Técnicas e instrumentos de recolección de datos de la investigación

Técnicas Instrumentos Recolección de datos

Cantidad de muestras: Raíz,

Certificación de identificación
Observación directa epicarpio y mesocarpio del
botánica.
fruto de “huasaí”.

Información bibliográfica de, Cuantificación de FT

Recolección de información
libros, papers, revistas. Determinación de la
capacidad antioxidante.

Contenido de compuestos
Análisis de cuantificación de FT (Folin- Método de espectrometría UV-
fenólicos y capacidad de
Ciocalteu) y la capacidad antioxidante Visible.
antioxidante.
(DPPH) de raíz, epicarpio y mesocarpio
del fruto “huasaí”.

25
2.5 Proceso de recolección de datos

En la presente investigación se utilizó diferentes herramientas para obtener

información. Conforme a lo que se deseaba investigar, la característica a
observar, el análisis de compuestos fenólicos y la actividad antioxidante de la
raíz y el fruto de “huasaí” procedente de Maynas respecto a la especie
oriunda de Chanchamayo relacionados en aprovechar los residuos que se
generan en las industrias nacionales de palmitos.

Se realizó el mismo proceso de las muestras de estudio para ambas

provincias

a. Se seleccionó la muestra vegetal, la cual estuvo constituida por la raíz y el

fruto “huasaí”.

b. Se procesó la especie vegetal “huasaí”.

c. Se realizó la solubilidad y el análisis fitoquímico de la raíz, epicarpio,

mesocarpio del fruto de “huasaí”.

d. Se realizó el análisis de compuestos fenólicos de la raíz, epicarpio,

mesocarpio del fruto de “huasaí”.

e. Se realizó el análisis de la capacidad antioxidante de la raíz, epicarpio,

mesocarpio del fruto de “huasaí”.

f. Se evaluó los resultados.

g. Procedimiento del análisis e interpretación de los resultados mediante la

aplicación de la estadística inferencial.

h. Presentación de la investigación final.

26
Recolección de muestras

Se recolectaron las muestras de “huasaí” 4 kg de raíz y 8 Kg del fruto íntegro de

Puerto Almendra a una altitud de 110 m.s.n.m del distrito de San Juan Bautista de
la provincia Maynas y del sector puente colgante Kimiri a una altitud de 650
m.s.n.m del distrito de Chanchamayo de la provincia de Chanchamayo, se
cosecharon en octubre de 2016. El estudio se realizó en el laboratorio de la
Universidad Privada Norbert Wiener entre los meses de enero 2017 – diciembre
2018.

El procesamiento de la especie vegetal “huasaí” procedente de ambas provincias

se efectuó mediante las siguientes etapas (44).

 Selección. De la especie vegetal recolectada se seleccionó la raíz y el fruto en

buen estado, se descartaron frutos inmaduros, se quitaron partículas que no
pertenecen a la especie de estudio, se procedió a lavar la raíz y el fruto de
“huasaí” con agua potable, en seguida se colocó en recipientes llenos con
agua hasta cubrir totalmente y el último lavado fue con agua destilada.

 Desecación. Se procedió el “Secado al aire libre” por tres días, la raíz y el

fruto se extendieron y removieron la evaporación de la humedad esparcido
encima del papel kraft. Luego se procedió a despulpar el fruto y se tuvo en
cuenta de no dejar el mesocarpio adherido al epicarpio.

 Molienda. Una vez seca la raíz se procedió a cortar 1cm aproximadamente y

a triturar el epicarpio, desmenuzar el mesocarpio del fruto en forma manual.

 Maceración. En Maynas los pesos de las muestras fueron: raíz (20 g),
epicarpio (136,85 g) y mesocarpio del fruto (24,45 g) y para Chanchamayo se
pesaron: raíz (20g), epicarpio (67,6 g) y mesocarpio del fruto (41,75 g); se
pusieron en frascos de vidrio ámbar con etanol de 96° cerrado
herméticamente a T° ambiente por dos semanas para el epicarpio,
mesocarpio del fruto y un mes para la raíz con agitación continua.

27
 Filtración. Se procedió utilizando papel filtro Whatman N° 40 a fin de
conseguir el extracto etanólico de la raíz, epicarpio y mesocarpio del fruto.
Trabajando cada uno de los órganos de la planta por separado.

 Secado. La obtención del extracto etanólico para cada una de las muestras se
llevó a una estufa a T° de 40°C por 3 días y se obtuvieron 6 extractos secos
de “huasaí” de raíz, epicarpio y mesocarpio del fruto de las dos provincias,
fueron reservados y rotulados en frascos de vidrio ámbar. Se evaluó el
rendimiento del extracto a partir de 2 kg de raíz y 6 Kg de fruto (epicarpio y
mesocarpio del fruto) para cada una de las provincias mediante la fórmula:

𝐠 𝐞𝐱𝐭𝐫𝐚𝐜𝐭𝐨
𝐑𝐞𝐧𝐝𝐢𝐦𝐢𝐞𝐧𝐭𝐨 = 𝟏𝟎𝟎 𝐱 (1)
𝐠 𝐦𝐚𝐭𝐞𝐫𝐢𝐚𝐥 𝐯𝐞𝐠𝐞𝐭𝐚𝐥 𝐬𝐞𝐜𝐨

Ecuación 1. Determinación del porcentaje de rendimiento del extracto

etanólico de “huasaí”

Fuente: Rodríguez E. (45).

Prueba de solubilidad

En cada tubo de ensayo se puso 1 mL del extracto etanólico de raíz, epicarpio y

mesocarpio del fruto de “huasaí” procedente de ambas provincias. Se adicionó a
cada uno de los tubos 1 mL de los solventes con distintas polaridades, luego se
agitaron repetidamente y notamos los resultados (46, 47).

Análisis fitoquímico de Euterpe precatoria Mart. “huasaí”

Se identificó los metabolitos secundarios en la raíz, epicarpio y mesocarpio del

fruto de la provincia Maynas y Chanchamayo por medio del método descrito por
Olga Lock de Ugaz (47). Se efectuó con 17 tubos de ensayo, usando 0,5 mL en
cada tubo de solución del extracto etanólico de la raíz, epicarpio y mesocarpio del
fruto de “huasaí” para ambas provincias. Luego se añadió I a V gotas de los
reactivos químicos.

28
Procedimiento y método

A. Determinación de polifenoles totales

Rivas-Morales C. manifiesta: “Se determina la capacidad que tienen los

polifenoles para reducir el Mo (VI) a Mo (V), como resultado de tal reacción, el
reactivo de color amarillo adquiere un intenso color azul que se mide con el
espectrofotómetro” (23)

Método del reactivo Folin-Ciocalteu

El método descrito por Moreno-Escamilla et al. 2015 determina el contenido de FT

que se encuentran en diversos extractos vegetales, se usa el ácido gálico como
estándar.

García M, menciona “Se basa en la reducción de los fenoles totales por una
mezcla de ácidos fosfomolíbdico y fosfotúngstico de color amarillo, y es a partir de
esa mezcla de ambos ácidos que se producen iones de molibdato y tungsteno. La
reacción se lleva en condiciones básicas con el fin de que se genere el ión
fenolato que reduce a la mezcla de ácidos y genera la formación de un complejo
de Mo (V) que presenta una de coloración azul cuya absorbancia se mide a una
longitud de onda de 765 nm” (48).

Se cuantifica mediante espectrofotometría en fundamento a una recta patrón de

ácido gálico, la concentración de fenoles se calcula en base a la curva de
calibración y los resultados se expresan en mg de ácido gálico/g (48).

29
Figura 1. Estructura química del ácido gálico
Fuente: García M. 2015

Figura 2. Reacción entre el ácido gálico y el reactivo Folin-Ciocalteu

Fuente: Muñoz-Bernal O. 2017 (49).

30
Procedimiento del método del reactivo Folin-Ciocalteu.

Se pesó el extracto seco de la raíz (0.5g), epicarpio (1g) y mesocarpio del fruto
(1g) originario de Maynas; raíz (0.5g), epicarpio (0.5g) y mesocarpio del fruto (1g)
originario de Chanchamayo seguidamente se disolvió en 50 mL de metanol en
una fiola, luego se agitaron enérgicamente.

Cuantificación de FT mediante el método Folin-Ciocalteu

La concentración de FT fue evaluada mediante espectrofotometría UV-Visible a

una longitud de onda de 765 nm fundamentándose en una reacción colorimétrica
de óxido-reducción. El agente oxidante usado fue el reactivo de Folin-Ciocalteu
(3,4-dioxo-3,4-dihidronaftalen-1-sulfonato de sodio) (47).

Preparación de la curva de calibración del ácido gálico

Se empleó el ácido gálico como estándar para elaborar una solución madre de
100 ppm (0.1 mg/mL).

 El ácido gálico (25mg) se puso en una fiola de 25 mL y se enrasó con agua

destilada.

 Se cogió una alícuota (1 mL), se trasladó a una fiola de 10 mL y se enrasó

con agua destilada hasta alcanzar una solución de 100 ppm de ácido gálico.

 Luego de esta solución se cogieron 100 µL, 200 µL, 300 µL, 400 µL y 500 µL
para elaborar las diluciones de 1 ppm, 2 ppm, 3 ppm, 4 ppm y 5 ppm
respectivamente.

 Previo de aforar los estándares a 10 mL, se añadió 1,25 mL de reactivo de

Folin-Ciocalteu a cada uno y se agitaron.

 Posteriormente se aumentó 6,25 mL de solución de Na2 CO3 20 % a cada

dilución y se enrasó a 10 mL.

31
 Reposar por 2 horas protegido de la luz.

 Preparar un blanco de 0 ppm con 1,25 mL de reactivo Folin-Ciocalteu y 6,25

mL de solución Na2 CO3 20 % en una fiola de 10 mL.

Preparación de la muestra

 Se cogió una alícuota (2 mL) y se trasladó a una fiola de 50 mL.

 Después se cogió 1 mL de esta solución y se trasladó a una fiola de 10 mL.

 Por último, se cogió una alícuota de 2,5 mL, se incrementó 3,75 mL de

reactivo Folin-Ciocalteu, se agitó en vórtex y se adicionó 3,75 mL de solución
de Na2CO3 20 %.

 Reposar por 2 horas alejado de la luz.

 Preparar un blanco. Tomar una alícuota de 2,5 mL de la dilución final y

enrasar a volumen 10 mL. La absorbancia fue medida en un
espectrofotómetro UV- visible a una longitud de onda de 765 nm.

 Calcular con la siguiente ecuación.

𝐦𝐠
𝐠 ] 𝐱 𝐅𝐝 𝐱 𝐕𝐨𝐥. 𝐅𝐢𝐧𝐚𝐥
𝐦𝐠 𝐀𝐆 [
[ ]= (2)
𝐠 𝐝𝐞 𝐞𝐱𝐭𝐫𝐚𝐜𝐭𝐨 𝐯𝐨𝐥. 𝐌𝐮𝐞𝐬𝐭𝐫𝐚

Fd: Factor de dilución

Ecuación 2. Determinación de la cuantificación de FT en mg Eq.

AG/g de extracto mediante el método de Folin-Ciocalteu.

Fuente: García M, Fernández S, Fuentes L. 2015 (48).

32
B. Determinación de la actividad antioxidante

Se desarrolló por medio del método DPPH basándose en su capacidad para

captar RL y los resultados se expresaron en valores IC50 y TEAC.

Método de captación del radical DPPH

Fue desarrollado por BRAND-WILLIAMS et al., con algunas modificaciones

(50).

Kedare S. menciona “Es un método fácil, rápido y económico; actúa como

captadores de RL o donantes de hidrógeno para transformarse en una molécula
estable y diamagnética. El método DPPH se puede emplear en disolventes
orgánicos acuosos y no polares para investigar antioxidantes tanto hidrófilos como
lipófilos. El fundamento del método DPPH consiste en que este radical tiene un
electrón desapareado y es de color violeta profundo, decolorándose hacia amarillo
pálido por la reacción de la aparición de una sustancia antioxidante, la cual es
medida con el espectrofotómetro a 517 nm. Por diferencia de absorbancia se halla
el porcentaje de captación de radical libre DPPH. Los resultados se expresan
como valor de IC50 que determina la concentración de sustrato que origina una
reducción del 50 % en el color del DPPH, el parámetro se da a menor valor del
IC50 indica mayor actividad antioxidante” (51).
Los resultados de la capacidad antioxidante se expresan como porcentaje
de inhibición de DPPH (mediante la construcción de una curva patrón y se obtiene
mediante un cálculo IC50 de la muestra) y TEAC (correspondiente a µmol de
Equivalente Trolox/g muestra). Se elaboró una curva del porcentaje de inhibición
versus concentración de las soluciones de Trolox y se calculó el IC50 (52).

Figura 3. Estructura química del estándar Trolox

Fuente: Sigma Aldrich. Lab-Merck (53).
33
 Figura 4. Reacción química entre el radical DPPH y la especie
antioxidante
Fuente: Kedare S, Singh R. (51).

 Porcentaje de inhibición del radical DPPH y la especie antioxidante

Se determina mediante la siguiente ecuación:

𝐏𝐨𝐫𝐜𝐞𝐧𝐭𝐚𝐣𝐞 𝐝𝐞 𝐢𝐧𝐡𝐢𝐛𝐢𝐜𝐢ó𝐧
𝑨𝒎𝒖𝒆𝒔𝒕𝒓𝒂 − 𝑨𝒃𝒍𝒂𝒏𝒄𝒐 (3)
=𝟏−( ) ∗ 𝟏𝟎𝟎
𝑨𝑹

Ecuación 3. Determinación del porcentaje de inhibición del radical DPPH

Fuente: Márquez C.2014 (52)
Donde:
Amuestra = Absorbancia de la muestra (con el radical presente)
A blanco = Absorbancia del blanco (con etanol añadido)
AR = Absorbancia de referencia (incluye el radical y el solvente de la muestra)

Rivas-Morales C. explica: “Con los valores obtenidos de porcentaje Inhibición de

cada una de las concentraciones, se procedió a realizar una regresión lineal
simple con dichos valores y se obtuvo la ecuación” (23).

y = mx + b (4)

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Ecuación 4. Ecuación de la recta
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}}}}}}}}}}}}}}}}}
Fuente: Rivas-Morales C. 2016 (32).
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Para evaluar la IC50 se sustituyó el valor correspondiente al 50 % de inhibición de
DPPH en el eje “y” y en eje “x” la concentración de antioxidante indispensable
para inhibir en un 50 % el DPPH (23).

Seguidamente se calculó el TEAC µmol ET/g mediante la siguiente ecuación:

𝐈𝐂𝟓𝟎 𝐝𝐞 𝐓𝐫𝐨𝐥𝐨𝐱 (5)

𝐓𝐄𝐀𝐂 =
𝐈𝐂𝟓𝟎 𝐝𝐞𝐥 𝐟𝐫𝐮𝐭𝐨

Ecuación 5. Determinación de TEAC (52)

Fuente: Márquez C. 2014 (51).

Donde:
 IC50 de Trolox = concentración (moles de Trolox/L de solvente) donde el
antioxidante Trolox inhibe el 50 % de los RL presentes.

 IC50 del fruto = concentración (mg de fruto/L de solvente) donde el

antioxidante del fruto inhiben el 50 % de los RL presentes.

- Procedimiento del método DPPH

Preparación de la curva de calibración del estándar Trolox

 Se pesó 5mg de Trolox y se disolvió en 50mL de solvente agua: etanol
(1:1) en una fiola de 50mL.
 Se realizó 5 diluciones a diferentes concentraciones.
 Leer en el espectrofotómetro.

- Preparación del radical DPPH

 Elaboración de la solución DPPH: Se elaboró una solución stock

concentrada de DPPH se disolvió con metanol (10 mg de DPPH diluido
hasta 25 mL con metanol en una fiola ámbar). Luego se disolvió la

35
 solución stock de DPPH con metanol hasta conseguir una absorbancia de
0,9 a 517 nm.

 Preparación de la solución matriz de la muestra: Se disuelve los mg de

extracto seco en 10 mL de solvente soluble al extracto seco

 Diluciones de las muestras: Se procederá a preparar las diluciones

usando esta ecuación:

C1 x V1=C2 x V2

C1: concentración de la solución matriz

C2: concentración de la dilución a preparar
V1: volumen de la solución matriz a necesitar
V2: volumen del vial a preparar 4 mL

 Preparación de la muestra con reactivo DPPH, a 5 concentraciones

diferentes por triplicado. Reposar por 30 minutos protegido de la luz.

 Cálculo del porcentaje de inhibición de DPPH.

Tabla 5. Procedimiento para la determinación de la actividad

antioxidante del extracto etanólico de “huasaí”

Método DPPH
Tubo Blanco Tubo control DPPH Tubo Muestra
Metanol 800 μL - -
Agua - 400 μL -
Muestra 400 μL - 400 μL

DPPH - 800 μL 800 μL

36
  Tubo blanco: es el blanco de la muestra donde se va a leer la lectura
del color de la muestra debido a que esto provocara un aumento de la
absorbancia durante el análisis.
 Tubo control: es el blanco de DPPH donde se va a leer la lectura del
DPPH.

2.6 Métodos de Análisis estadístico

Los resultados obtenidos en el laboratorio fueron registrados en un

archivo de Microsoft Excel 2016, luego de verificar su consistencia se
procedió a trasladarlo a una base de datos en el programa estadístico
SPSS Versión 24.0. El análisis estadístico consistió:

 Para poder dar validez estadística y comprobar la linealidad del método

analítico usado se calculó el coeficiente de determinación R2 de la curva
de calibración mediante regresión lineal.

 Se calculó el promedio del contenido de FT según muestra (raíz, epicarpio

y mesocarpio del fruto) por provincia (Maynas y Chanchamayo) en mg Eq.
AG /g y en términos relativos (%).

 Se determinaron y compararon los valores de IC50 µg/mL mediante

regresión lineal para el patrón estándar Trolox y según muestra por
provincia.

 Se obtuvieron las estadísticas descriptivas (media, desviación estándar

máximo y mínimo) de FT, actividad antioxidante expresada en IC50 y
TEAC para el patrón estándar Trolox y para cada muestra por provincia;
además se realizaron comparaciones globales mediante pruebas de
Análisis de Varianza (ANOVA) y comparaciones múltiples mediante los
subconjuntos homogéneos de Tukey al 5% de significancia.

37
  Finalmente, el contenido de FT y los valores de IC50 obtenidos fueron
contrastados entre provincias para cada parte de la muestra mediante
pruebas T de Student al 5% de significancia.

2.7 Aspectos bioéticos

En este estudio se consideró aspectos de autenticidad y veracidad de los

datos obtenidos y reflejados en la investigación, priorizando la protección del
medio ambiente y la propiedad intelectual.

38
 III. RESULTADOS

3.1 Recolección y caracterización morfológica de la raíz, epicarpio y

mesocarpio del fruto de Euterpe precatoria Mart. “huasaí”

Las muestras de “huasaí” fueron cosechadas en estado maduro de la

localidad de Puerto Almendra del distrito de San Juan Bautista de la provincia
de Maynas del departamento de Loreto y de la localidad del Sector puente
Colgante Kimiri del distrito de Chanchamayo de la provincia de Chanchamayo
del departamento de Junín, la certificación de identificación botánica fue
realizada por el Blgo. José Ricardo Campos De La Cruz. Biólogo Colegiado -
N° 3796- Inscrito con el N° 36 en el Registro de Profesionales que realizan
certificación taxonómica de especímenes y productos de flora- Resolución
Directoral N° MINAGRI- DGFFS- DGEFFS.

Tabla 6. Resultado de características físicas de la raíz y el mesocarpio

del fruto de Euterpe precatoria Mart. "huasaí" de ambas provincias

Comparación Prov. Prov.

características físicas Maynas Chanchamayo
Peso del fruto (g) 1,71 1,56
Diámetro del fruto (cm) 1,40 1,34
Longitud del fruto (cm) 1,31 1,29
Peso de raíz (g) 13,4 12,51
Diámetro de raíz (cm) 2,10 1,50
Longitud de raíz (cm) 40,20 38,50

En la tabla 6 se muestra la comparación de las características físicas del

fruto “huasaí”, es esférico y gran parte del peso del fruto es endocarpio. Los
resultados del fruto y raíz oriundo de Maynas fueron mayores en longitud y
peso respectivamente en comparación a Chanchamayo.

39
Figura 5. Muestras de estudio de "huasaí" de Maynas
En la figura 5 se observa el fruto maduro, el epicarpio color negro-púrpura, el
mesocarpio muy fibroso, la semilla que representa la mayor parte del fruto y la
raíz color anaranjado de “huasaí” procedente de Maynas.

40
Figura 6. Fruto y mesocarpio del fruto de “huasaí”. (a) Maynas (b)
Chanchamayo
En la figura 6, el fruto maduro oriundo de Maynas es ligeramente más grande que
el fruto maduro de Chanchamayo y el mesocarpio del fruto de Maynas presenta
fibras más delgadas que el mesocarpio del fruto de Chanchamayo.

41
Figura 7. Muestra de estudio “huasaí” (a) Epicarpio de Maynas. (b) Epicarpio
de Chanchamayo (c) Raíz de Maynas (d) Raíz de Chanchamayo
En la figura 7 la muestra procedente de Maynas el epicarpio del fruto maduro es
de color violeta oscuro y de Chanchamayo el fruto maduro es de color granate.
Las raíces son de color anaranjado rojizo procedente de ambas provincias.

42
3.2 Obtención de rendimiento de las muestras

El rendimiento se obtuvo a partir de 2 kg de raíz y 6 kg del fruto integro de los

cuales se separó el epicarpio del mesocarpio y la semilla del fruto procedente
de ambas provincias.

Tabla 7. Resultado del rendimiento de la raíz, epicarpio y mesocarpio del

fruto de Euterpe precatoria Mart. "huasaí" de ambas provincias

Euterpe precatoria Mart.

Porcentaje del Rendimiento
“huasaí”
Muestra Prov. Maynas Prov. Chanchamayo
Raíz 4,5 6,2
Epicarpio 0,9 1,5
Mesocarpio del fruto 13,7 5,9

En la tabla 7, se observó mayor rendimiento en la raíz y el epicarpio de

“huasaí” de Chanchamayo y mayor rendimiento en el mesocarpio del fruto
procedente de Maynas.

3.3 Prueba de solubilidad en diferentes solventes

La finalidad de esta prueba es determinar el comportamiento del extracto en

solventes con diferente polaridad (46).

43
 Tabla 8. Solubilidad del extracto etanólico de la raíz, epicarpio y
mesocarpio del fruto de Euterpe precatoria Mart. "huasaí"

N° MUESTRA SOLVENTE SOLUBILIDAD

MAYNAS CHANCHAMAYO
1 R Agua Ligeramente Ligeramente
Insoluble insoluble
E Insoluble Insoluble
M Ligeramente Ligeramente
insoluble insoluble
2 R Etanol Soluble Soluble
E
M
3 R Metanol Insoluble Insoluble
E Insoluble Insoluble
M Insoluble Insoluble
4 R Acetona Ligeramente Ligeramente
insoluble insoluble
E Ligeramente Ligeramente
insoluble insoluble
M Insoluble Insoluble
5 R Cloroformo Insoluble Insoluble
E Insoluble Insoluble
M Insoluble Insoluble
6 R Acetato de Insoluble Insoluble
E etilo Insoluble Insoluble
M Insoluble Insoluble
7 R N - hexano Insoluble Insoluble
E Insoluble Insoluble
M Insoluble Insoluble
8 R Benceno Insoluble Insoluble
E Insoluble Insoluble
M Insoluble Insoluble
R: Raíz E: Epicarpio M: Mesocarpio del fruto

En la tabla 8, se observó el extracto etanólico de la raíz, epicarpio y mesocarpio

del fruto de "huasaí" procedente de Maynas y Chanchamayo son solubles en
etanol a 96°.

44
3.4 Análisis fitoquímico de Euterpe precatoria Mart “huasaí”

Según Olga Lock de Ugaz, el análisis fitoquímico permite determinar cualitativamente los principales metabolitos secundario
del extracto etanólico de “huasaí” (47).

Tabla 9. Resultado del análisis fitoquímico de Euterpe precatoria Mart. “huasaí”

PROV. PROV. PROV. PROV.

MAYNAS CHANCHAMAYO MAYNAS CHANCHAMAYO

Mesocarpio

Mesocarpio
METABOLITO REACTIVO DE

Epicarpio

Epicarpio
SECUNDARIO IDENTIFICACIÓN

del fruto

del fruto
RESULTADO OBTENIDO
Raíz

Raíz
R: Violeta pardo R: Violeta pardo
Molish +
1 ++ ++ + + ++ + E: Violeta pardo E: Violeta pardo
H2SO4
Carbohidratos M: Violeta pardo M: Violeta pardo
generales R: Anillo verdoso R: Anillo verdoso
Antrona+
2 + ++ + + + + E: Anillo verdoso E: Anillo verdoso
H2SO4
M: Anillo verdoso M: Anillo verdoso
45
 R: ppdo. rojo R: ppdo. Rojo
Azúcares Fehling A +
3 ++ _ + ++ _ + E: Naranja E: Naranja
reductores Fehling B
M: ppdo. rojo M: ppdo. rojo
R: Verde a oscuro R: R: Verde a oscuro
Compuestos
4 FeCl3 +++ _ _ +++ + _ E: Amarillo E: Verde oscuro
fenólicos
M: Amarillo M: Amarillo
R: Rojo R: Rojo
Flavonoides 5 Shinoda ++ + + + + + E: Rojo E: Rojo
M: Rojo M: Rojo
R: Naranja rojizo R: Rojo a naranja
Catequinas y
6 Rosenheim _ _ _ _ + _ E: Naranja E: Rojo
Antocianinas
M:Naranja M:Naranja
R: Rojo en fase R: Rojo en fase
acuosa acuosa
E: Rojo en fase E: Rojo en fase
Antraquinona 7 Borntrager +++ + + ++ + _
acuosa acuosa
M: Rojo en fase
M: Amarillo
acuosa
R: ppdo. lechoso R: ppdo. lechoso
Taninos 8 Gelatina +++ ++ ++ +++ ++ ++ E: ppdo. lechoso E: ppdo. lechoso
M: ppdo. lechoso M: ppdo. lechoso
46
 R: Anillo azul
R: Azul
verdoso
Esteroides 9 Lieberman ++ + + +++ +++ +
E: azul verdoso E: azul verdoso
M: Rojo M: Rojo
R: Azul violácea R: Azul
E: Azul violácea E: Azul intenso
Aminoácidos 10 Ninhidrina + + + + + +
M: Azul violácea M: Azul violácea
R: Rojo a Naranja R: Rojo a Naranja
11 Dragendorff +++ + +++ +++ + +++ E: Rojo a Naranja E: Rojo a Naranja
M: Rojo a Naranja M: Rojo a Naranja
R: Blanco a crema R: Blanco a crema
12 Mayer + ++ ++ + ++ ++ E: Blanco a crema E: Blanco a crema
M: Blanco a crema M: Blanco a crema
R: Grisáceo R: Grisáceo
Alcaloides
13 Bertrand _ ++ ++ _ ++ ++ E: ppdo. blanco E: ppdo. blanco
M: ppdo. Blanco M: ppdo. blanco
R: Rojo a Naranja R: Naranja
14 Sonnenschein ++ ++ ++ + ++ +++ E: Naranja E: Naranja
M: Rojo a Naranja M: Rojo a Naranja

47
 R: ppdo. rojo R: ppdo. rojo
Compuestos
carbonilos 15 Hidroxilamina _ _ _ _ _ _ E: ppdo. rojo E: ppdo. rojo
M: ppdo. rojo M: ppdo. rojo
R: Espuma R: Espuma
Prueba de
16 + _ _ + _ _ E: Sin espuma E: Sin espuma
Saponinas agua
M: Sin espuma M: Sin espuma
R: Anillo rojo a R: Anillo rojo a
pardo pardo
E: Anillo rojo a E: Anillo rojo a
17 Vainillina +++ +++ +++ +++ +++ +++ pardo pardo
Glucósidos
M: Anillo marrón
pardo M: Anillo rojo a
pardo

R: Raíz E: Epicarpio M: Mesocarpio del fruto

No detectable _ Escaso + Moderado ++ Abundante +++

48
 En la tabla 9 se comprobó la presencia de metabolitos secundarios que
poseen actividad antioxidante, como flavonoides y taninos en raíz, epicarpio y
mesocarpio del fruto de la especie de estudio para ambas provincias. Se
identificó compuestos fenólicos en raíz y epicarpio en la provincia de
Chanchamayo y solo en raíz en la provincia de Maynas, además se
encontraron catequinas y antocianinas en el epicarpio solo en la provincia de
Chanchamayo. La raíz de la provincia de Maynas y Chanchamayo
evidenciaron la presencia de carbohidratos generales, azúcares reductores,
flavonoides, antraquinonas, esteroides, aminoácidos, alcaloides, saponinas,
glucósidos; destacando a compuestos fenólicos, flavonoides y taninos que le
confieren propiedades antioxidantes.

3.5 Resultado de cuantificación del estándar acido gálico

Para elaborar la curva de calibración se realizó con el estándar ácido gálico a

concentraciones de 1,0; 2,0; 3,0; 4,0 y 5,0 ppm (µg/mL) a partir de una matriz
de ácido gálico 100 ppm, se leyó la absorbancia a 765nm.para cada muestra
y se trabajó por triplicado.

Tabla 10. Absorbancia del estándar de ácido gálico a 765 nm

Concentración (mg/mL) Absorbancia promedio

1 0,13
2 0,25
3 0,42
4 0,54
5 0,65

En la tabla 10, se midió la absorbancia de las soluciones de ácido gálico,

luego se obtuvo una curva de calibración del estándar ácido gálico
correspondiente.

49
 Figura 8. Curva de calibración de ácido gálico

Valores de R2 cercano a 1 dan validez a los valores de FT del estándar ácido

gálico (54).

Los valores obtenidos a 765 nm. En la curva de calibración se interpolaron y se

obtuvieron compuestos fenólicos totales, los resultados convertidos y
expresados en mg Eq. de AG/g, se utilizó la concentración de ácido gálico con
la absorbancia mediante la siguiente fórmula (55).

𝐀𝐛𝐬𝐨𝐫𝐛𝐚𝐧𝐜𝐢𝐚 + 𝟎, 𝟎𝟎𝟐𝟏
[𝑨𝒄𝒊𝒅𝒐 𝒈á𝒍𝒊𝒄𝒐] =
𝟎, 𝟏𝟑𝟑𝟏

Fuente: Cruzado M. (55).

50
3.6 Resultado de la cuantificación de FT para raíz, epicarpio y mesocarpio
del fruto de la provincia Maynas y Chanchamayo

Cálculos:

𝐦𝐠
𝐠 ] 𝐱 𝐅𝐝 𝐱 𝐕𝐨𝐥. 𝐅𝐢𝐧𝐚𝐥
𝐦𝐠 𝐀𝐆 [
[ ]=
𝐠 𝐝𝐞 𝐞𝐱𝐭𝐫𝐚𝐜𝐭𝐨 𝐯𝐨𝐥. 𝐌𝐮𝐞𝐬𝐭𝐫𝐚

Fd: Factor de dilución

- Mesocarpio del fruto de la provincia de Chanchamayo: 12 500

- Raíz de la provincia de Chanchamayo: 25 000
- Epicarpio de la provincia de Chanchamayo: 25 000
- Mesocarpio del fruto de la provincia de Maynas: 12 500
- Raíz de la provincia de Maynas: 25 000
- Epicarpio de la provincia de Maynas: 24 338

Volumen muestra: 2 mL

Volumen final en la lectura: 2,5 mL

51
Tabla 11. Resultado de absorbancias de FT de los extractos etanólicos por muestra de Euterpe precatoria Mart.
“huasaí” de ambas provincias

[µg ácido gálico/ mL

PROVINCIAS MUESTRAS ABSORBANCIAS Media
extracto]
0,65 152,58
0,65 152,82
Raíz 152,58
MAYNAS 0,65 152,34
0,06 13,91
0,06 15,29
Epicarpio 14,60
0,66 14,59
0,03 4,09
Mesocarpio del 0,05 5, 62
4,86
fruto 0,04 4,86
0,65 150,00
CHANCHAMAYO

0,69 161,74 155,87

Raíz 0,66 155,86
0,09 21,57
0,08 18,99
Epicarpio 20,28
0,08 20,27
0,07 8,08
Mesocarpio del
0,09 10,89
fruto 9,49
0,08 9,49

En la Tabla 11 se muestra los resultados de las absorbancias por triplicado y la media del extracto etanólico de la raíz, epicarpio
y mesocarpio del fruto de las dos provincias.

52
 Tabla 12. Resultado de FT de los extractos etanólicos de Euterpe
precatoria Mart “huasaí” expresados en mg Eq. de AG/g

Cuantificación de FT (mg Eq. AG/g)

Euterpe precatoria Mart. Prov. Maynas Prov. Chanchamayo
“huasaí”
Raíz 152,58 155,87
Epicarpio 14,60 20,28
Mesocarpio del fruto 4,86 9,49

En la tabla 12 se observa el resultado de la cuantificación de FT con el reactivo

de Folin- Ciocalteu siendo mayor en la muestra de raíz (155,87mg Eq. AG/g),

seguida por el epicarpio y por último el mesocarpio del fruto de Chanchamayo

respecto a Maynas.

Tabla 13. FT expresados en porcentaje de Euterpe precatoria Mart.

“huasaí” mediante el Método Folin-Ciocalteu

Provincias Muestras Porcentaje de FT

Raíz 15,2
Maynas Epicarpio 1,4
Mesocarpio del fruto 0,4
Raíz 15,5
Chanchamayo Epicarpio 2,0
Mesocarpio del fruto 0,9

En la tabla 13 indica el resultado del porcentaje siendo superior la

cuantificación de FT con el reactivo de Folin-Ciocalteu de las muestras de raíz
(15,5 %), epicarpio (2 %) y mesocarpio (0,9 %) del fruto en la provincia de
Chanchamayo respecto a la provincia de Maynas.

3.7 Actividad antioxidante del extracto etanólico de la raíz, epicarpio y

mesocarpio del fruto de “huasaí” en IC50 µg/mL procedente de ambas
provincias

53
 Para el método DPPH, se calculó el IC50 de Trolox y de los extractos etanólicos de las muestras de “huasaí” de ambas
provincias. Un valor inferior de IC50 indica superior poder antioxidante (51).

Curva de calibración Trolox Abs Vs. concentración (Trolox)

100.00 0.700
90.00
0.600
80.00

Absorbancia
y = 13.993x + 0.1271
70.00 R² = 0.9988 0.500
% Inhibición

60.00
0.400
50.00
40.00 0.300 y = -0.0839x + 0.5986
30.00 R² = 0.9988
20.00 0.200
10.00
0.100
0.00
0 5 10 0.000
0 2 4 6 8
Concentración (ug/mL) A Concentración Trolox (ug/mL) B

Figura 9. Porcentaje de Inhibición vs. Concentración estándar Trolox

En la figura 9 se observa al Trolox que al ser el estándar siempre exhibirá un mayor porcentaje de inhibición.
Valores de R2 cercano a 1 dan validez a los valores de IC 50 del estándar Trolox (54).

54
 60 Raíz de la provincia Maynas Raíz de la provincia Chanchamayo
80

% Inhibición
60

Inhibición
40
40
y = 12.897x + 0.0965 y = 15.084x + 0.4139
20
R² = 0.9991 20 R² = 0.9987
0 0

%
0 5 0 2 4 6
a d
Concentración (µg/mL) Concentración (µg/mL)

Epicarpio de la provincia Maynas Epicarpio de la provincia

80 Chanchamayo
100
% Inhibicón

60

% Inhibicion
40 y = 0.053x + 3.4326 50 y=0.1075x + 6.1344
20 R² = 0.9967 R² = 0.9979
0
0
0 500 1000
0 500 1000 1500
b e
Concentración (µg/mL) Concentración (µg/mL)

Mesocarpio del fruto de la Mesocarpio del fruto de la

100 provincia Maynas 100 provincia Chanchamayo
% Inhibición

Inhibición
50 50 y = 0.0128x + 3.0781
y = 0.0098x + 0.0572
R² = 0.9998
R² = 0.9988
0 0
0 5000 10000 0 5000 10000
f

%
Concentración (µg/mL) c Concentración (µg/mL)

Figura 10. Datos del análisis de regresión lineal. Gráfico del porcentaje de inhibición vs. Concentración de los
extractos etanólicos de “huasaí” de Maynas y Chanchamayo

55
En la figura 10 se observa que, los mayores porcentajes de inhibición a diferentes
concentraciones de “huasaí” presentaron las muestras procedentes de
Chanchamayo.

Tabla 14. Resultado de IC50 µg/mL del estándar Trolox

ESTÁNDAR TROLOX
Concentración en Absorbancia % Inhibición de IC50
tubo (µg/mL) promedio DPPH (µg/mL)
6,25 0,08 86,9
5 0,17 71,1
3,75 0,29 51,3 3,56
2,5 0,37 36,7
1,25 0,49 16,9

En la tabla 14 se observa las concentraciones (µg/mL), Absorbancia promedio,

porcentajes de inhibición de DPPH y el valor de IC50 de Trolox antioxidante
sintético. El Trolox como estándar, siempre exhibirá un menor valor de IC50 a
comparación de los extractos etanólicos de “huasaí”.

Tabla 15. Resultado de IC50 µg/mL de la raíz de "huasaí" de la provincia

Maynas

Concentración del Absorbancia Porcentaje de IC50

extracto (µg/mL) Promedio inhibición de (µg/mL)
DPPH
4,18 0,27 54,4
2,09 0,44 26,1
1,04 0,52 13,9 3,86
0,52 0,56 6,5
0,26 0,58 3,9

En la Tabla 15 se observa el extracto etanólico de la raíz de "huasaí" de la

provincia Maynas presentó alta capacidad antioxidante a una concentración de
4,18 µg/mL con IC50 de 3,86 µg/mL.

56
Tabla 16. Resultado de IC50 µg/mL de la raíz de "huasaí" de la provincia
Chanchamayo

Porcentaje de
Concentración del Absorbancia IC50
inhibición de
extracto (µg/mL) Promedio (µg/mL)
DPPH
4,21 0,21 63,94
2,10 0,40 32,93
1,05 0,51 15,20 3,28
0,52 0,55 7,85
0,26 0,57 5,38

En la tabla 16 el extracto etanólico de la raíz de "huasaí" de la provincia

Chanchamayo, presentó alta capacidad antioxidante a una concentración de
4,21µg/mL con un porcentaje de inhibición de DPPH de 63,9 % y un IC50 de 3,28
µg/mL.

Tabla 17. Resultado de IC50 µg/mL del epicarpio de "huasaí" de la

provincia Maynas

Porcentaje
Concentración del Absorbancia IC50
de inhibición
extracto (µg/mL) Promedio (µg/mL)
de DPPH
1333,33 0,19 72,8
666,66 0,37 40,8
333,33 0,48 21,8 878,63
166,66 0,53 12,2
83,33 0,57 6,0

En la Tabla 17 se observa que a concentraciones de 1333,33 µg/mL del extracto

etanólico del epicarpio de "huasaí" de la provincia Maynas presenta un valor
mayor de IC50 de 878,63 µg/mL.

57
Tabla 18. Resultado de IC50 µg/mL del epicarpio de "huasaí" de la provincia
Chanchamayo

Concentración del Absorbancia Porcentaje de IC50

extracto (µg/mL) Promedio inhibición de (µg/mL)
DPPH
816,66 0,14 93,0
666,66 0,18 77,7
333,33 0,36 44,2 408,05
166,66 0,47 24,4
83,33 0,53 13,1

En la Tabla 18 se observa que a concentraciones de 816,66 µg/mL del extracto

etanólico de epicarpio de "huasaí" de la provincia Chanchamayo presenta un
mayor valor de IC50 de 408,05 µg/mL.

Tabla 19. Resultado de IC50 µg/mL del mesocarpio del fruto de “huasaí” de la
provincia Maynas

Concentración Absorbancia % de IC50

del extracto Promedio inhibición (µg/mL)
(µg/mL) de DPPH
6666,66 0,23 65,97
3333,33 0,43 31,22
1666,66 0,50 16,41 5096,20
833,33 0,55 8,50
416.66 0,58 4,61

En la Tabla 19 se observa que a concentraciones de 6666,66 µg/mL, obtiene un

porcentaje de inhibición de DPPH de 65,9 % con un valor mayor de IC50 de
5096,20 µg/mL del mesocarpio de fruto de "huasaí" de la provincia Maynas con
menor actividad antioxidante.

58
Tabla 20. Resultado de IC50 µg/mL del mesocarpio del fruto de "huasaí" de la
provincia Chanchamayo

Concentración del Absorbancia Porcentaje IC50

extracto (µg/mL) Promedio de inhibición (µg/mL)
de DPPH
6666,66 0,13 88,1
3333,33 0,36 45,4
1666,66 0,46 25,1 3665,77
833,33 0,53 13,5
416,66 0,56 8

En la Tabla 20 muestra que a concentración de 6666,66 µg/mL obtiene un

porcentaje de inhibición de DPPH de 88,1 % con IC50 de 3665,77 µg/mL del
mesocarpio de fruto de "huasaí” de Chanchamayo.

Tabla 21. Comparación de IC50 µg/mL del estándar Trolox con muestras de
Euterpe precatoria Mart. “huasaí” de ambas provincias

IC50
Euterpe precatoria Mart. “huasaí”
(µg/mL)
α-Tocoferol (Trolox) 3,56
Raíz de la Prov. Maynas 3,86
Raíz de la Prov. Chanchamayo 3,28
Epicarpio de la Prov. Maynas 878,63
Epicarpio de la Prov. Chanchamayo 408,05
Mesocarpio del fruto de la Prov. Maynas 5096,20
Mesocarpio del fruto de la Prov. Chanchamayo 3665,77

En la tabla 21 se observa que la mayor capacidad antioxidante obtuvo las

muestras de “huasaí” procedente de Chanchamayo destacando la raíz con 3,28
µg/mL, evidenciando alta actividad antioxidante que el estándar Trolox, y la menor
actividad antioxidante la obtuvo el mesocarpio de Maynas con IC50 de 5096 µg/mL.

3.8 Comparación IC50 (µg/mL) del estándar Trolox frente a la raíz, epicarpio y
mesocarpio del fruto de “huasaí” de ambas provincias

59
 IC50 (µg/mL) DE RAÍZ, EPICARPIO Y MESOCARPIO DEL FRUTO DE
Euterpe precatoria MART. “HUASAÍ”
6000
TROLOX PROV. MAYNAS PROV. CHANCHAMAYO
5096.2
5000

4000 3665.77
% INHIBICIÓN

3000

2000

1000 878.63
408.05
3.56 3.86 3.28
0
Trolox Raíz Epicarpio Mesocarpio del fruto
IC50 (ug/mL)

Figura 11. Comparación de IC50 µg/mL de Trolox frente a la raíz, epicarpio y mesocarpio del fruto de “huasaí” de ambas
provincias
En la figura 11 podemos observar, el IC50 del Trolox teniendo en cuenta que a menor valor IC50 indica mayor actividad
antioxidante, correspondiendo a la raíz alta actividad antioxidante seguido por el epicarpio y en tercer lugar el mesocarpio del
fruto para ambas provincias.

60
 RAÍZ DE HUASAÍ

TROLOX PROV.MAYNAS PROV.CHANCHAMAYO

6.00

5.00 3.86
3.56
3.28
4.00
% INHIBICIÓN

3.00

2.00

1.00

IC50 µg/mL

Figura 12. Comparación de IC50 µg/mL de Trolox frente a la raíz de “huasaí”

de ambas provincias

En la figura 12 se observa que el Trolox representa un IC50 de 3,28 µg/mL, la raíz

de Chanchamayo representa un IC50 de 3,28 µg/mL y la raíz de Maynas
representa con IC50 de 3,56 µg/mL, ambas raíces obtuvieron una alta actividad
antioxidante, destacando la raíz de Chanchamayo que obtuvo mayor antioxidante
que el estándar Trolox.

61
 EPICARPIO DEL HUASAÍ

TROLOX PROV.MAYNAS PROV.CHANCHAMAYO

878.63
1,000.00

800.00

600.00
% INHIBICIÓN

408.05

400.00

200.00 3.56

0.00

IC50 µg/mL

Figura 13. Comparación de IC50 µg/mL de Trolox frente al epicarpio de

“huasaí” de ambas provincias

En la figura 13 podemos observar, el epicarpio de Chanchamayo con IC50 408,05

µg/mL tiene mayor actividad antioxidante que el epicarpio de Maynas con IC50
878.63 µg/mL respecto a Trolox con IC 50 de 3,28 µg/mL.

62
 MESOCARPIO DEL FRUTO DE HUASAÍ

TROLOX PROV. MAYNAS PROV. CHANCHAMAYO

6,000.00 5096.2

3665.77
4,000.00
% INHIBICIÓN

2,000.00

3.56

0.00

IC50 ug/mL

Figura 14. Comparación de IC50 µg/mL de Trolox frente al mesocarpio del

fruto de “huasaí” de ambas provincias

En la figura 14 podemos observar, el mesocarpio del fruto de Chanchamayo con

IC50 3665,77 µg/mL tiene mayor actividad antioxidante que el mesocarpio del fruto
de Maynas con IC50 5096,92 µg/mL respecto a Trolox que representa con IC 50 de
3,28 µg/mL.

63
3.9 Capacidad Antioxidante Equivalente Trolox (TEAC) para raíz, epicarpio y
mesocarpio del fruto de “huasaí” de la provincia Maynas y
Chanchamayo

La evaluación de actividad antioxidante de las muestras de “huasaí” de cada

provincia mediante el radical DPPH, fueron convertidos a porcentaje de
inhibición expresados como capacidad antioxidante en equivalentes Trolox/g
de muestra (55).

Tabla 22. Resultado de la actividad antioxidante expresados en TEAC

de cada muestra de ambas provincias

Provincias Muestras TEAC (µmoL ET/g)

Raíz 3650,03
Epicarpio 16,19
Maynas
Mesocarpio del fruto 2,79
Raíz 4329,62
Epicarpio 34,83
Chanchamayo
Mesocarpio del fruto 3,88

En la tabla 22, se observa los resultados expresados en TEAC (µmol ET/g), las
cuales las raíces tienen mayor actividad antioxidante en ambas provincias.

64
3.10 Análisis estadísticos de FT

DESCRIPTIVO
Desviación
N Media Mínimo Máximo
Provincia Muestras estándar

Raíz 3 152,58 0,24 152,35 152,82

Maynas Epicarpio 3 14,60 0,69 13,92 15,29
Mesocarpio del
3 4,86 0,76 4,10 5,62
fruto
Raíz 3 155,87 5,87 150,00 161,74
Chanchamayo Epicarpio 3 20,28 1,29 18,99 21,58
Mesocarpio del
3 9,49 1,40 8,09 10,89
fruto

Figura 15. Estadísticas descriptivas de la concentración de FT de “huasaí” de ambas provincias

La figura 15 muestra los FT (mg AG/g) observados según las muestras por provincia. En ella se observan los valores promedio, la
dispersión de las mediciones (Desviación estándar) y valores extremos. La mayor concentración se observó en la raíz de la
provincia de Chanchamayo (promedio = 155,87). En segundo lugar, tenemos la raíz en Maynas con un promedio de 152,58; este
último tuvo una menor dispersión (desviación estándar = 0,24).

65
 ANOVA
Suma de cuadrados Media cuadrática p valor
Provincia

Entre grupos 40957,21 2 20478,60 55420,51 0,000

Maynas Dentro de grupos 2,21 6 0,37

Total 40959,43 8
Chanchamayo

Entre grupos 39928,17 2 19964,08 1571,80 0,000

Dentro de grupos 76,20 6 12,701

Total 40004,38 8

Figura 16. Prueba ANOVA de concentraciones de FT de las muestras de “huasaí” de ambas provincias

En la Figura 16, como el p valor obtenido en la prueba ANOVA proporcionado por el SPSS es menor a 0,05 (p valor = 0,000) se
llega a la conclusión de que los valores de concentración de fenoles en los extractos de las diferentes partes de la palmera son
diferentes en ambas provincia. Para determinar exactamente que extracto tiene mayor concentración se utilizó la prueba de
Tukey.

66
 HSD Tukey Provincia Maynas Provincia Chanchamayo

Subconjunto para alfa = 0,05 Subconjunto para alfa = 0,05

Muestra N
1 2 3 1 2 3

3 4,86 9,49
Mesocarpio del fruto

3 14,60 20,28
Epicarpio

3 152,58 155,87
Raíz

Sig. 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00

Se visualizan las medias para los grupos en los subconjuntos homogéneos.

Figura 17. Comparaciones múltiples de Tukey de FT de “huasaí” de ambas provincias

La figura 17, indica que estadísticamente con un nivel de significancia del 5 % tanto la concentración a base de raíz de la
palmera “huasaí” presenta la mayor concentración de FT, seguido del epicarpio y en tercer lugar el mesocarpio del fruto por
provincias.

67
3.11 Resultados de los análisis estadísticos de actividad antioxidante
DPPH/TEAC

DESCRIPTIVA
Desviación
N Media Mínimo Máximo
estándar
Provincia
Raíz 3 3,87 0,03 3,84 3,89
Epicarpio 3 879,46 2,90 876,13 881,40
Maynas Mesocarpio
3 5101,91 12,79 5087,20 5110,35
del fruto
Trolox 3 3,56 0,01 3,56 3,57
Raíz 3 3,29 0,02 3,27 3,31
Epicarpio 3 408,23 1,16 407,40 409,56
Chanchamayo Mesocarpio
3 3672,86 9,86 3665,04 3683,94
del fruto
Trolox 3 3,56 0,01 3,56 3,57

Figura 18. Estadísticas descriptivas de los valores de IC50 µg/mL de la

actividad antioxidante de “huasaí” de ambas provincias

La figura 18, muestra el valor promedio del IC50 (µg/mL) de las pruebas por
triplicado, en el caso del extracto de la raíz de “huasaí” de la provincia de
Chanchamayo el IC50 es menor (mayor actividad antioxidante) al IC50 (µg/mL) del
Trolox, mientras que en la provincia de Maynas el resultado es mayor por una
mínima diferencia. En cuanto a la dispersión de los resultados se observaron
resultados homogéneos en el Trolox (desviación estándar = 0,01) y en la raíz de
Maynas y Chanchamayo (desviación 0,03 y 0,02 respectivamente).

68
 Suma de
ANOVA gl Media cuadrática F p valor
cuadrados
Provincia
Entre grupos 53509650,16 3 17836550,05 415120,75 0,000
Maynas Dentro de grupos 343,73 8 42,96
Total 53509993,89 11
Entre grupos 28436247,34 3 9478749,11 384511,36 0,000
Chanchamayo Dentro de grupos 197,21 8 24,65
Total 28436444,55 11

Figura 19. Prueba ANOVA de los valores de IC50 µg/mL de la actividad antioxidante de “huasaí” de ambas provincias

Como el p valor es menor a 0,05 en la figura 19, se puede concluir que existen evidencias estadísticas suficientes para afirmar
que los valores de IC50 µg/mL obtenidos para cada extracto son diferentes tanto en ambas provincias. Para determinar
exactamente que extracto tiene el menor IC 50 se utilizó la prueba de Tukey.

69
 HSD Tukey Provincia Provincia
IC50(µg/mL) Maynas Chanchamayo
Muestra N Subconjunto para alfa=0.05 Subconjunto para alfa=0.05
1 2 3 1 2 3
Trolox 3 3,56 3,29
Raíz 3 3,87 3,56
Epicarpio 3 879,46 408,23
Mesocarpio del fruto 3 5101,91 3672,86
Sig. 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00
Se visualizan las medias para los grupos en los subconjuntos homogéneos.

Figura 20. Comparaciones múltiples de Tukey de la palmera de “huasaí”

La Figura 20, agrupa en un solo subconjunto (1) a Trolox y al extracto de la raíz de Euterpe precatoria Mart. “huasaí”, es
decir a un nivel de significancia del 5 %, existe evidencia para indicar que la actividad antioxidante del extracto en base a
la raíz es diferente a los obtenidos en base al epicarpio y mesocarpio del fruto, pero comparable al Trolox, este resultado
se da en ambas provincias.

70
 Prueba T de Student
Desviación
Provincia N Media p valor
estándar
Muestra Actividad
Maynas 3 152,58 0,24
FT (mg AG/g) 0,388
Chanchamayo 3 155,87 5,87
Raíz Maynas 3 3,87 0,03
IC50 0,000
Chanchamayo 3 3,29 0,02
Maynas 3 14,60 0,69
FT (mg AG/g) 0,003
Chanchamayo 3 20,28 1,29
Epicarpio
Maynas 3 879,46 2,90
IC50 0,000
Chanchamayo 3 408,23 1,16
Maynas 3 4,86 0,76
FT (mg AG/g) 0,007
Chanchamayo 3 9,49 1,40
Mesocarpio del
fruto Maynas 3 5.101,91 12,79
IC50 (µg/mL) 0,000
Chanchamayo 3 3.672,86 9,86

Figura 21. Prueba T de Student. Comparación por pares

En la figura 21, la comparación por pares entre los promedios conseguidos en la provincia de Maynas versus los resultados
conseguidos en la provincia de Chanchamayo.

71
En primer lugar, no se observa diferencia significativa en los valores de fenoles
totales obtenidos en los extractos en base a la raíz de la palmera, mientras que en
el resto de las partes si se observa (p valor menor a 0,05) con ventaja favorable a
la provincia de Chanchamayo. En cuanto a la actividad antioxidante IC50, si se
encontró una diferencia estadística significativa en raíz, epicarpio y mesocarpio
del fruto (p valor 0,000) también con ventajas para la provincia de Chanchamayo.

Otra forma de expresar la actividad antioxidante es en valor TEAC µg/mL.

Provincia Muestras N Media Desviación

Estándar
Raíz 3 3680,27 26,03
Epicarpio 3 16,19 0,05
Maynas
Mesocarpio
3 2,79 0,01
del fruto
Raíz 3 4331,89 26,20
Epicarpio 3 34,88 0,10
Chanchamayo Mesocarpio
3 3,88 0,01
del fruto

Figura 22. Resultados TEAC expresados en µmol TE/g de muestra de

“huasaí” para cada provincia

En la figura 22 indica los valores promedio, la dispersión de las mediciones

(Desviación estándar) para las muestras de raíz, epicarpio, mesocarpio del fruto.
La mayor desviación estándar la obtuvieron las raíces de Maynas y Chanchamayo
(26,03 y 26,20 respectivamente) y la menor e igual desviación estándar (0,01) la
obtuvo el mesocarpio del fruto de ambas provincias.

72
ANOVA Suma de cuadrados gl Media cuadrática F p valor
Provincia
Entre grupos 26949454,16 2 13474727,08 59678,41 0,000
Dentro de grupos 1354,73 6 225,79
Maynas
Total 26950808,90 8
Entre grupos 37196843,35 2 18598421,67 81287,12 0,000
Chanchamayo Dentro de grupos 1372,79 6 228,80
Total 37198216,14 8

Figura 23. Prueba ANOVA. Valores TEAC de “huasaí” Entre grupos de ambas provincias

En la figura 23 se muestra la prueba de ANOVA que presenta un p valor menor a 0,05 (p valor = 0,000) tanto en la provincia
Maynas como en Chanchamayo, lo cual permite concluir que la actividad antioxidante expresada en TEAC no fue igual entre la
raíz, epicarpio y mesocarpio del fruto.

73
HSD Tukey Provincia=Maynas Provincia=Chanchamayo
Subconjunto para alfa = 0,05 Subconjunto para alfa = 0,05
Muestra N
1 2 1 2
Mesocarpio del fruto 3 2,79 3,88
Epicarpio 3 16,19 34,88
Raíz 3 3680,27 4331,89
Sig. 0,55 1,00 0,10 1,00

Se visualizan las medias para los grupos en los subconjuntos homogéneos.

Figura 24. Comparaciones de Tukey

En la Figura 24 nos permite concluir a un nivel de significancia del 5 % que la actividad Antioxidante de la raíz de la palmera
Euterpe precatoria Mart. “huasaí” es estadísticamente significativa y superior a la actividad antioxidante producida por los
extractos del mesocarpio del fruto y epicarpio tanto en Maynas como en Chanchamayo.

74
 IV. DISCUSIÓN

4.1 Discusión

La presente investigación realizada compara la actividad antioxidante del

extracto de la raíz, epicarpio y mesocarpio del fruto de Euterpe precatoria Mart.
“huasaí” procedente de la provincia Maynas entre la provincia Chanchamayo.

En la tabla 6 demuestra las características físicas de “huasaí” de la

provincia Maynas se observó que el fruto fue superior en tamaño y peso que el
fruto procedente de Chanchamayo. Nuestros estudios son similares a los
resultados realizados por Ortega E. (38) et al. (2015) con un peso de 1,79g; una
longitud de 1,32 cm; y un diámetro de 1,42 cm del fruto de huasaí de la provincia
de Maynas.

En la tabla 7 demuestra el resultado del rendimiento del extracto etanólico

seco de “huasaí”, se produjeron 6,2 %; 1,5 %; 5,9 % en la raíz, epicarpio y
mesocarpio del fruto respectivamente oriundos de Chanchamayo, estos datos
obtenidos fueron considerables que las muestras de Maynas con 4,5 %; 0,9 %;
13,7 % en la raíz, epicarpio y mesocarpio del fruto respectivamente. Mientras
Ortega R, et al. (2015) refiere que en el mesocarpio seco obtuvo un rendimiento
de 10,3 % a partir de 100 kg de fruto fresco de “huasaí”, sobresaliente a nuestro
estudio (39). Soto alude que pudieran corresponder a factores como
concentración, tipo de solvente, almacenamiento, temperatura, tiempo de
contacto, entre otros (56).

En la tabla 9 se exhibe el análisis fitoquímico del extracto etanólico de

“huasaí”, en las dos provincias se distinguieron compuestos fenólicos y saponinas
en raíz pero no mostraron en el mesocarpio del fruto azúcares reductores en raíz
y mesocarpio del fruto para las dos provincias; compuestos fenólicos,
antocianinas y antraquinonas presentó en el epicarpio de Chanchamayo;
solamente mostró antraquinonas para el mesocarpio del fruto de Maynas. En
ambas provincias exhibieron los metabolitos secundarios: carbohidratos

75
generales, flavonoides, taninos, esteroides, aminoácidos, alcaloides y glucósidos
para raíz, epicarpio y mesocarpio del fruto. Sotero en su prueba fitoquímica del
fruto de “huasaí” procedente de Loreto, predominaron triterpenos, esteroides,
azúcares reductores, fenoles, taninos y flavonoides (39). Nuestros resultados
concordaron en relación a compuestos fenólicos, esteroides, azúcares reductores,
taninos y flavonoides en raíz, entretanto el autor no reportó fitoquímicos en el
epicarpio y mesocarpio del fruto independientemente, sin embargo sí en el fruto
entero. Asimismo, en nuestros resultados la existencia de aminoácidos fue
evidente en todos las extractos de ambas provincias.

En la tabla 12 muestra el contenido de FT por el método Folin-Ciocalteu,

en la raíz, epicarpio y mesocarpio del fruto “huasaí” de Chanchamayo
comprenden valores sobresalientes de compuestos fenólicos a diferencia que las
muestras de Maynas. La raíz de “huasaí” de Chanchamayo obtuvo una alta
cantidad de FT; seguida por el epicarpio y mesocarpio del fruto. En las muestras
de Maynas la cantidad de FT también mostró mayor en la raíz, seguida por el
epicarpio y mesocarpio del fruto. En nuestra investigación el mesocarpio del fruto
de “huasaí” de Maynas y Chanchamayo evidenciaron FT de 4,86 mg/Eq. AG/g y
9,49 mg Eq. AG/g respectivamente, valor ínfimo al reportado por Kang J et al.,
(2012) recogidas en Bolivia que alcanzó en el mesocarpio del fruto 73,0 ± 4,8 mg
Eq. AG/g, en Euterpe precatoria Mart. (5).

El porcentaje de inhibición de DPPH de la raíz, epicarpio y mesocarpio del

fruto de "huasaí" oriundas de cada provincia se observan en las tablas del 14 - 19,
consiguieron mayor actividad antioxidante en todas las muestras de
Chanchamayo predominando la raíz.

En la tabla 21 se observa importante actividad antioxidante en la raíz que

en el epicarpio y mesocarpio del fruto en las dos provincias. En Chanchamayo la
raíz obtuvo un IC50 de 3,28 µg/mL, manifestando mejor actividad antioxidante que
el estándar Trolox con IC50 de 3,56µg /mL. Para la provincia de Maynas el IC50 de
la raíz conresultó 3,86 µg/mL, valor inferior publicado por Sotero et al., originario
de Loreto donde la raíz obtuvo un IC50 de 540 µg/mL (39).

76
 Los valores de TEAC son mostrados en la tabla 22, al contrastar se halló
que la actividad antioxidante de la raíz, epicarpio y mesocarpio del fruto de
“huasaí” de Chanchamayo resultaron mejores que las muestras de “huasaí” de
Maynas por medio del método DPPH. El mesocarpio del fruto de “huasaí” de
Chanchamayo mostró 3,88 µmol ET/g en tanto en Maynas el mesocarpio del fruto
de “huasaí” fue 2,79 µmol ET/g estos resultados de ambas provincias resultaron
superiores a los reportados por Kang et al. (2012) recolectadas en Bolivia que
obtuvo 320,3 ± 23,8 µmol ET/g para Euterpe precatoria y 133.4 ± 11.2 µmol TE/g
para Euterpe oleracea Mart. (5). En la investigación concluida por Garzón G.
(2017) la actividad antioxidante del fruto de Euterpe oleracea Mart “acaí”
procedente de Colombia efectuado por el método DPPH el valor fue 26,93 ±
332.8 μmol TE/g (35).

En los resultados estadísticos obtenidos mediante la prueba ANOVA, el

contenido de FT de la muestra de estudio existe diferencia significativa (p =0,000)
en los valores de concentración de FT y los valores de IC50 en los extractos de las
diferentes muestras de la palmera en cada una de las provincias.

En los resultados de cuantificación de FT de “huasaí” de igual especie de

distintas provincias, no se observa diferencia significativa en los valores de FT
obtenidos en los extractos en la raíz de “huasaí”, entretanto en el resto de las
muestras sí se observa (p valor < 0,05) con ventaja a favor de la provincia de
Chanchamayo.

Se encontró que la raíz tiene mejor actividad antioxidante a diferencia del

epicarpio y mesocarpio del fruto de ambas provincias. La raíz, epicarpio y
mesocarpio del fruto de la provincia de Chanchamayo si presenta una diferencia
estadísticamente significativa (p< 0,00) al compararlo frente a las muestras
oriundas de Maynas y al estándar Trolox.

Quiñones M, (2012) publicó que varios factores ambientales como la

exposición a la luz, el grado de madurez o de conservación, pueden perjudicar la
capacidad del contenido total de polifenoles (57).

77
 Mora F, (2015) señala que los factores ecológicos se relacionan con los
procesos fisiológicos de las especies vegetales que conllevan en su crecimiento,
desarrollo y producción; también los factores edáficos influyen en las propiedades
físico-químico del suelo que unido a la condición genética de la planta interactúan
entre sí (58).

78
4.2 Conclusiones

 Se comparó la actividad antioxidante del extracto etanólico de la raíz,

epicarpio y mesocarpio del fruto de Euterpe precatoria Mart. “huasaí”
procedente de la provincia de Maynas versus Chanchamayo hallándose
diferencias significativas con mayor actividad antioxidante en las muestras
de estudio oriundas de Chanchamayo en la raíz con IC50 de 3,28 µg/mL
frente a la raíz de Maynas con IC50 de 3,86 µg/mL, teniendo como estándar
Trolox (IC50 3,56 µg/mL).

 Se comparó los metabolitos secundarios del extracto etanólico de la raíz,

epicarpio y mesocarpio del fruto de Euterpe precatoria Mart. “huasaí”,
presentan flavonoides y taninos en todas las muestras de estudio para
ambas provincias, se identificó compuestos fenólicos en raíz y epicarpio
para la provincia de Chanchamayo y solo en raíz para la provincia de
Maynas; catequinas y antocianinas en el epicarpio exclusivo para la
provincia de Chanchamayo.

 La determinación de fenoles totales mediante el método Folin-Ciocalteu fue

superior en la raíz con 155,87 mg Eq. AG/g; epicarpio 20,28 mg Eq. AG/g y
mesocarpio del fruto 9,49 mg Eq. AG/g, correspondiendo estos a la
provincia de Chanchamayo a diferencia de la provincia de Maynas que
resultó en la raíz con 152,58 mg Eq. AG/g; epicarpio 14,60 mg Eq. AG/g; y
mesocarpio del fruto 4,86 mg Eq. AG/g de muestra.

 Se determinó la actividad antioxidante mediante el método DPPH

hallándose un IC50 de 3,86 µg/mL; 878,63 µg/mL y 5096,20 µg/mL para el
extracto etanólico de la raíz, epicarpio y mesocarpio del fruto de Euterpe
precatoria Mart. “huasaí” respectivamente procedente de la provincia de
Maynas. En la raíz, epicarpio y mesocarpio del fruto de Euterpe precatoria
Mart “huasaí” obtuvo un IC50 de 3,28µg/mL; 408,05 µg/mL y 3665,77 µg/mL

79
 para el extracto etanólico de la raíz, epicarpio y mesocarpio del fruto
respectivamente oriundo de la provincia de Chanchamayo.

4.3. Recomendaciones

 Investigar el estudio de factores que puedan influir la actividad antioxidante

de la raíz de Euterpe precatoria Mart. “huasaí”.

 Fomentar la ingesta de Euterpe precatoria Mart. “huasaí” en regiones

urbanas, con el propósito de obtener beneficios saludables, siendo un fruto
oriundo de la selva.

 Desarrollar investigaciones complementarias en la identificación de las

estructuras de compuestos fenólicos hallados en la raíz de Euterpe
precatoria Mart. de la provincia de Chanchamayo, porque podría servir de
materia prima para que la industria farmacéutica extraiga el ácido tánico
para la elaboración de medicamentos antidiarréicos, productos cosméticos
y por el contenido de sustancias antioxidantes.

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Rica. agronomía costarricense 39(1): 71-89 [Internet]. 2015; [citado el 10 de
marzo de 2018] Disponible en: http://www.scielo.sa.cr

89
ANEXOS

90
 Anexo A. Matriz de consistencia

TÍTULO PROBLEMA OBJETIVO HIPÓTESIS VARIABLE

General Independiente
“Actividad antioxidante del extracto etanólico de la raíz, y del
fruto de Euterpe precatoria Mart. “huasaí” procedente de la

¿Cuál será la diferencia Existe diferencia en la

entre la actividad Comparar la actividad actividad antioxidante del
antioxidante del extracto antioxidante del extracto extracto etanólico de la
provincias Maynas y Chanchamayo”

etanólico de la raíz, etanólico de la raíz y el fruto de Provincia de

raíz, epicarpio y mesocarpio
epicarpio y mesocarpio del Euterpe precatoria Mart. “huasaí” Maynas y
del fruto de Euterpe
fruto de Euterpe precatoria procedente de la provincia de Chanchamayo
precatoria Mart. “huasaí”
Mart. “huasaí” procedente Maynas respecto a la especie procedente de la provincia
de la provincia Maynas y de oriunda de Chanchamayo. de Maynas y Chanchamayo.
Chanchamayo?

Específicos Dependiente

Actividad
1. ¿Cuál es el contenido de 1. Comparar los metabolitos antioxidante del
1.- El extracto etanólico de extracto
fenoles totales del extracto secundarios del extracto
la raíz, epicarpio y etanólico de la
etanólico de la raíz, etanólico de la raíz,
mesocarpio del fruto de raíz, epicarpio y
epicarpio y mesocarpio del epicarpio y mesocarpio del
Euterpe precatoria Mart. mesocarpio del
fruto de Euterpe precatoria fruto de Euterpe precatoria
“huasaí” en la provincia de fruto de Euterpe
Mart. “huasaí” de la Mart. “huasaí” procedente
Maynas y Chanchamayo precatoria Mart.
provincia de Maynas y de la provincia de Maynas
poseen fenoles totales. “huasaí”.
Chanchamayo? y Chanchamayo

91
 2.- Determinar las 2.- Los extractos etanólicos
2. ¿Cuál es la concentración
concentraciones de fenoles de la raíz, epicarpio y
inhibitoria media (IC50) de la mesocarpio del fruto de
actividad antioxidante del totales del extracto etanólico de
la raíz, epicarpio y mesocarpio Euterpe precatoria Mart.
extracto etanólico de la raíz, “huasaí” poseen actividad
epicarpio y mesocarpio del del fruto de Euterpe precatoria
Mart. “huasaí” procedente de la antioxidante de la provincia
fruto de Euterpe precatoria
provincia de Maynas y de Maynas y Chanchamayo.
Mart. “huasaí“ de la
provincia de Maynas y Chanchamayo.
Chanchamayo?

3. ¿Cuáles son los 3.-Determinar la actividad 3.- Los metabolitos

metabolitos del extracto antioxidante del extracto secundarios mayoritarios de
etanólico de la raíz etanólico de la raíz, epicarpio y los extractos etanólicos de
epicarpio y mesocarpio del mesocarpio del fruto de Euterpe la raíz, epicarpio y
fruto de Euterpe precatoria precatoria Mart “huasaí” mesocarpio del fruto de
Mart. “huasaí” procedente procedente de la provincia de Euterpe precatoria Mart.
de la provincia de Maynas y Maynas y Chanchamayo. “huasaí” poseen actividad
Chanchamayo responsables antioxidante procedente de
de la actividad antioxidante? la provincia de Maynas y
Chanchamayo.

92
 Anexo B. Operacionalización de Variables

OPERACIONAL

INSTRUMENTO
CONCEPTUAL
DEFINICIÓN

DEFINICIÓN
VARIABLES

DIMENSIÓN

INDICADOR

ESCALA
ITEMS

ITEMS
INDEPENDIENTE

De
Estación seca mínima a
Lugar de Lugares de Prov. máxima
procedencia procedencia Clima
Maynas Senamhi De
de la de la especie mínima a
Provincias

(Bibliografía Estación lluviosa

especie de Euterpe máxima
científica
vegetal de precatoria
Prov. Clima especializad De
estudio Mart “huasaí”
Chanchamayo a) Estación Seca mínima a
de la provincia
máxima
Maynas y
De
Chanchamayo
Estación lluviosa mínima a
máxima
Capacidad Capacidad del Operación
de raíz y del fruto
extracto etanólico
DEPENDIENTE

de una extracto preliminar Color

antioxidante del

sustancia etanólico de negro a

para raíz y el fruto (Identificación Certificado Caracterí violáceo
Frutos SI/NO
Actividad

neutralizar de Euterpe Macroscópica) Taxonómico stica del

radicales precatoria fruto
libres Mart.
“huasaí” para
93
 neutralizar Color
SI/NO
radicales rojizo
libres probada Caracte
Ausen
mediante el Raíz rística de
cia de
reactivo 1,1- la raíz SI/NO
hijuelos
difenil-2-picril-
hidrazilo De
(DDPH) Sistema de Grado de insoluble
Solubilidad SI/NO
solventes Solubilidad a Soluble

% de % de
capaci formación captació Menor a
% de Inhibición dad de n de mayor
del radical libre antioxi Método molécula radicale actividad
en función del dante DPPH diamagné s libres antioxida
Trolox de la tica expresado nte
muestr estable en IC50
a
Cantidad de Cantidad de Curva de Canti Método formación Fenoles De
fenoles fenoles totales calibración del dad Folin- del ión totales mayor a
totales de de raíz y fruto estándar de mg de Ciocalteu fenolato expresa menor %
una de “huasaí” Eq. AG/g fenoles do en % de
sustancia determinado totales fenoles
expresados por el método totales
en mg/g de Folin-
Ciocalteu

94
 Anexo C. Instrumento y recolección de datos

INSTRUMENTO Y RECOLECCIÓN DE DATOS

ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE LA RAÍZ Y EL FRUTO

TÍTULO
DE Euterpe precatoria MART. “huasaí” PROCEDENTE DE LA PROVINCIA MAYNAS Y CHANCHAMAYO
Carmen Rosa Garamendi Alacote
ANALISTAS
María Elizabeth Hernández Cerna
ASESORA Mg. Q.F. Carmen Gladys Peña Suasnabar
Método de FOLIN-CIOCALTEU
MÉTODOS
Método del radical DPPH
MUESTRA Extracto etanólico de la raíz, epicarpio y mesocarpio del fruto de Euterpe precatoria Mart. “huasaí”

MÉTODO FOLIN-CIOCALTEU

AG
Concentración [mg Eq. de extracto] =
Vol. Vol. g
PROVINCIAS Muestras (A, B, C, D, E F.d A1 A2 A3 % FT
muestra Final [mg/g] x Fd x Vol. final
ppm)
Vol. Muestra
R          
Maynas E          
M            
R            
Chanchamayo E            
M          

95
 mg Eq.
Ácido gálico AG/g
Estándar

MÉTODO DPPH

𝐏𝐨𝐫𝐜𝐞𝐧𝐭𝐚𝐣𝐞 𝐝𝐞 𝐢𝐧𝐡𝐢𝐛𝐢𝐜𝐢ó𝐧
Concentración 𝑨𝒎𝒖𝒆𝒔𝒕𝒓𝒂 − 𝑨𝒃𝒍𝒂𝒏𝒄𝒐
PROVINCIAS Muestras µg/mL de A1 A2 A3´ =𝟏−( ) ∗ 𝟏𝟎𝟎 IC50
𝑨𝑹
muestra

R      
Maynas E      
M      
R      
Chanchamayo E      
M      
Estándar Trolox
A1: Promedio de la absorbancia de la muestra; A2: Absorbancia del blanco de la muestra; A3: Absorbancia
del blanco de la muestra; A3´: Promedio de la Absorbancia del radical DPPH.

96
 Anexo D. Evidencia de trabajo de campo

1. Certificación de identificación botánica de Euterpe precatoria Mart.

“huasaí” de la provincia de Maynas.

97
2. Certificación de identificación botánica de Euterpe precatoria Mart.
“huasaí” de la provincia de Chanchamayo.

98
Figura 25. Procedimiento previo al secado para todas las muestras de “huasaí” extendidas dentro de bolsas de papel
kraft de la provincia Maynas y Chanchamayo

99
Figura 26. Proceso de obtención del extracto etanólico de raíz, epicarpio
y mesocarpio del fruto de “huasaí” de ambas provincias

100
Figura 27. Medición de absorbancias por el espectrofotómetro UV/visible

101
Figura 28. Reacción del radical DPPH con un cambio de coloración de color
morado (oxidado) a color amarillo (reducido) de la raíz de “huasaí” de
ambas provincias

102
Figura 29. Reacción del radical DPPH del epicarpio de “huasaí” de ambas
provincias

103
Figura 30. Reacción del radical DPPH del mesocarpio del fruto "huasaí" de
ambas provincias

104
 Anexo E. Imágenes relacionado a la investigación

Figura 31. Estructura de palmeras

Fuente: Comunidades Llaquash, San Martín, Perú 2014

105
Figura 32. Estructura de las partes de Euterpe precatoria Mart. “huasaí”
Fuente: Fotos del "huasaï". Hernández M, Mass (3).

106
Figura 33. El palmito, parte comestible
Fuente: Hernández M.(3)

107
Figura 34. Exportación de palmitos del Perú 2017-2018 Agrodataperú.

108
Figura 35. Exportación de palmitos preparados

109
Figura 36. Empresas de exportación de palmito

110
 Anexo F. Flujograma del proceso de investigación

Figura 37. Obtención del extracto etanólico seco de raíz, epicarpio y

mesocarpio del fruto de "huasaí" de ambas provincias

111
 EVALUACIÓN DEL CONTENIDO DE FENOLES
TOTALES POR EL MÉTODO FOLIN - CIOCALTEU

Extracto etanólico por muestra de raíz, epicarpio y

mesocarpio del fruto de "huasaí" de la provincia
Maynas y Chanchamayo

Procedimiento por triplicado por muestra

EVALUACIÓN DEL CONTENIDO DE FENOLES
TOTALES
del "huasaí"
POR EL MÉTODO FOLIN - CIOCALTEU

Preparar
Estándar ácido gálico Extracto etanólico por muestra Blanco de la
de raíz, epicarpio y
mesocarpio del fruto de "huasaí" de la provincia muestra
Maynas y Chanchamayo

Procedimiento por triplicado por muestra

del "huasaí"

Estándar ácido gálico Preparar Blanco de la

muestra

Agregar 3.75 mL reactivo Folin-Ciocalteu

Agitar x 5 min a temperatura ambiente

Agregar 3.75 mL reactivo Folin-Ciocalteu

Agitar x 5 min a temperatura ambiente

Agregar 3.75 mL Na CO 20 % a cada dilución

Agregar 3.75 mL Na2CO3 202% a cada
3 dilución

Enrasar con 10 mL de agua destilada

Reposo por 2 horas a temperatura ambiente

Enrasar con 10 mL de
y protegido de agua
la luz destilada

Reposo por 2 horas a temperatura ambiente

Lectura en el espectrofotómetro UV- visible = 765 nm

y protegido de la luz

Lectura en el espectrofotómetro UV- visible = 765 nm

Figura 38. Procedimiento del método de Folin - Ciocalteu

112
Figura 39. Procedimiento del método DPPH

113
Anexo E. Hoja de cálculo

I. CÁLCULO DE CUANTIFICACIÓN DE FT

1. Se realizó con los datos de recta patrón se utilizó la siguiente la

fórmula

Fuente: Cruzado M, Pastor A, Castro N, Cedrón JC. (53)

2. Se despeja “x” de la ecuación de la curva de calibración de ácido
gálico, siendo el mismo procedimiento para todas las muestras y
se reemplaza el valor de la absorbancia en “y”, y se obtiene
valores obtenidos en fenoles totales.
A. Provincia Maynas

 Raíz:
"𝐲" − 𝟎, 𝟎𝟎𝟐𝟏 0,652 − 0,0021
𝐱= = = 4,88
𝟎, 𝟏𝟑𝟑𝟏 0,1331

 Epicarpio
0,063 − 0,0021
x= = 0,45
0,1331

 Mesocarpio del fruto

𝟎, 𝟎𝟑𝟕 − 𝟎, 𝟎𝟎𝟐𝟏
𝐱= = 𝟎, 𝟐𝟔
𝟎, 𝟏𝟑𝟑𝟏
B. Provincia Chanchamayo

 Raíz
0,651 − 0,0021
𝐱= = 4,8
0,1331

 Epicarpio
0,651 − 0,0021
𝐱= = 0,69
0,1331

 Mesocarpio del fruto

0,095 − 0,0021
x= = 0,69
0,1331

114
 II. CÁLCULO DE LA ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE IC50
µg/mL POR EL MÉTODO DPPH

Se calculó los resultados de las muestras de estudio de la

capacidad antioxidante expresados en µg/mL y del estándar Trolox.
𝟓𝟎 − 𝐛
IC50 =
𝐦
IC50: Concentración necesaria del antioxidante para reducir
en un 50 % la concentración inicial del radical DPPH.
b: Intercepto de la línea de regresión lineal.
m: Pendiente de la línea de regresión lineal.

50−0,1271
Estándar Trolox IC50 = = 3,56 µg/mL
13,993

A. Provincia de Maynas
 Raíz

50−0,0965
IC50 = = 3,86 µg/mL
12,897
 Epicarpio

50−3,4326
IC50 = = 878,63 µg/mL
0,053

 Mesocarpio del fruto

50−0,572
IC50 = = 5096,2 µg/mL
0,0098

B. Provincia de Chanchamayo

Raíz
50−0,4139
IC50 = = 3,28 µg/mL
15,084

 Epicarpio

50−6,1344
IC50 = = 408,05 µg/mL
0,1075

Mesocarpio del fruto

50−3,0781
IC50 = = 3665,77 µg/mL
0,0128

115